肿瘤坏死因子α、环氧合酶2与p38丝裂原活化蛋白激酶及其信号通路在鼻息肉发病中的作用

目的对肿瘤坏死因子α(TNF-α)、环氧合酶2(COX-2)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)进行相关性分析,研究TNF-α/p38MAPK/NF-κB/COX-2信号通路在鼻息肉发病中的作用机制,以深入阐明鼻息肉的发病机制,为临床治疗鼻息肉及寻找特异性治疗药物提供理论依据。方法选取20例未采用糖皮质激素治疗的复发性鼻息肉组织标本、20例初发鼻息肉组织标本、20例正常鼻黏膜组织。采用苏木素-伊红(HE)染色和免疫组织化学染色、常规反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹实验对鼻息肉和正常鼻黏膜组织中的TNF-α、COX-2和p38MAPK进行检测。结果 TNF-α、COX-2和p38MAPK在正常下鼻甲黏膜组织中无或极少量表达,在鼻息肉组织中均呈高表达(P<0.01)。复发型鼻息肉组织中,TNF-α、COX-2和p38MAPK的阳性表达面积和密度均高于鼻息肉组(P<0.05)。鼻息肉组中,TNF-α、COX-2和p38MAPK的表达成正相关(P<0.05)。结论 TNF-α、COX-2和p38MAPK在鼻息肉组织中均呈高表达,而且在复发性鼻息肉组织中表达更显著。p38MAPK信号通路参与鼻息肉的发生、发展,可能起偶联作用。

环氧合酶-2和磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶在扁平苔藓皮损中的表达

目的:检测环氧合酶-2(COX-2)及其上游调控蛋白磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(p-P38MAPK)在扁平苔藓皮损中的表达,探讨其在发病中的意义。方法:采用免疫组化技术检测20例扁平苔藓皮损标本中COX-2和p-P38MAPK的表达情况,20例正常皮肤组织作为对照。结果:20例扁平苔藓皮损标本中COX-2和p-P38MAPK的积分光密度值(IOD)分别为(8.46±1.79)×10^3和(11.54±2.85)×10^3,均明显高于对照组(3.14±2.35)×10^3和(6.26±3.12)×10^3,差别具有统计学意义(均P<0.01),同时COX-2与p-P38MAPK的表达强度呈正相关(r=0.62,P<0.01)。结论:扁平苔藓皮损中COX-2表达上调,可能与上游P38MAPK的活化有关,可能是引起扁平苔藓发病的环节之一。

P38MAPK通路对SAP大鼠模型海马神经元诱导型一氧化氮合酶和前列腺素E2表达的影响

目的:研究P38丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)通路在急性重症胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠模型海马神经元中对诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的作用.方法:将60只SD大鼠随机分为对照组、SAP模型组(模型组)、抑制剂组(P38MAPK通路抑制剂SB203580).Nissl染色、免疫组织化学显色、免疫印迹法检测大鼠海马CA1区iNOS、PGE2和p-P38表达的变化;应用透射电镜观察胰腺组织超微结构的变化.结果:与对照组相比,SAP模型组海马CA1区p-P38(20.4±2.2 vs 2.1±1.3)、i NOS(33.6±4.4 vs 3.7±0.4)、PGE2(34.7±4.0 vs 2.4±1.0)阳性神经元的数量显著增加(P<0.05);给予S B203580后,抑制剂组海马C A1区p-P3 8(1 2.8±0.7)、iNOS(1 4.4±4.9)、P G E2(18.3±0.5)阳性神经元的数量明显减少(P<0.05).模型组胰腺细胞粗面内质网脱颗粒,线粒体水肿扩张,抑制剂组上述改变明显减轻.结论:P38丝裂原活化蛋白激酶通路对SAP大鼠模型海马i NOS和PGE2表达可能起调控作用,抑制该通路对SAP大鼠具有神经保护作用.

丹参酮ⅡA对内皮细胞环氧合酶2表达的影响及相关机制

目的探讨丹参酮ⅡA对主动脉内皮细胞环氧合酶2(COX-2)表达的影响及相关机制。方法体外培养人主动脉内皮细胞株并分为三组:血管紧张素Ⅱ(100 nmol/L)组、血管紧张素Ⅱ(100 nmol/L)+丹参酮ⅡA(1μmmol/L)组及对照组,共培养10 min、1 h及2 h后分别收集细胞,运用实时荧光定量PCR检测COX-2 mRNA的表达量,Western blot检测COX-2、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、核因子κB(NF-κB)及磷酸化NF-κB(p-NF-κB)蛋白表达的变化。结果在血管紧张素Ⅱ的作用下,内皮细胞内COX-2 mRNA和蛋白表达水平明显增加(P<0.01),且p-p38MAPK和p-NF-κB水平也同步提高(P<0.01)。加用丹参酮ⅡA处理后,内皮细胞COX-2 mRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.01),p-p38MAPK和p-NF-κB水平也受到明显抑制(P<0.01)。结论丹参酮ⅡA明显抑制主动脉内皮细胞COX-2的表达,其机制可能与抑制p38MAPK、NF-κB的磷酸化有关。

