热痹康汤对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜P38/NF-κB信号通路的影响

目的:观察清热解毒抗风湿方药——热痹康汤对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜P38/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:将60只SPF级雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组,模型对照组,热痹康汤低、中、高剂量组,甲氨蝶呤组,每组10只。除空白对照组外,其余各组大鼠采用弗氏不完全佐剂乳化的牛Ⅱ型胶原蛋白诱导CIA大鼠模型。造模成功后开始给药,模型对照组予生理盐水灌胃,热痹康汤低、中、高剂量组分别给予热痹康汤提取物低、中、高剂量灌胃,甲氨蝶呤组给予甲氨蝶呤腹腔注射,空白对照组大鼠自由饮水和进食。观察不同剂量热痹康汤对CIA大鼠滑膜P38/NF-κB信号通路的影响。结果:热痹康汤能下调CIA大鼠滑膜P38/NF-κB信号通路相关分子P38 MAPK、NF-κB/P65、IκBα的表达。结论:热痹康汤治疗类风湿关节炎的作用与抑制滑膜P38/NF-κB信号通路有关。

基于p38/NF-κB信号通路探讨海桐皮治疗特应性皮炎机制

目的:研究海桐皮水煎液对特应性皮炎模型小鼠的抗炎作用,并从丝裂原蛋白激酶(p38)/核因子κB(NF-κB)信号通路研究其作用机制。方法:将60只BALB/c雄性小鼠随机分为空白组、模型组、对照组及海桐皮低、中、高浓度组,每组10只。后五组以7%的2,4-二硝基氯苯(DNCB)丙酮溶液100μL涂于小鼠腹部进行致敏诱导。5 d后在小鼠右耳内侧外涂1%的DNCB丙酮溶液10μL激发,每隔3 d激发1次,共激发5次。第一次激发后12 h海桐皮各组开始外洗给药,每次给药5 mL,每日2次,连续给药15 d。对照组予等体积0.025%地塞米松磷酸钠注射液,空白组和模型组予等体积纯净水。检测小鼠耳厚度差、皮损评分及耳肿胀度。治疗结束后,取血清和右耳组织,观察耳组织病理学变化,检测血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,检测NF-κB、p38、磷酸化丝裂原蛋白激酶(p-p38)蛋白表达情况。结果:与模型组比较,各治疗组小鼠耳厚度差、皮损评分及耳肿胀度均降低(P<0.01或P<0.05)。与模型组比较,海桐皮各组小鼠皮肤角化过度、水肿和炎症细胞浸润程度改善;海桐皮中浓度组和高浓度组血清IgE水平降低(P<0.05),低浓度组和高浓度组血清IL-4水平降低(P<0.05),中浓度组和高浓度组血清IL-6水平降低(P<0.01),低浓度组、中浓度组和高浓度组血清TNF-α水平均显著降低(P<0.01)。与空白组比较,模型组NF-κB阳性表达升高(P<0.01);与模型组比较,海桐皮中浓度组和高浓度组NF-κB阳性表达降低(P<0.05或P<0.01)。与空白组比较,模型组p38蛋白表达降低(P<0.01)、p-p38蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,海桐皮低浓度组p38表达升高(P<0.01),海桐皮各组p-p38蛋白表达均降低(P<0.05或P<0.01)。结论:海桐皮可明显改善特应性皮炎模型小鼠耳病变程度,减少血清IgE、IL-4、IL-6、TNF-α分泌,其机制可能与降低p38蛋白磷酸化和NF-κB蛋白活化有关。

