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非洲猪瘟病毒p37蛋白生物信息学分析及其多克隆抗体制备
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作者 张梦杨 何健 +1 位作者 刘阳坤 姚伦广 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期300-309,共10页
【目的】获取ASFV p37蛋白,并制备抗ASFV p37蛋白的多克隆抗体,为ASFV p37蛋白结构和功能研究提供材料。【方法】应用生物信息学工具对ASFV HLJ/2018(GenBank登录号:MK333180.1)p37蛋白进行分析,设计合成p37基因,并构建pET32a-p37重组... 【目的】获取ASFV p37蛋白,并制备抗ASFV p37蛋白的多克隆抗体,为ASFV p37蛋白结构和功能研究提供材料。【方法】应用生物信息学工具对ASFV HLJ/2018(GenBank登录号:MK333180.1)p37蛋白进行分析,设计合成p37基因,并构建pET32a-p37重组质粒。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE对重组蛋白的可溶性进行分析。收集菌体进行超声破碎,分离沉淀并使用8 mol/L尿素变性后离心,用0.45μm滤膜过滤离心后的上清,使用镍亲和层析柱纯化蛋白,通过SDS-PAGE、Western blotting对其纯化效果及特异性进行验证。将纯化后的p37蛋白按照50μg/只免疫小鼠,制备抗ASFV p37蛋白多克隆抗体。利用间接ELISA方法测定制备的多克隆抗体效价;通过Western blotting、间接免疫荧光试验检测该多克隆抗体的特异性。【结果】生物信息学分析表明,p37蛋白为稳定亲水性蛋白,无跨膜区和信号肽。二级结构主要含有α-螺旋(45.28%)、延伸链(15.09%)、无规则卷曲(31.54%)。SDS-PAGE、Western blotting结果显示,经IPTG诱导后,成功表达重组蛋白p37,大小62 ku左右,主要以包涵体形式存在,且能与His单克隆抗体发生反应。间接ELISA结果显示,制备的鼠源多克隆抗体效价为1∶256000。Western blotting结果显示,在42 ku左右出现了特异性条带;间接免疫荧光显示出了特异性的红色荧光,表明该多克隆抗体能与重组杆状病毒表达的p37蛋白发生反应,具有较好的特异性。【结论】本试验成功表达并纯化了ASFV p37蛋白,制备了抗ASFV p37蛋白多克隆抗体,重组蛋白具有较好的免疫原性,能产生较强的免疫反应,为后续ASFV p37蛋白结构功能研究、抗体及相关疫苗研发奠定基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒(ASFV) p37蛋白 蛋白表达 多克隆抗体
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P37蛋白在卵巢癌组织中的表达及意义 被引量:1
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作者 杨华 寿成超 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2011年第9期31-32,36,共3页
目的研究卵巢癌组织中P37蛋白的表达,探讨猪鼻支原体感染与卵巢癌发生的关系。方法采用免疫组化法检测109例卵巢癌组织和30例正常卵巢组织中的P37蛋白表达情况。结果卵巢癌组织中P37蛋白阳性表达率为43.1%(47/109),正常卵巢组织的阳性... 目的研究卵巢癌组织中P37蛋白的表达,探讨猪鼻支原体感染与卵巢癌发生的关系。方法采用免疫组化法检测109例卵巢癌组织和30例正常卵巢组织中的P37蛋白表达情况。结果卵巢癌组织中P37蛋白阳性表达率为43.1%(47/109),正常卵巢组织的阳性表达率为0(0/30),两者相比差异具有统计学意义(P<0.001)。结论卵巢癌组织中存在猪鼻支原体的感染,卵巢癌的发生与支原体感染有一定的相关性。 展开更多
关键词 猪鼻支原体 p37 卵巢肿瘤
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重组猪鼻支原体P37蛋白的原核表达及免疫原性分析
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作者 熊祺琰 刘占军 +4 位作者 马庆红 冯志新 刘茂军 白方方 邵国青 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期840-844,共5页