幽门螺杆菌通过p38MAPK信号通路上调人胃癌MKN45细胞中COX-2启动子的活性

目的:探讨H.pylori感染对人胃癌MKN45细胞环氧合酶2(COX-2)启动子荧光素酶报告基因重组质粒(pGL3-Basic-COX-2-promoter)活性的影响及p38MAPK信号通路对其的调控作用.方法:将构建的COX-2启动子pGL3-Basic-COX-2-promoter和内参质粒pRL-SV40共转染人胃癌MKN45细胞,加入100倍细胞数量的H.pylori共培养一段时间后,检测双荧光素酶的活性.Western blot检测H.pylori感染对人胃癌MKN45细胞p38MAPK信号通路的激活作用.运用p38MAPK特异性抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号通路,观察H.pylori对MKN45细胞COX-2启动子活性的影响.结果:瞬时转染实验显示,COX-2启动子在MKN45细胞中的转录表达随时间的变化而升高,转染后40h的双报告基因活性是转染后8h的3.5倍(P<0.01);加入H.pylori共培养后,同时间点的荧光素酶活性明显升高(P<0.05或P<0.01),转染后40h的活性是转染后8h的5倍(P<0.01).H.pylori感染20min后,p38MAPK信号通路被激活,60min达峰值;加入p38MAPK信号通路特异性抑制剂SB203580抑制p38MAPK信号通路后,COX-2启动子的活性均明显下调.结论:H.pylori感染通过p38MAPK信号通路上调COX-2启动子活性,这可能是H.pylori促进胃癌发生发展的重要因素之一.

抑制免疫抑制因子COX-2对视网膜神经节细胞凋亡的影响及p38MAPK信号的调控作用

目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398对H_2O_2诱导的视网膜神经节RGC-5细胞活力和凋亡及p38MAPK信号通路的调控作用。方法:200、300、400、600、800μmol/L的H_2O_2刺激视网膜神经节RGC-5细胞建立H_2O_2损伤模型,根据半数抑制浓度选择H_2O_2的浓度; COX-2抑制剂NS-398处理H_2O_2诱导的RGC-5细胞7 h,SB203580作为p38MAPK信号通路抑制剂,通过MTT法及流式细胞术分别检测细胞的活力和凋亡率; Western blot检测细胞增殖核抗原(PCNA)、p53、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、p-p38的蛋白表达。结果:不同浓度的H_2O_2均可抑制RGC-5细胞活力,且随H_2O_2浓度升高细胞活力降低,由于400μmol/L的H_2O_2可抑制一半的细胞活力,选择作为研究对象;与空白对照组比较,H_2O_2组细胞活力及PCNA蛋白表达均显著降低,细胞凋亡率及p53和p-p38的蛋白表达均显著升高,与H_2O_2组比较,H_2O_2+NS-398组细胞活力及PCNA蛋白表达均显著升高,细胞凋亡率及p53和p-p38的蛋白表达均显著降低(P<0. 05);与H_2O_2+NS-398组比较,H_2O_2+NS-398+SB203580组细胞活力及PCNA蛋白表达均显著升高,细胞凋亡率及p53和p-p38的蛋白表达均显著降低(P<0. 05)。结论:抑制免疫抑制因子COX-2表达可通过调控p38MAPK信号通路提高视网膜神经节细胞活力和抑制细胞凋亡。

丝裂原活化蛋白激酶信号通路对软脂酸培养的肌细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子表达的调控作用

目的研究软脂酸对C2C12细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子(PGC-1α)表达的影响,揭示丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路与PGC-1α表达的关系,寻找软脂酸诱导C2C12细胞PGC-1α表达变化的上游调节通路。方法检测软脂酸培养的C2C12细胞PGC-1α、细胞外信号调节激酶(ERK)、jnk氨基末端激酶(JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)及其磷酸化蛋白phosp-38MAPK(P-p38MAPK)的表达变化。寻找发生变化的MAPKs信号通路,用筛选到的p38MAPK抑制剂进行干预,分为对照(Con)组、软脂酸(Palmitate)组、p38MAPK抑制剂组和Palmitate+p38MAPK抑制剂组,测定PGC-1α、p38MAPK总蛋白及其P-p38MAPK的表达。结果软脂酸培养的C2C12细胞PGC-1α蛋白表达下降,呈时间依赖性;ERK、phospho-ERK、JNK、phospho-JNK及p38MAPK表达无变化,P-p38MAPK表达升高。用p38MAPK抑制剂干预C2C12细胞,PGC-1α表达在Palmitate组最低,p38MAPK抑制剂组和Palmitate+p38MAPK抑制剂组较Palmitate组升高,p38MAPK抑制剂组最高。结论软脂酸诱导的PGC-1α表达下降可能由p38MAPK信号通路调控。

