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基于p30-gp90融合蛋白的禽网状内皮组织增生症病毒抗体间接ELISA方法的建立 被引量:1
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作者 栾晓宁 郭龙宗 +3 位作者 马广斌 李玉燕 王一新 巩新民 《中国动物检疫》 CAS 2021年第10期107-114,共8页
禽网状内皮组织增生症病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)既可以诱发禽的肿瘤性疾病,又能引起感染禽群免疫抑制,给养禽业带来重大经济损失。REV抗体监测对于该病的诊断、预防和控制具有重要意义。本试验首先通过大肠杆菌表达系统表... 禽网状内皮组织增生症病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)既可以诱发禽的肿瘤性疾病,又能引起感染禽群免疫抑制,给养禽业带来重大经济损失。REV抗体监测对于该病的诊断、预防和控制具有重要意义。本试验首先通过大肠杆菌表达系统表达了重组REV p30-gp90融合蛋白,随后建立了基于该融合蛋白的REV抗体间接酶联免疫吸附试验(ELISA),并对反应条件进行了优化。结果显示,p30-gp90间接ELISA的灵敏度(1:51200)是间接免疫荧光法(IFA)(1:6400)的8倍,与其他常见禽类病毒无交叉反应,且具有良好的批内和批间重复性。对从山东省部分地区养殖场采集的690份血清样品,同时利用p30-gp90间接ELISA和IFA进行检测,发现20.87%的血清样品经间接ELISA检测为阳性,间接ELISA和IFA的总体符合率为96.96%。结果表明,本研究建立的间接ELISA检测方法具有特异性强、敏感性高和重复性好的优势,为REV的快速诊断、流行病学调查和血清学监测提供了技术支持。 展开更多
关键词 禽网状内皮组织增生症病毒 p30-gp90融合蛋白 间接ELISA 抗体
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Porcine Immunoglobulin Fc Fused P30/P54 Protein of African Swine Fever Virus Displaying on Surface of S. cerevisiae Elicit Strong Antibody Production in Swine 被引量:10
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作者 Chen Chen Deping Hua +5 位作者 Jingxuan Shi Zheng Tan Min Zhu Kun Tan Lilin Zhang Jinhai Huang 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2021年第2期207-219,共13页
African swine fever virus(ASFV)infects domestic pigs and European wild boars with strong,hemorrhagic and high mortality.The primary cellular targets of ASFV is the porcine macrophages.Up to now,no commercial vaccine o... African swine fever virus(ASFV)infects domestic pigs and European wild boars with strong,hemorrhagic and high mortality.The primary cellular targets of ASFV is the porcine macrophages.Up to now,no commercial vaccine or effective treatment available to control the disease.In this study,three recombinant Saccharomyces cerevisiae(S.cerevisiae)strains expressing fused ASFV proteins-porcine Ig heavy chains were constructed and the immunogenicity of the S.cerevisiae-vectored cocktail ASFV feeding vaccine was further evaluated.To be specific,the P30-Fcγand P54-Fcαfusion proteins displaying on surface of S.cerevisiae cells were produced by fusing the Fc fragment of porcine immunoglobulin IgG1 or IgA1 with p30 or p54 gene of ASFV respectively.The recombinant P30-Fcγand P54-Fcαfusion proteins expressed by S.cerevisiae were verified by Western blotting,flow cytometry and immunofluorescence assay.Porcine immunoglobulin Fc fragment fused P30/P54 proteins elicited P30/P54-specific antibody production and induced higher mucosal immunity in swine.The absorption and phagocytosis of recombinant S.cerevisiae strains in IPEC-J2 cells or porcine alveolar macrophage(PAM)cells were significantly enhanced,too.Here,we introduce a kind of cheap and safe oral S.cerevisiae-vectored vaccine,which could activate the specific mucosal immunity for controlling ASFV infection. 展开更多