基于p38 MAPK/NF-κB信号通路探讨藏红花素对糖尿病心肌病大鼠的影响

目的基于p38丝裂原活化蛋白激酶/核因子-κB(p38 MAPK/NF-κB)信号通路探讨藏红花素对糖尿病心肌病(DCM)大鼠的影响。方法取45只Wistar大鼠,随机选择8只作为正常组,其余大鼠采用高糖高脂饮食12周并负荷一次性30 mg/kg链脲佐菌素的方法构建DCM模型。将32只造模成功的大鼠随机分为模型组、藏红花素组、藏红花素+p38 MAPK抑制剂组和藏红花素+p38 MAPK激动剂组,每组8只。藏红花素组给予50 mg/kg藏红花素腹腔注射,藏红花素+p38 MAPK抑制剂组给予50 mg/kg藏红花素和5 mg/kg SB203580腹腔注射,藏红花素+p38 MAPK激动剂组给予50 mg/kg藏红花素和2 mg/kg ANS腹腔注射,正常组和模型组给予等体积生理盐水腹腔注射,均1次/d。连续注射12周后,心脏超声检测大鼠心功能指标[左心室收缩末期压(LVESD)、左心室舒张末期压(LVEDD)、左心室短轴缩短率(LVFS)],ELISA法检测血清心肌酶[谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)]和炎症因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平,苏木精-伊红、马森染色观察心肌组织病变和纤维化情况,RT-PCR法、免疫组织化学法检测心肌组织中p38 MAPK、NF-κB p65、转化生长因子-β1(TGF-β1)、I型胶原蛋白(Col-I)mRNA和蛋白表达情况。结果与模型组比较,藏红花素组、藏红花素+p38 MAPK抑制剂组大鼠LVESD、LVEDD及血清AST、LDH、CK-MB、IL-1β、IL-18、TNF-α水平均明显降低(P均<0.05),LVFS明显升高(P<0.05);心肌组织病变和纤维化情况均明显改善,心肌组织损伤评分和胶原容积分数均明显降低(P均<0.05);心肌组织中p38 MAPK、NF-κB p65、TGF-β1、Col-I mRNA相对表达量和蛋白表达积分吸光度均明显降低(P均<0.05)。与藏红花素组比较,SB203580可显著增强藏红花素对DCM大鼠心功能指标、心肌酶和炎症因子水平、心肌组织病变和纤维化情况、p38 MAPK/NF-κB信号通路相关因子mRNA和蛋白表达的调控作用,ANS则明显逆转藏红花素对DCM大鼠的上述作用。结论藏红花素可能通过抑制p38 MAPK/NF-κB信号通路减轻炎症反应和组织纤维化,从而对DCM大鼠起到保护作用。

游泳运动对慢性非细菌性前列腺炎大鼠p38MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨游泳运动对慢性非细菌性前列腺炎(CAP)大鼠p38MAPK/NF-κB信号通路的影响。方法:雄性SD大鼠分为运动组、CAP模型组、正常组,每组10只,注射消痔灵制备大鼠模型,运动组每天游泳运动1次,时间为50min,6d/周,共游泳运动4周,模型组和正常组不开展游泳运动;末次游泳运动结束后2h,股动脉取血处死大鼠,采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测大鼠血清p38MAPK、NF-κB p65、IL-1β、IL-4、TNF-α含量,观察三个组别大鼠前列腺组织病理学改变。结果:4周游泳运动结束后,模型组和运动组大鼠血清内p38MAPK、NF-κB p65、IL-1β、IL-4、TNF-α含量显著高于正常组(P<0.05),运动组大鼠血清内上述观察指标显著低于模型组(P<0.05);相关分析显示,CAP大鼠血清内IL-1β、IL-4、TNF-α水平与p38MAPK、NF-κB p65表达呈显著正相关(P<0.01),p38MAPK与NF-κB p65呈显著正相关(P<0.01);病理观察显示,与正常组比较,模型组大鼠前列腺组织慢性炎症病变明显,与模型组比较,运动组大鼠前列腺血管扩张程度、炎细胞浸润数量及范围、管腔狭窄及间质水肿纤维化的情况均有所减轻。结论:游泳运动能够抑制CAP大鼠血清内p38MAPK、NF-κB p65表达,下调IL-1β、IL-4、TNF-α水平,对大鼠CAP炎症发挥缓解作用。

超分子水杨酸对兔耳痤疮模型p38MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的:探究超分子水杨酸对兔耳痤疮模型p38MAPK/NF-κB信号通路的影响机制。方法:将30只实验兔随机分成正常对照组、2%超分子水杨酸(Salicylic acid,SA)组、30%SA组、夫西地酸组、模型对照组,每组6只,并予以相应外用药物干预,连续4周,并分别于用药2周后、用药4周后检测p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8蛋白的表达。结果:结果显示,随着用药时间的延长,各组的p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8均呈下降趋势。用药前,各组间p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8蛋白表达均差异无统计学意义(P>0.05)。用药2周后,2%SA组、30%SA组、夫西地酸组p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8低于模型对照组(P<0.001);三个用药组之间p38MAPK、NF-κB、IL-1β两两比较差异无统计学意义(P>0.05);2%SA组IL-8低于30%SA组、夫西地酸组(均P<0.05);30%SA组与夫西地酸组IL-8差异无统计学意义(P>0.05)。用药4周后,三个用药组p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8低于模型对照组(P<0.05);2%SA组、30%SA组p38MAPK、NF-κB、IL-8低于夫西地酸组(P<0.05),2%SA组IL-8低于30%SA组(P<0.05);2%SA组与30%SA组p38MAPK差异无统计学意义(P>0.05);2%SA组、30%SA组与夫西地酸组IL-1β均差异无统计学意义(均P>0.05);2%SA组IL-1β低于30%SA组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:超分子水杨酸可通过抑制p38MAPK/NF-κB信号通路来发挥抗炎作用,且随着用药时间的延长疗效也在逐渐增加,并优于夫西地酸。