P37是猪鼻支原体(Mhr)的主要免疫原之一,也是Mhr中目前唯一已知的与肿瘤直接相关的抗原。为原核表达Mhr P37蛋白并分析其免疫原性,本研究通过人工合成能够在E.coli中优势表达P37蛋白的编码序列,以pET-28a(+)为载体对P37重组蛋白进行原... P37是猪鼻支原体(Mhr)的主要免疫原之一,也是Mhr中目前唯一已知的与肿瘤直接相关的抗原。为原核表达Mhr P37蛋白并分析其免疫原性,本研究通过人工合成能够在E.coli中优势表达P37蛋白的编码序列,以pET-28a(+)为载体对P37重组蛋白进行原核表达。SDS-PAGE及western blot鉴定结果表明,表达的P37重组蛋白约为45.97 ku并能够被Mhr高免血清识别。利用纯化的重组蛋白为包被抗原初步建立间接ELISA检测方法,检测结果显示与Mhr高免血清呈强阳性反应。此外,将P37重组蛋白免疫小鼠,能够诱导高滴度特异性抗体,表明该蛋白具有良好的免疫原性。本研究结果为Mhr检测方法的建立、P37蛋白功能研究以及P37相关重组肿瘤疫苗和Mhr疫苗的研制奠定基础。 展开更多
关键词 猪鼻支原体 p37蛋白 原核表达 免疫
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抗P37多克隆抗体的制备 纯化与鉴定
4
作者 杨华 吴健 寿成超 《长治医学院学报》 2011年第2期99-101,共3页
目的:用P37融合蛋白免疫动物制备抗血清,为猪鼻支原体感染作用的分子机制提供依据。方法:诱导表达GST-P37蛋白并以其免疫兔制备免疫血清,ELISA法检测抗血清的效价;Western blot-ting检测抗血清特异性。结果:免疫家兔并纯化抗血清得到特... 目的:用P37融合蛋白免疫动物制备抗血清,为猪鼻支原体感染作用的分子机制提供依据。方法:诱导表达GST-P37蛋白并以其免疫兔制备免疫血清,ELISA法检测抗血清的效价;Western blot-ting检测抗血清特异性。结果:免疫家兔并纯化抗血清得到特异的抗P37抗体,该抗体能检测到P37蛋白的表达。结论:成功制备了抗P37的多克隆抗体,对进一步研究P37的功能提供了一个有用的工具。 展开更多
关键词 p37蛋白 抗血清 多克隆抗体
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猪鼻支原体P37蛋白相互作用蛋白的筛选与鉴定 被引量:3
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作者 孙玉宁 靳更林 +2 位作者 张建芝 吴健 寿成超 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第10期902-906,共5页
既往工作表明 ,胃癌组织中有较高的猪鼻支原体感染率 ,猪鼻支原体的主要膜蛋白P37能够诱导外周血单核细胞释放肿瘤坏死因子 (TNF) .为了深入研究P37的作用机制 ,利用酵母双杂交系统筛选与P37蛋白相互作用的蛋白质分子 .首先 ,将编码P37... 既往工作表明 ,胃癌组织中有较高的猪鼻支原体感染率 ,猪鼻支原体的主要膜蛋白P37能够诱导外周血单核细胞释放肿瘤坏死因子 (TNF) .为了深入研究P37的作用机制 ,利用酵母双杂交系统筛选与P37蛋白相互作用的蛋白质分子 .首先 ,将编码P37全长的cDNA克隆到 pGBKT7载体中 ,构建“诱饵”表达载体 pGBKT7 p37,以此筛选人胎盘组织cDNA表达文库 .在 2 6× 10 6个克隆中 ,筛选到一株能与P37相互作用的阳性克隆 ,序列测定表明 ,该阳性克隆编码人视网膜色素上皮细胞蛋白 (Norpeg蛋白 ) .在此基础上经GST PullDown实验 ,进一步证实Norpeg蛋白确能与P37相互作用 ,为进一步研究P37对细胞的作用机制奠定了基础 . 展开更多
关键词 猪鼻支原体 酵母双杂交 p37 Norpeg
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里氏木霉RL-P37尿嘧啶营养缺陷型菌株的构建 被引量:3
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作者 陈永 林良才 +1 位作者 肖冬光 田朝光 《中国酿造》 CAS 2014年第12期58-62,共5页