关键词 African swine fever virus(ASFV) S.cerevisiae porcine immunoglobulin Fc p30-Fcγ/p54-Fcαfusion proteins
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动态压应力对生长板软骨前体干细胞PTHrP及细胞外基质mRNA表达的影响 被引量:8
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作者 祁军 陈安民 +4 位作者 张虹 李贵刚 张迪 李昆朋 郭风劲 《中华小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2010年第5期382-386,共5页
目的 研究动态压应力对体外培养的大鼠生长板软骨前体干细胞甲状旁腺激素相关肽(PTHrP)以及软骨特性细胞外基质mRNA表达的影响.方法 免疫磁珠分选并体外培养大鼠软骨前体干细胞,用自行设计制作的可控细胞压力加载装置对细胞进行不同... 目的 研究动态压应力对体外培养的大鼠生长板软骨前体干细胞甲状旁腺激素相关肽(PTHrP)以及软骨特性细胞外基质mRNA表达的影响.方法 免疫磁珠分选并体外培养大鼠软骨前体干细胞,用自行设计制作的可控细胞压力加载装置对细胞进行不同强度(30 mmHg、60 mmHg、90mmHg)和持续时间(1 h、6 h、24 h)的压应力刺激,未刺激组为对照组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术分别检测各组细胞的PTHrP以及软骨特性细胞外基质(Ⅱ型胶原、X型胶原以及aggreean)mRNA表达并进行半定量分析.结果 生长板软骨前体干细胞在30 mmHg、60 mmHg、90 mmHg动态压力培养环境下,各时间点PTHrP、Ⅱ型胶原以及aggrecan mRNA表达水平明显增强并高于对照组(P〈0.05);Ⅱ型胶原以及aggrecan mRNA表达水平于6h达高峰,PTHrP mRNA的表达水平随时间增加而增强,24 h仍有较高水平的表达;且压力值越大,相同时间点mRNA相对表达量越高.X型胶原表达水平较低且与对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05).结论 适当的动态压应力能有效促进体外培养的大鼠软骨前体干细胞Ⅱ型胶原及aggreean mRNA表达,PTHrP在此力学信号转导过程中可能起重要的作用. 展开更多
关键词 压应力 生长面 干细胞 甲状旁腺激素相关蛋白质 细胞外基质
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缺血后处理对大鼠缺血-再灌注肺损伤血红素加氧酶-1表达的影响 被引量:6
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作者 江莹 夏中元 +3 位作者 高瑾 徐金金 孟庆涛 侯家保 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1122-1126,共5页
目的观察缺血后处理(IPO)对大鼠肺缺血-再灌注损伤(IRI)期间血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响,探讨其保护机制。方法48只成年SD大鼠,随机(随机数字法)分成6组(n=8),假手术组(S组);缺血-再灌注组(I/R组):夹闭左肺门缺血... 目的观察缺血后处理(IPO)对大鼠肺缺血-再灌注损伤(IRI)期间血红素加氧酶-1(HO-1)表达的影响,探讨其保护机制。方法48只成年SD大鼠,随机(随机数字法)分成6组(n=8),假手术组(S组);缺血-再灌注组(I/R组):夹闭左肺门缺血45min,再灌注105min;缺血后处理组(IPQ组):缺血后再灌注30s,停灌30s,反复3次,再恢复灌注102min;氯化高铁血红素(Hemin)+缺血-再灌注组(ZnPPIX+IPO组):术前连续2d腹腔注射Hemin40junol/(kg·d),余同I/R组;锌原卟啉K+缺血后处理组(ZnPPK+IPO组):术前24h腹腔注射ZnPPIX20mg/(kg·d),余同IPO组;氯化高铁血红素+假手术组(HM+S组)。测定各组肺组织HO-1蛋白表达水平、动脉血氧分压(Pa02)、肺组织湿/干质量比(W/D)和血清丙二醛(MDA)含量,观察肺组织病理变化。组间比较采用单因素方差分析,组内比较采用配对*检验。结果1/R组肺组织HO-1蛋白表达(0.177±0.015)与S组和HM+S组相比差异具有统计学意义(P〈0.01,P〈0.05),但与IPO组(0.194士0.017)及HM+I/R组(0.209±0.013)相比差异具有统计学意义(P〈0.05,P〈0.01)o各实验组Pa02均显著低于S组(90±11)mmHg,IPO组和HM+I/R组PaO2与1/11组相比较,差异具有统计学意义(P〈0.01);I/R组较S组肺组织W/D、血清MDA含量升高,肺组织病理损伤严重,而IPO组和HM+I/R组上述改变差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论早期短时程缺血后处理能明显减轻在体大鼠肺IRI,其作用机制与其上调HO-1蛋白表达及抑制脂质过氧化的损伤作用有关。 展开更多
关键词 缺血后处理 缺血-再灌注 损伤 血红素加氧酶 1-氯化高铁血红素 锌原卟 啉Ⅸ 湿 干质量比
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