TPPU通过抑制p38 MAPK/NF-κB p65信号通路对阿尔茨海默病细胞模型的抗神经炎症作用

目的在Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病(AD)小胶质细胞(BV2细胞)模型中,采用对BV2细胞进行干预,探讨1-三氟甲氧基苯基-3-(1-丙酰哌啶-4-基)脲(TPPU),TPPU是否具有抗神经炎症作用及其可能的抗炎机制。方法利用Aβ25-35作用BV2细胞构建AD细胞模型,CCK8法分别检测不同浓度Aβ25-35和TPPU处理对BV2细胞活性的影响,最终选择20μM Aβ25-35诱导BV2细胞48 h作为造模组,0.1μM TPPU预处理BV2细胞3h,20μM Aβ25-35诱导BV2细胞48 h作为治疗组进行后续实验。利用ELISA法检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,倒置荧光显微镜检测活性氧(ROS)产生,real-time PCR检测小胶质细胞M1表型促炎因子肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-1β(IL-1β)基因mRNA表达水平和检测M2表型抗炎因子IL-10及标志物Arg1基因mRNA表达水平。通过Western blot法检测细胞中炎症因子TNF-α蛋白及p38 MAPK/NF-κB p65信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组BV2细胞活力降低(P<0.05),ROS显著升高(P<0.05),MDA含量显著增多(P<0.05),SOD活性显著下降(P<0.05),TNF mRNA、IL-1βmRNA表达水平明显上调(P<0.05),IL-10 mRNA、Arg1 mRNA表达水平明显下调(P<0.05),TNF-α蛋白及p-p38 MAPK、p-NF-κB p65蛋白表达明显上调(P<0.05)。与模型组相比,经TPPU预处理后,BV2细胞活力明显升高(P<0.05),ROS显著降低(P<0.05),MDA含量显著下降(P<0.05),SOD活性显著提高(P<0.05),TNF mRNA、IL-1βmRNA表达水平明显下调(P<0.05),IL-10 mRNA、Arg1 mRNA表达水平明显上调(P<0.05),TNF-α蛋白及p-p38 MAPK、p-NF-κB p65蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论TPPU抑制Aβ25-35诱导的BV2细胞炎症反应,促进BV2细胞由M1表型向M2表型极化,其机制可能与抑制p38MAPK/NF-κB p65信号通路激活有关。

抗奥合剂通过p38 MAPK/NF-κB信号通路和ACE2/Ang1-7/Mas轴缓解急性肺损伤研究

目的探讨抗奥合剂(KAHJ)治疗小鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制,为其可能作为缓解新型冠状病毒(COVID-19)感染后症状的药物提供依据。方法采用网络药理学方法预测KAHJ治疗ALI的主要活性成分、潜在靶点和相关信号通路。将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、LPS组和LPS+KAHJ组。LPS+KAHJ组小鼠灌胃KAHJ(4.76 g·kg^(-1)·d^(-1),8.8 mL·kg^(-1)·d^(-1)),其余组小鼠灌胃生理盐水(8.8 mL·kg^(-1)·d^(-1))。14 d后,腹腔注射LPS(5 mg·kg^(-1))诱导ALI模型。收集小鼠血清和肺组织,通过组织病理学观察肺组织的病理变化。采用Western blot、qPCR、ELISA和IHC等方法评估KAHJ对ALI的改善作用。结果通过网络药理学筛选出疾病和药物共同的70个核心靶基因,并显示与多个信号通路密切相关,如MAPK、NF-κB、Apoptosis、COVID-19和肾素-血管紧张素系统(Ras)信号通路等。此外,通过实验验证发现KAHJ能改善小鼠ALI后的炎症和细胞凋亡,减少肺损伤和肺水肿,抑制肺纤维化。同时,KAHJ的作用机制与p38 MAPK和NF-κB的磷酸化以及ACE2/Ang1-7/Mas轴的调控也有着密切关系。结论KAHJ可能通过抑制p38 MAPK/NF-κB信号通路和调控ACE2/Ang1-7/Mas轴缓解ALI,为缓解COVID-19感染后症状提供了补充和替代药物。