里氏木霉(Trichoderma reesei)RL-P37作为纤维素酶高产菌,被广泛地应用在工业蛋白的生产过程。从基因水平对工业菌株进行分子改造已经成为提升工业菌株生产性状的重要手段。因此,亟需构建适用于基因敲除以及外源蛋白表达的营养缺陷型菌... 里氏木霉(Trichoderma reesei)RL-P37作为纤维素酶高产菌,被广泛地应用在工业蛋白的生产过程。从基因水平对工业菌株进行分子改造已经成为提升工业菌株生产性状的重要手段。因此,亟需构建适用于基因敲除以及外源蛋白表达的营养缺陷型菌株,特别是可用于基因无痕敲除的尿嘧啶营养缺陷型菌株。本研究以潮霉素为标记,成功构建了里氏木霉RL-P37尿嘧啶营养缺陷型菌株,并得到Southern验证。该菌株在含有1.5 mg/m L 5-氟乳清酸、2 mg/m L尿苷的MM培养基中可以正常生长,并且在不含有尿苷的MM培养基上不能生长。此外,利用粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)的pyr4基因对该突变体进行了回补。里氏木霉RL-P37尿嘧啶营养缺陷型菌株的构建为该菌纤维素酶表达和分泌的机理研究以及后续产酶性能分子改造奠定了物质基础。 展开更多
关键词 里氏木霉 RL-p37 同源重组 pyr4 5-氟乳清酸
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猪鼻支原体膜蛋白p37酶切修饰的质谱分析 被引量:1
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作者 刘文斌 孟麟 +1 位作者 姜北海 寿成超 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期328-332,共5页
p37是猪鼻支原体的膜脂蛋白,有潜在的致癌活性.在对真核表达的p37蛋白分析时发现,p37表现为不同大小的分子片段,提示其存在蛋白质修饰.为了对p37的确切修饰进行分析,进而为其功能研究奠定基础,在构建不同融合蛋白表达质粒并证明其存在... p37是猪鼻支原体的膜脂蛋白,有潜在的致癌活性.在对真核表达的p37蛋白分析时发现,p37表现为不同大小的分子片段,提示其存在蛋白质修饰.为了对p37的确切修饰进行分析,进而为其功能研究奠定基础,在构建不同融合蛋白表达质粒并证明其存在修饰蛋白的基础上,通过飞行质谱及N端氨基酸序列测定,分析了p37蛋白的精确分子量和酶切修饰的大致部位,发现3种形式的p37蛋白的精确分子量分别为47 644、46 105和43 984.p37蛋白在其N端被信号肽酶切去1个21肽,在其C端被蛋白酶切去1个18~26小肽后,成为分子量为43 984的成熟p37蛋白.对p37不同酶切修饰片段的分析将有助于对p37蛋白生物学功能及意义的研究. 展开更多
关键词 猪鼻支原体 p37 信号肽 质谱
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P37腺病毒表达载体的构建及对乳癌细胞的促迁移作用 被引量:1
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作者 龚曼曼 孟麟 寿成超 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1147-1151,共5页
胃癌组织中存在着较高的猪鼻支原体感染率,而P37是猪鼻支原体的主要免疫原.以往研究表明,P37能抑制肿瘤细胞的黏附,促进肿瘤细胞浸润和转移.为了更好地研究P37在肿瘤发生和转移中的功能,通过基因克隆的方法,利用Ad-easy体系,在细菌BJ518... 胃癌组织中存在着较高的猪鼻支原体感染率,而P37是猪鼻支原体的主要免疫原.以往研究表明,P37能抑制肿瘤细胞的黏附,促进肿瘤细胞浸润和转移.为了更好地研究P37在肿瘤发生和转移中的功能,通过基因克隆的方法,利用Ad-easy体系,在细菌BJ5183中同源重组后,转染293细胞,成功包装出重组P37腺病毒.它能有效感染乳腺癌细胞BICR.通过RT-PCR和蛋白质印迹检测表明,感染重组P37腺病毒后的BICR细胞能大量表达并分泌P37蛋白.运用该腺病毒体系进行细胞迁移实验表明,P37能显著增强BICR细胞的体外迁移能力. 展开更多
关键词 腺病毒 支原体 p37 肿瘤 迁移
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P37、P16、PAX-2在子宫内膜增生症中的表达及其意义 被引量:4
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作者 焦艳 《中国医药导报》 CAS 2019年第5期84-87,F0004,共5页
目的分析P37、P16、PAX-2在子宫内膜增生症中的表达及其意义。方法收集2012年12月~2017年8月河北省秦皇岛市妇幼保健院接受病理活检,并经病理组织学活检确诊为子宫内膜增生患者的病理组织标本,其中单纯型及复杂型子宫内膜增生标本31个... 目的分析P37、P16、PAX-2在子宫内膜增生症中的表达及其意义。方法收集2012年12月~2017年8月河北省秦皇岛市妇幼保健院接受病理活检,并经病理组织学活检确诊为子宫内膜增生患者的病理组织标本,其中单纯型及复杂型子宫内膜增生标本31个、不典型子宫内膜增生组织标本30个;另选取30个正常子宫内膜组织标本作为对照。采用免疫组化SP法检测不同组织标本中P37、P16及PAX-2蛋白阳性表达率。结果正常子宫内膜组织中未见P37蛋白阳性表达,不典型增生症组织中阳性表达率高于单纯型或复杂型增生症,差异有统计学意义(P <0.05);不典型增生组织中P16蛋白阳性表达<单纯型或复杂型增生<正常子宫内膜组织,差异有高度统计学意义(P <0.01);不典型增生组织中PAX-2蛋白阳性表达<单纯型或复杂型增生<正常子宫内膜组织,差异有高度统计学意义(P <0.01)。结论 P37、P16、PAX-2在不典型子宫内膜增生中均有一定异常表达,值得进一步深入探究。 展开更多