基于p38 MAPK/NF-κB/MLCK信号通路探讨半夏泻心汤修复肠黏膜屏障的作用机制

目的:探寻半夏泻心汤(BXD)在体内抑制肠道炎症反应及修复肠黏膜屏障的作用机制。方法:36只雌性SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、西药组(美沙拉嗪组)以及半夏泻心汤低剂量组(BXD-低剂量组)、中剂量组(BXD-中剂量组)、高剂量组(BXD-高剂量组)。适应性喂养7 d后,除空白组外,其余各组大鼠自由饮用5%DSS 7 d构建溃疡性结肠炎大鼠模型,造模成功后,空白组与模型组灌胃生理盐水,西药组灌胃美沙拉嗪,0.054 g/d),半夏泻心汤低剂量组(2.205 g/kg)、中剂量组(4.41 g/kg)、高剂量组(8.82 g/kg)灌胃给予半夏泻心汤提取物,均给药15 d。采用疾病活动指数评估造模及药物治疗后大鼠的一般变化情况;苏木精-伊红(HE)染色法,确认结肠组织病变损伤程度;ELISA检测血清中炎性因子含量表达变化情况;qRT-PCR法、Western blot法检测p38 MAPK/NF-κB/MLCK/信号通路关键蛋白表达。结果:5%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎模型大鼠出现体质量减轻、腹泻、脓血便及结肠缩短,造模成功。BXD及美沙拉嗪给药后,大鼠的DAI评分出现不同程度的降低。HE结果显示美沙拉嗪及高剂量BXD给药后明显改善了DSS导致的大鼠结肠组织的病理情况。酶联免疫吸附实验结果提示,高剂量BXD及美沙拉嗪给药后可以显著抑制大鼠促炎因子的表达水平,从而达到抑制肠道炎症的治疗效果。Western blot和qPCR结果表明,BXD可通过调控MAPK、MLCK、NF-κB、Occludin的表达量修复肠黏膜屏障。结论:半夏泻心汤可降低肠黏膜通透性以及修复受损的肠黏膜,其机制可能是通过抑制p38 MAPK/NF-κB/MLCK信号通路实现的。

基于p38MAPK/NF-κB信号通路探讨麻黄-苦杏仁药对治疗支气管哮喘大鼠的机制

目的探讨麻黄-苦杏仁药对对支气管哮喘大鼠气道炎症的影响,以及对p38MAPK/NF-κB信号通路的调控作用。方法将48只大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组及麻黄-苦杏仁药对A组(9 g∶6 g)、B组(12 g∶6 g)、C组(9 g∶9 g),每组8只。采用4%卵清蛋白(OVA)致敏复制哮喘大鼠模型,持续造模4周后开始给药,麻黄-苦杏仁药对组(5 g·kg^(-1))、地塞米松组(1 mg·kg^(-1))按相应剂量灌胃给药,正常组及模型组给予等剂量生理盐水,每天1次,持续14 d。检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素4(IL-4)、IL-5、IL-6、IL^(-1)3和γ-干扰素(IFN-γ)水平;采用Diff-Quick染色后对BALF进行炎性细胞分类计数;采用免疫组化法检测肺组织p-p38MAPK、NF-κBp65蛋白表达;Western Blot法检测肺组织p38MAPK、p-p38MAPK及NF-κBp65蛋白表达;qRT-PCR法检测肺组织p38MAPK、p-p38MAPK及NF-κBp65 mRNA表达。结果与正常组比较,模型组大鼠BALF中的细胞总数及各炎性细胞数量均显著升高(P<0.01);BALF中的IL-4、IL-5、IL-6、IL^(-1)3水平显著升高(P<0.01),IFN-γ水平显著降低(P<0.01);p-p38MAPK、NF-κBp65蛋白及mRNA表达显著上调(P<0.01)。与模型组比较,麻黄-苦杏仁药对组大鼠BALF中的细胞总数及各炎性细胞数量均显著降低(P<0.01);BALF中的IL-4、IL-5、IL-6、IL^(-1)3水平显著降低(P<0.01),IFN-γ水平显著升高(P<0.01);p-p38MAPK、NF-κBp65蛋白及mRNA表达显著下调(P<0.01)。结论麻黄-苦杏仁药对可能通过抑制p38MAPK/NF-κB信号通路,减少Th2细胞因子生成,减轻哮喘大鼠气道及周围的炎性反应和高气道反应,从而发挥控制哮喘的作用。

P38MAPK对帕金森病MPTP模型小鼠NF-κB和COX-2调控的研究

目的探讨P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 mitogen-activated protein kinase,P38 MAPK)、核因子NF-κB(nuclear factor kappa B)和环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)之间的关系,从而研究P38MAPK和NF-κB、COX-2在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备的帕金森病(PD)小鼠模型的作用机制,以及人参皂甙Rg1(Ginsenoside Rg1,Rg1)对P38MAPK信号通路的影响和对多巴胺神经元的保护作用。方法将小鼠随机分为MPTP模型组、Rg1干预剂组和对照组。观察行为学,采用免疫组织化学和免疫蛋白印迹法观察小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)、磷酸化P38(p-P38)、NF-κB和COX-2的表达变化;并观察给予人参皂甙Rg1后对上述变化的影响。结果与对照组相比,模型组小鼠出现典型PD症状,TH阳性神经元明显丢失、蛋白水平下降,P38 MAPK信号通路被激活,其磷酸化产物p-P38表达明显增多,NF-κB和COX-2表达也明显增加;经人参皂甙Rg l处理后,上述变化均减轻。结论 P38 MAPK可能通过激活NF-κB、COX-2而诱导帕金森病MPTP模型小鼠黑质多巴胺能神经元(DA)的损伤,P38 MAPK、NF-κB和COX-2在帕金森病的发病过程中可能起重要作用。同时人参皂甙Rg1可能影响P38 MAPK信号通路、NF-κB及COX-2表达而对小鼠多巴胺神经元起到保护作用。

p38、NF-κB、IL-6在长期大强度运动诱导大鼠骨骼肌发生中的作用

目的:研究p38、NF-κB、IL-6在长期大强度运动诱导肌肉发生过程中的作用。方法:18只雄性SD大鼠分为3组,C组(安静组)、E组(2周运动组)、I组(2周运动并施加NF-κB阻断剂PDTC)。检测C、E组大鼠腓肠肌的质量、p38、Phospho-p38、p65、Phospho-p65、IL-6mRNA、MRFsmRNA、MEF2cmRNA,I组检测腓肠肌的质量、IL-6mRNA、MRFsmRNA、MEF2cmRNA。结果:与C组相比,E组大鼠腓肠肌的质量、Phospho-p38、Phospho-p65、MyoDmRNA、MyoGmRNA、Myf-5mRNA、MEF2cmRNA上升,但p38、p65、IL-6mR-NA、MRF4mRNA未变;与E组相比,I组大鼠腓肠肌质量、MyoDmRNA、MyoGmRNA、Myf-5mRNA、MEF2cmRNA降低,但IL-6mRNA、MRF4mRNA未改变。结论:p38/NF-κB/MyoD、MyoG、Myf-5、MEF2c介导了长时间运动诱发的肌肉发生过程,但IL-6可能没有参与其中。

芝麻素通过调节p38和NF-κB激活抑制肥大细胞炎症细胞因子释放

目的观察芝麻素对肥大细胞炎症细胞因子释放的影响并探讨其可能的作用机制。方法体外培养HMC-1细胞,PMA和A23187体外诱导HMC-1细胞激活,ELISA和Western blot方法观察芝麻素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)释放及p38、NF-κB p65活化的影响。结果 PMA和A23187能激活HMC-1细胞,促进p38磷酸化和NF-κB p65核转位,提高TNF-α和IL-6合成和释放(P<0.05)。芝麻素高(100μg/L)、中(50μg/L)质量浓度明显抑制HMC-1细胞TNF-α、IL-6合成和释放,降低p38磷酸化,减少NF-κB p65核转位(P<0.05)。p38和NF-κB抑制剂都能明显抑制TNF-α、IL-6的合成和释放(P<0.05)。结论芝麻素通过调节p38和NF-κB激活抑制肥大细胞炎症细胞因子释放。