关键词 p37 P16蛋白 PAX-2 子宫内膜增生症
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术中胫后神经体感诱发电位检测:基于神经信噪比分析、最佳P37、标准P37和P31电位的建议
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作者 MacDonald D.B. Al Zayed Z. +1 位作者 Stigsby B. 李一明 《世界核心医学期刊文摘(神经病学分册)》 2005年第11期21-22,共2页
Objective: To compare the intraoperative signal-to-noise ratio (SNR), reproducibility and rapidity of popliteal fossa (PF), optimized P37, standard P37 and P31 potentials. Methods: Raw sweeps and 11 averages doubling ... Objective: To compare the intraoperative signal-to-noise ratio (SNR), reproducibility and rapidity of popliteal fossa (PF), optimized P37, standard P37 and P31 potentials. Methods: Raw sweeps and 11 averages doubling sweep number from 2 to 2048 were compared in 37 patients undergoing scoliosis surgery. Optimized (highest amplitude or SNR) P37 derivations were Cz-CPc (22), CPz-CPc (27), Pz-CPc (7), iCPi-CPc (8), CPi-CPc (1), Cz-Pz (2)orPz-FPz (3), and in two patients with non-decussation, Cz-CPi (1) or CPz-CPi (3). Standard P37 and P31 derivations were CPz-FPz and FPz-C5S. Signal amplitude was measured in 2048 sweep averages; peak noise was measured in raw sweeps and ±averages; SNR was amplitude/noise. Visual superimposability and < 20-30%amplitude variation determined reproducibility. Sweeps to reproducibility determined rapidity. Results: The SNR order was PFoptimized P37 > standard P37 > P31. Mean optimized P37 SNR advantages over the standard P37 and P31 were 2.1:1 and 4.9:1. SNR had powerful non-linear correlations to reproducibility and rapidity. Median sweeps to reproducibility were PF: 2, optimized P37: 128, standard P37: 512 and P31: 1024. EEG noise was greatest in FPz derivations. Burst-suppression increased scalp potential SNR and rapidity. Conclusions: Optimized P37 and PF recordings are most rapidly reproducible due to superior SNRs and are recommended. FPz should be avoided. Burst-suppression may be desirable. Significance: CPz-FPz and FPz-C5S should no longer be standard. 展开更多
关键词 胫后神经 体感诱发电位 P31 p37 信噪比 脊柱侧凸 可重复性 爆发抑制 重复扫描 非线性相关
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猪鼻支原体蛋白P37诱导人外周血单核细胞释放肿瘤坏死因子 被引量:4
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作者 宁金鹰 黄甦 +2 位作者 吴健 孟麟 寿成超 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第4期353-357,共5页
胃癌组织中存在较高的猪鼻支原体感染率,提示猪鼻支原体感染同胃癌的发生可能存在某种相关性.由于肿瘤坏死因子(TNF-α)在微生物感染导致肿瘤发生中起重要作用,而P37蛋白是猪鼻支原体的主要免疫原,因此,探讨P37能否诱导TNF-α的表达与释... 胃癌组织中存在较高的猪鼻支原体感染率,提示猪鼻支原体感染同胃癌的发生可能存在某种相关性.由于肿瘤坏死因子(TNF-α)在微生物感染导致肿瘤发生中起重要作用,而P37蛋白是猪鼻支原体的主要免疫原,因此,探讨P37能否诱导TNF-α的表达与释放,对阐明猪鼻支原体在胃癌发生中的可能分子机制有重要意义,运用PCR技术克隆了p37基因,在对其编码序列中7个色氨酸密码子TGA进行TGG定点突变后,利用PGEX-4T-1表达载体在大肠杆菌中成功表达了P37蛋白,并经Western blot得到证实,在此基础上,利用RT-PCR及TNF-α敏感细胞株L929的细胞毒性实验,发现P37确能诱导外周血单核细胞表达和释放TNF-α,抗P37单克隆抗体PD4对该诱导活性有明显的中和作用,结果提示,猪鼻支原体通过P37诱导TNF-α产生在猪鼻支原体感染所致相关疾病中可能起重要作用,值得进一步研究. 展开更多
关键词 猪鼻支原体蛋白p37 人外周血单核细胞 肿瘤坏死因子 猪鼻支原体感染 TNF-Α 胃癌 PD4 组织化学检测
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应用噬菌体肽库技术获得与猪鼻支原体蛋白P37结合的多肽序列
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作者 杨华 冯勤 +1 位作者 徐慧玉 寿成超 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1165-1169,1188,共6页
本研究以猪鼻支原体P37蛋白作为筛选分子,对噬菌体展示随机肽库进行亲和淘选。利用ELISA法鉴定亲和力高的阳性噬菌体克隆,对其进行DNA测序和分析,据此推导随机多肽的氨基酸序列,然后构建、表达GST-多肽重组蛋白,经GST-pull down进一步... 本研究以猪鼻支原体P37蛋白作为筛选分子,对噬菌体展示随机肽库进行亲和淘选。利用ELISA法鉴定亲和力高的阳性噬菌体克隆,对其进行DNA测序和分析,据此推导随机多肽的氨基酸序列,然后构建、表达GST-多肽重组蛋白,经GST-pull down进一步鉴定该多肽与P37的结合力。经过4轮筛选和单克隆检测,获得18个有较强特异反应的阳性克隆,18个克隆包括了5种不同的小肽序列,它们分别为ACAPKPPWLC(12/18)、RPLSIDP-WSPHL(3/18)、RPLSNDPWSPHL(1/18)、QNMMSPIEGVRI(1/18)和WAPEKDYMQLMK(1/18)。用ACAPK-PPWLC、RPLSIDPWSPHL与GST重组的融合蛋白进行GST-pull down实验表明,RPLSIDPWSPHL多肽能与P37相互作用。本研究为进一步筛选与P37相互作用的蛋白提供了实验依据和结构基础。 展开更多
关键词 噬菌体随机肽库 p37 多肽序列
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Sun Chemical提升P37喷墨打印机性能
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《记录媒体技术》 2007年第3期53-53,共1页
用于光盘印刷的Project 37(P37)UV喷墨打印机是Sun Chemical与Copytrax Technologies公司密切合作的产品。P37采用特殊的UV固化油墨,能够在三秒钟内完成对光盘的印刷。现在,通过改进的软件和硬件设计,P37的打印质量和机器性能得到进一... 用于光盘印刷的Project 37(P37)UV喷墨打印机是Sun Chemical与Copytrax Technologies公司密切合作的产品。P37采用特殊的UV固化油墨,能够在三秒钟内完成对光盘的印刷。现在,通过改进的软件和硬件设计,P37的打印质量和机器性能得到进一步提升。 展开更多