川崎病中IgM-AECA通过JNK、p38及NF-κB诱导内皮细胞ICAM-1的表达

目的川崎病(Kawasaki Disease,KD)大部分病人血清中存在抗内皮细胞受体抗体-IgM(IgM An-ti-endothelial cell antibodies,IgM-AECA)。该研究旨在探讨抗内皮细胞受体抗体(AECA)通过何种途径诱导内皮细胞细胞内吸附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达以激活血管内皮细胞。方法检测30名KD患儿血清IgM-AECA浓度,并从17名AECA阳性KD患儿血清中提纯IgM-AECA,用IgM-AECA直接刺激人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cells,HCAEC)后,通过R T-PCR及ELISA方法检测ICAM-1 mR NA及蛋白的表达,同时应用了PD98059,SB203580,dimethylaminopurine(DMAP)和parthenolide,4种蛋白激酶阻断剂观察IgM-AECA通过何种途径激活HCAEC。结果 KD病人血清中的IgM-AECA可使HCAEC的ICAM-1 mRNA及蛋白表达明显增加,SB203580(p38阻断剂)、DMAP(JNK阻断剂)及parthenolide(NF-κB阻断剂)明显抑制ICAM-1的表达(均P<0.01),而PD98059(ERK1/2阻断剂)不能抑制ICAM-1的表达(P>0.05)。结论 KD病人血清中的IgM-AECA通过增强ICAM-1的表达来激活内皮细胞,IgM-AECA通过p38、JNK MAPK及NF-κB通路诱导ICAM-1的表达,IgM-AECA可能在KD冠状动脉病变的发生中发挥重要作用。

p38、NF-кB、IL-6在少肌症发生及其运动性缓解中的作用

目的:研究p38、NF-кB、IL-6在少肌症发生及运动缓解少肌症中的作用。方法:24只雄性SD大鼠分为3组,C组(青年安静组)、S组(40 d D-半乳糖注射致衰组)、E组(40 d D-半乳糖注射+6 w跑台运动组)。检测C、S、E组大鼠腓肠肌的质量、Phospho-p38、p38、Phospho-p65、p65、IL-6 mRNA、MRFs(MyoD、MyoG、Myf-5、MRF4)mRNA。结果:与C组相比,S组腓肠肌/体重、Phospho-p65、IL-6 mRNA降低,Phospho-p38、MyoD mRNA、MyoGmRNA、Myf-5 mRNA上升,与S组相比,E组腓肠肌/体重、Phospho-p38、Phospho-p65、IL-6 mRNA、MyoD mRNA、MyoG mRNA、MRF4 mRNA升高;MyoD mRNA/MyoG mRNA比值为S组低于C组,E组高于S组;C组、S组、E组p38及p65均无显著性差异。结论:NF-кB与IL-6(或以NF-кB/IL-6形式)介导、而p38、MyoD、MyoG、Myf-5(或以p38/MyoD、MyoG、Myf-5形式)拮抗衰老引起肌肉流失(少肌症);p38、NF-кB、IL-6、MyoD、MyoG、MRF4参与了运动对少肌症的缓解,该过程可能以p38、NF-кB、IL-6(或以p38/NF-кB/IL-6形式)/MyoD、MyoG、MRF4通路形式进行;衰老诱导肌肉快-慢转化,运动抑制了该转化趋势;p38、p65表达对运动、衰老不敏感。