关键词 喷墨打印机 p37 SUN CHEMICAL 打印质量 PROCESSOR 电子文件格式 压型 在三
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Protein P37 of mycoplasma hyorhinis induces secretion of TNF-αfrom human peripheral blood mononuclear cells 被引量:3
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作者 NING Jinying, HUANG Su, WU Jian, MENG Lin & SHOU Chengchao Department of Biochemistry and Molecular Biochemistry, School ofOncology, Peking University and Beijing Institute for Cancer Research, Beijing 100034, China 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2003年第7期658-662,共5页
High mycoplasmal infection ratio in gastric cancer tissues suggests a possible association between my-coplasma infection and tumorigenesis. Because TNF-a plays an important role in carcinogenesis caused by microbes in... High mycoplasmal infection ratio in gastric cancer tissues suggests a possible association between my-coplasma infection and tumorigenesis. Because TNF-a plays an important role in carcinogenesis caused by microbes in-fection and P37 is a major immunogen of mycoplasma hy-orhinis (M. hyor.), investigating whether P37 could induceexpression and secretion of TNF-a will be very significant to elucidate the possible molecular mechanism of gastric car-cinogenesis involved with M. hyor. At the present study, we cloned full gene of p37 by PCR and mutated the 7 codes of TGA into TGG firstly, then expressed the P37 protein suc-cessfully with pGEX-4T-1 vector in E. coli, which was veri-fied with Western blot. By RT-PCR and sensitive L929 cell toxic assay, we found that P37 protein could induce expres-sion and secretion of TNF-a from human peripheral bloodmononuclear cells, and the inducing activity of P37 could be dramatically blocked by McAb PD4. These results suggestthat the induction of TNF-a secretion by P37 probably plays an important role in diseases caused by M. hyor. infectionand needs to be further investigated. 展开更多
关键词 胃癌 人外周血单核细胞 支原体 蛋白质 TNF-Α 发病机制