姜黄素通过p38MAPK/NF-κB信号通路对膝关节骨性关节炎的作用机制分析

目的分析姜黄素通过p38-丝裂原活化的磷酸激酶(p38MAPK)/核因子κB(NF-κB)信号通路对膝关节骨性关节炎的作用机制。方法采用前瞻性研究,随机抽样法选取2018年1月至2019年12月期间在邯郸市中心医院进行全膝关节置换术的35例膝关节骨性关节炎患者作为研究对象,取截掉的股骨髁和胫骨平台的软骨组织,将其分为模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。并选取同期因外伤在邯郸市中心医院骨关节外科或血管外科行股骨截肢的47例患者作为对照组,取其膝关节健康软骨。模型组与对照组在不含姜黄素的培养基内传代2代细胞,低剂量组、中剂量组和高剂量组的软骨组织细胞分别在含有100、150、200 mg/kg姜黄素的培养基内传代2代细胞。对各组腺苷酸环化酶相关蛋白1(CAP1)、p38MAPK、p65-NF-κB及其磷酸化表达情况进行比较,并对各组白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达情况进行比较。结果与对照组相比,模型组的CAP1、p38MAPK、p65-NF-κB及其磷酸化表达水平均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,低剂量组、中剂量组、高剂量组的CAP1、p38MAPK、p65-NF-κB及其磷酸化表达水平均降低,且随着姜黄素剂量的升高而降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,模型组的IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α表达水平均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,低剂量组、中剂量组、高剂量组的IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α表达水平均显著降低,且随着姜黄素剂量的升高而降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论通过激活p38MAPK/NF-κB信号通路姜黄素可调节膝关节骨性关节炎的炎症反应过程,且呈现明显的剂量反应。

非布司他对高尿酸血症大鼠p38 MAPK/NF-κB通路及脑血管粥样硬化的影响

目的探讨非布司他对高尿酸血症(HUA)大鼠p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核转录因子(NF)-κB通路及脑血管粥样硬化的影响。方法制备HUA大鼠模型,随机分为模型组(M组)、非布司他低(1 mg/kg)剂量组(FX-L组)、非布司他中(2 mg/kg)剂量组(FX-M组)、非布司他高(4 mg/kg)剂量组(FX-H组)、别嘌醇(24 mg/kg)组(Allo组),每组12只,另取12只大鼠设为对照组(NC组),分组处理后,检测血清尿酸水平;苏木素-伊红(HE)染色检测大鼠脑动脉血管病理形态;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中炎性因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平;以试剂盒检测大鼠脑血管组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;蛋白免疫印迹实验检测大鼠脑血管组织p38 MAPK/NF-κB通路相关蛋白表达。结果与NC组相比,M组脑动脉可见血管平滑肌细胞增生、内膜增厚、腔内斑块、变性坏死等病理损伤,脑血管组织SOD水平显著降低(P<0.05),血清尿酸、TNF-α、IL-6水平及脑血管组织MDA水平、p-p38 MAPK/p38 MAPK、核内NF-κB p65表达显著升高(P<0.05);与M组相比,FX-L、FX-M、FX-H组及Allo组脑动脉血管病理损伤均减轻,脑血管组织SOD水平均显著升高(P<0.05),血清尿酸、TNF-α、IL-6水平及脑血管组织MDA水平、p-p38 MAPK/p38 MAPK、核内NF-κB p65表达均显著降低(P<0.05),且FX-L、FX-M、FX-H组之间呈剂量依赖性,差异均有统计学意义(P<0.05);FX-H组与Allo组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论非布司他可抑制p38 MAPK/NF-κB通路激活,抑制氧化应激及炎症反应,进而减轻HUA大鼠脑血管损伤,缓解其粥样硬化。

积雪草苷通过抑制NF-κB/p38通路减轻小鼠低氧性肺动脉高压

目的:观察积雪草苷对小鼠低氧性肺动脉高压的影响,并测定小鼠肺组织p38和NF-κB的变化,研究积雪草苷是否通过抑制NF-κB/p38信号通路防治低氧性肺动脉高压。方法:将30只BALB/c小鼠随机分为常氧(normoxia,N)组、低氧(hypoxia,H)组和低氧+积雪草苷组。低氧造模结束后检测右心室收缩压(RVSP)、平均颈动脉压(mCAP)、右心室/(左心室+室间隔)[RV/(LV+S)]、右心室/体重(RV/BW)、血管壁面积/血管总面积(WA/TA)和血管壁直径/血管壁总直径(WT/TT);测量肺组织中p38、p-p38、NF-κB和p-NF-κB的相对表达量以及p-p38和p-NF-κB的荧光强度,同时检测血清中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度。结果:与N组相比,H组的RVSP、RV/(LV+S)、RV/BW、WA/TA和WT/TT显著升高( P <0.05),而低氧+积雪草苷组的RVSP、RV/(LV+S)、RV/BW、WA/TA和WT/TT显著降低( P <0.05)。同时H组的p-p38和p-NF-κB蛋白水平较N组显著升高,IL-6和TNF-α浓度亦较N组显著升高( P <0.05),而低氧+积雪草苷组的p-p38和p-NF-κB蛋白水平及IL-6和TNF-α浓度均较H组显著降低( P <0.05)。结论:抑制p38/NF-κB信号通路和减轻炎症反应可能是积雪草苷减轻低氧性肺动脉高压的重要机制之一。