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猪鼻支原体TaqMan MGB探针荧光定量PCR方法的建立 被引量:5
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作者 白方方 武昱孜 +5 位作者 刘茂军 冯志新 熊祺琰 韦艳娜 马庆红 邵国青 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期833-836,共4页
为建立快速检测猪鼻支原体(M.hyorhinis)的荧光定量PCR方法,本研究根据GenBank中登录的p37基因序列设计并合成引物及MGB探针,构建含有p37基因的重组质粒,以其为标准品绘制标准曲线,并检测该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示该方... 为建立快速检测猪鼻支原体(M.hyorhinis)的荧光定量PCR方法,本研究根据GenBank中登录的p37基因序列设计并合成引物及MGB探针,构建含有p37基因的重组质粒,以其为标准品绘制标准曲线,并检测该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示该方法具有良好的特异性,与猪肺炎支原体、猪絮状支原体、猪滑液支原体、鸡毒支原体、副猪嗜血杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、猪圆环病毒、猪瘟病毒及猪流感病毒无交叉反应,对M.hyorhinis的检测敏感性为10拷贝/μL,并且稳定性好,变异系数小于2%。利用建立的荧光定量PCR方法对55份临床样品进行检测,阳性检出率为87.3%(48/55),而分离培养方法和普通PCR的阳性检出率分别为41.8%(23/55)和29.1%(16/55)。该结果表明,建立的方法特异性强、敏感性高、稳定性好,可以用于M.hyorhinis临床样品的检测,对M.hyorhinis的快速和定量检测具有重要意义。 展开更多
关键词 猪鼻支原体 p37基因 荧光定量PCR
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超浅层大位移水平井钻完井技术 被引量:14
16
作者 邓红琳 王锦昌 《特种油气藏》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期142-144,158,共3页
为提高渭北油田低孔、低渗、低压油藏的单井储量动用程度,增加油井产能,在渭北油田部署了超浅层大位垂比水平井——WB2P37井。在分析施工难点的基础上,对井身结构、井眼轨道设计、井眼轨迹控制、倒装钻具组合、钻井液技术,下尾管固井等... 为提高渭北油田低孔、低渗、低压油藏的单井储量动用程度,增加油井产能,在渭北油田部署了超浅层大位垂比水平井——WB2P37井。在分析施工难点的基础上,对井身结构、井眼轨道设计、井眼轨迹控制、倒装钻具组合、钻井液技术,下尾管固井等关键技术进行了研究,保障了该井钻完井施工的顺利进行。该井完钻井深为1 656 m,完钻垂深为392.97 m,水平位移为1 384.44 m,位垂比为3.52,油层套管一次下入到井底,固井质量良好。该井试验表明:在渭北油田超浅储层,垂深大于390 m、水平段长为1 000 m的大位移水平井进行下尾管固井完井的方案是可行的。该技术对国内其他同类油田的开发具有借鉴意义。 展开更多
关键词 超浅层 大位移水平井 钻井 完井 尾管 渭北油田 WB2p37
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猪鼻支原体间接血凝及ELISA检测方法的初步建立 被引量:5
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作者 王涛 赵满丽 孙卫东 《中国畜禽种业》 2012年第11期31-33,共3页
本试验旨在建立猪鼻支原体间接血凝及ELISA检测方法,为猪鼻支原体的血清学诊断、流行病学调查及防控提供技术基础。利用Mhy全菌及P37蛋白为抗原,通过间接血凝及ELISA方法检测抗体,初步建立猪鼻支原体血清学检测方法。结果表明:利用Mhy... 本试验旨在建立猪鼻支原体间接血凝及ELISA检测方法,为猪鼻支原体的血清学诊断、流行病学调查及防控提供技术基础。利用Mhy全菌及P37蛋白为抗原,通过间接血凝及ELISA方法检测抗体,初步建立猪鼻支原体血清学检测方法。结果表明:利用Mhy全菌抗原建立的间接血凝法检测猪鼻支原体阳性血清具有较高的抗体效价,但与猪肺炎支原体阳性血清存在严重的交叉反应;这些结果提示Mhy全菌间接血凝及全菌包被ELISA方法检测Mhp血清与Mhp存在严重交叉反应,而P37包被ELISA不存在交叉反应。 展开更多
关键词 猪鼻支原体 间接血凝 p37 ELISA 检测方法 试验
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红河油田水平井置胶成坝技术 被引量:1
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作者 魏开鹏 杨欢 +2 位作者 斯容 方群 刘学全 《石油钻探技术》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期81-86,共6页
针对红河油田长8油藏储层致密、裂缝发育导致水平井注水井组水窜严重的问题,进行了水平井置胶成坝技术研究及现场试验。在模拟长8油藏的条件下,以堵剂成胶后的黏度为指标,优化了聚合物冻胶堵水剂的配方,评价了其抗老化性、耐盐性、抗剪... 针对红河油田长8油藏储层致密、裂缝发育导致水平井注水井组水窜严重的问题,进行了水平井置胶成坝技术研究及现场试验。在模拟长8油藏的条件下,以堵剂成胶后的黏度为指标,优化了聚合物冻胶堵水剂的配方,评价了其抗老化性、耐盐性、抗剪切性、封堵性和抗冲刷性。结果表明,聚合物冻胶堵水剂的成胶时间4~10d可调,耐盐能力达1×105 mg/L,耐Ca2+能力达8 000mg/L,抗剪切及抗冲刷性能较好,封堵率大于95%。2井次的现场试验结果表明,红河油田水平井注水井组应用水平井置胶成坝技术后,受效井产油量升高,含水率降低,累计增油102t,含水率由99.0%降至92.3%,有效期超过了217d。研究与试验表明,采用水平井置胶成坝技术能满足封堵深部注水优势通道的要求,可以解决红河油田水平井注水井组水窜的问题。 展开更多
关键词 水平井 裂缝性油气藏 置胶成坝 堵水剂 红河油田 HH37P13井
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镇泾油田HH37P1水平井钻完井技术 被引量:5
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作者 闫吉曾 罗懿 《探矿工程(岩土钻掘工程)》 2012年第6期31-34,共4页
为评价水平井开发镇泾油田长8油藏的经济技术可行性,部署了HH37P1水平井。分析了该井的施工难点,提出了相应的技术对策。现场施工中通过优化钻具组合、控制井眼轨迹、调节钻井液性能及配合相应的工程工艺技术,使HH37P1水平井顺利完钻。... 为评价水平井开发镇泾油田长8油藏的经济技术可行性,部署了HH37P1水平井。分析了该井的施工难点,提出了相应的技术对策。现场施工中通过优化钻具组合、控制井眼轨迹、调节钻井液性能及配合相应的工程工艺技术,使HH37P1水平井顺利完钻。通过测井资料结合录井显示,采用预置管柱完井方式配合后期压裂改造,初见成效。HH37P1井的成功实施为有效开发镇泾油田提供了新的途径。 展开更多
关键词 水平井 钻井 完井 井眼轨迹 HH37P1井 镇泾油田
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猪鼻支原体的分子鉴定及进化分析
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作者 鲍呈祥 简莹娜 +4 位作者 文英先 李秀萍 霍全胜 张学勇 马利青 《青海畜牧兽医杂志》 2018年第4期1-6,共6页
本研究对青藏高原地区青海猪鼻支原体分离株(Mhr-QH1)进行了Mhr-p37基因的克隆鉴定及测序分析,并利用Mhr-16S rRNA基因与Gen Bank中相关菌株基因进行了基因同源性比较和遗传进化分析。Mhr-p37基因和16S基因PCR扩增测序结果显示,获得核... 本研究对青藏高原地区青海猪鼻支原体分离株(Mhr-QH1)进行了Mhr-p37基因的克隆鉴定及测序分析,并利用Mhr-16S rRNA基因与Gen Bank中相关菌株基因进行了基因同源性比较和遗传进化分析。Mhr-p37基因和16S基因PCR扩增测序结果显示,获得核苷酸序列长度分别为346bp和1500bp,Mhr-QH1-p37基因核苷酸序列与中国株、法国株和美国株的同源性达到100%;同样16S rRNA基因与巴西分离株的16S rRNA基因同源性也为100%,与日本、瑞典和美国分离株的同源性为99%。进化树分析发现:Mhr-QH1分离株与巴西株聚为组成一个微小分支,与美国株和巴西株共聚为同一个大支上,并与其他Mycoplasma spp.种系进化距离较远。因此,本研究对青海猪鼻支原体菌株的Mhr-p37基因序列和蛋白氨基酸序列分析,及16S rRNA基因系统进化研究的结果,有望为我国猪鼻支原体病的分子流行病学调查提供一定的数据参考,同时提示猪场搞好饲养管理是预防本病的关键。 展开更多
关键词 猪鼻支原体 青海分离株 分子鉴定 p37基因 16S RRNA基因 进化分析
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