罗布麻总黄酮干预p38MAPK/NF-κB信号通路治疗大鼠动脉粥样硬化作用及机制研究

目的:观察罗布麻叶总黄酮对动脉粥样硬化大鼠胸主动脉中p38MAPK/NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响,探讨罗布麻叶总黄酮干预AS的作用及其可能的作用机制。方法:72只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药对照组及罗布麻叶总黄酮低、中、高剂量组。除正常对照组外,其他各组连续3天注射维生素D3后喂饲高脂饲料9周,进行造模,造模结束后各组分别给药4周。实验结束后,取大鼠胸主动脉,常规制备石蜡标本,HE染色,光镜下观察大鼠胸主动脉的病变情况;分光光度法检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平;Western-bloting法检测p38MAPK、p-p38MAPK、NF-κB、IL-6蛋白的表达。结果:罗布麻叶总黄酮中、高剂量组能显著改善胸主动脉壁病变,减少胸主动脉内皮下泡沫细胞及脂质空泡,并可降低大鼠血清中LDL-C、TC、TG水平以及hs-CRP的含量,提高HDL-C;同时发现罗布麻叶总黄酮中、高剂量组可以抑制p38MAPK的磷酸化,降低NF-κB、IL-6蛋白的表达。结论:罗布麻叶总黄酮对大鼠动脉粥样硬化具有明显的治疗作用,其抗AS的作用可能是通过干预p38MAPK/NF-κb信号通路下调相关蛋白来实现的。

通痹胶囊对佐剂性关节炎大鼠p38MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的观察通痹胶囊对佐剂性关节炎大鼠血清和滑膜组织中炎性因子表达及p38MAPK/NF-κB信号通路的影响。方法48只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、通痹胶囊不同剂量(375、750、1500mg·kg-1)组及雷公藤多苷片(10 mg·kg^-1)组,除正常组外,其余各组均于右后足跖部注射弗氏完全佐剂造模。造模第8日,各组给予相应药物灌胃治疗,每日1次,连续4周。对大鼠关节炎指数进行监测,足容积法测量致炎侧足肿胀度;灌胃结束后,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清及滑膜中白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠滑膜组织中p38MAPK、NF-κB/P65、IκBα蛋白表达的。结果与正常组相比,造模后大鼠血清及滑膜组织中IL-1、TNF-α含量明显升高,p38MAPK、NF-κB/P65、IκBα表达显著增多(P<0.01);与模型组相比,通痹胶囊能够有效降低大鼠血清及滑膜组织中IL-1、TNF-α的含量,并抑制滑膜组织中p38MAPK、NF-κB及IκBα的蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论通痹胶囊具有明显的抗炎作用,其治疗类风湿关节炎的作用机制之一可能为抑制p38MAPK/NF-κB信号通路的激活。

p38 MAPK/NF-κB/cyclin D1信号传导通路在乳房外Paget's病中的意义

目的探讨磷酸化p38细胞丝裂原活化蛋白激酶α(phospho-p38 mitogen-activated protein kinase,p-p38 MAPKα)、磷酸化核因子-κB(phosphor-nuclear factor kappaB,p-NF-κB)及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在乳房外Paget’s病(extramammary Paget’s disease,EMPD)表达的意义及评价它们之间的相关性。方法采用免疫组化ABC法检测了p-p38MAPK,p-NF-κB及Cyclin D1蛋白在来源于30例患者的35张EMPD石蜡包埋切片中的表达(5张来源于有转移的EMPD淋巴结标本)。结果①在35张标本中EMPD石蜡包埋切片中有30例p-p38 MAPK表达阳性,28例p-NF-κB表达阳性,27例cyclin D1表达阳性,并且在其中5张来源于有转移的EMPD淋巴结标本中,5例均p-p38 MAPK和p-NF-κB表达阳性,4例cyclin D1表达阳性;②在EMPD中,p-p38 MAPK,p-NF-κB和cyclin D1阳性表达两两间均有明显的相关性。结论p-p38 MAPK,p-NF-κB和cyclin D1在EMPD中有过度表达,p38 MAPK/NF-κB/cyclin D1信号传导通路可能在EMPD肿瘤形成机制中起重要作用。