电针对帕金森病模型大鼠中脑黑质p38丝裂原活化蛋白激酶的影响

目的:探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路介导的炎性反应在电针防治帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠中的作用。方法:健康雄性SD大鼠32只,随机分为正常组、假手术组、模型组、电针组,每组8只。模型组与电针组大鼠采用颈背部皮下注射鱼藤酮(2mg/kg,溶解于葵花油,浓度2mg/mL)制备PD模型;假手术组,在与模型组大鼠相同部位注射等量的不含鱼藤酮的葵花油乳化液;正常组不作处理。电针组取"风府""太冲"行电针治疗(连续波,频率2Hz,强度1mA,通电20min),1次/d,连续14d。其他组不予干预治疗。采用免疫组化法检测各组大鼠中脑黑质酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)、环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达变化。结果:模型组大鼠出现典型的PD行为学改变,中脑黑质区TH阳性神经元计数较正常组、假手术组显著降低,p-p38MAPK、COX-2阳性神经元计数较正常组、假手术组显著升高,经统计学分析,差异均具有统计学意义(均P<0.01);电针组TH阳性神经元计数较模型组明显升高,p-p38MAPK、COX-2则较模型组表达下降,经统计学分析,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。结论:电针治疗可明显降低PD大鼠炎性介质COX-2的表达,抑制p38MAPK磷酸化,减轻PD大鼠多巴胺能神经元的损伤,这一作用可能与其影响p38MAPK信号通路有关。

健脾解毒方介导p38MAPK信号转导下调幽门螺杆菌诱导的胃癌细胞环氧合酶2启动子活性

目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)对人胃癌MKN45细胞环氧合酶2(Cyclooxygenase-2,COX-2)启动子荧光素酶报告基因重组质粒(pGL3-Basic-COX-2-promoter)活性的影响和健脾解毒方对其的调控作用及可能的机制。方法:将构建的pGL3-Basic-COX-2-promoter转染MKN45细胞,观察H.pylori对其活性的影响。运用p38MAPK特异性抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号通路,观察H.pylori对MKN45细胞COX-2启动子活性的影响。Western blot法检测健脾解毒方对H.pylori感染的MKN45细胞p38MAPK信号通路及其下游激活转录因子-2(ATF-2)表达的影响。结果:H.pylori可增加COX-2启动子活性;抑制p38MAPK信号通路后,COX-2启动子活性明显下调;健脾解毒方能够抑制H.pylori诱导的p38MAPK及ATF-)的活性。结论:H.pylori通过p38MAPK信号通路上调胃癌细胞COX-2启动子活性;健脾解毒方通过调控p38MAPK/ATF-2信号通路,抑制COX-2启动子活性,是其防治H.pylori诱发胃癌的机制之一。

丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路在脑缺血再灌注损伤中的作用及机制

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信号转导通路在脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia/reperfusion,I/R)中的作用及机制。方法将大鼠随机分为6组:未使用p38MAPK抑制剂SB203580的假手术组(Sham组)、使用抑制剂的假手术组(Sham/SB组)、未使用抑制剂再灌注24 h组(I/R 24 h组)、未使用抑制剂再灌注48 h组(I/R 48 h组)、使用抑制剂再灌注24 h组(SB 24 h组)和使用抑制剂再灌注48 h组(SB 48 h组)。采用大脑中动脉线栓法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)复制大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,使用抑制剂的各组于造模前30 min经腹腔注射SB203580(5 mg/kg,溶于5 mg/ml DMSO)。采用免疫荧光双标法检测大鼠大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)和脑微血管(microvascular,Mic.V)周围IgG的渗出;Western blot和RT-PCR法检测大鼠脑组织中p38、一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase,MMP-9)、胶原Ⅳ型(collagenⅣ)蛋白和基因表达的变化。结果随着再灌注时间的延长,大鼠脑血管内IgG渗出量增加(P<0.01);经p38MAPK抑制剂预处理后,IgG的渗出程度有所减轻。脑缺血再灌注后,大鼠脑组织中p38、iNOS、MMP-9蛋白的表达水平和基因mRNA的转录水平均明显升高(P<0.05),经p38MAPK抑制剂预处理后,能显著抑制p38、iNos、MMP-9蛋白的表达水平和基因mRNA的转录水平(P<0.05);collagenⅣ蛋白的表达水平和基因mRNA的转录水平随着缺血时间的延长而逐渐下降(P<0.05),经p38MAPK抑制剂预处理后,其下降程度有所减轻(P<0.05)。结论 MAPK通路中的关键蛋白p38、iNOS、MMP-9在脑缺血时表达显著增加,其过度表达直接导致血脑屏障的破坏,抑制其表达,从而遏制对血脑屏障的破坏,有望为I/R的治疗提供新的途径。

过表达骨形态发生蛋白2对骨折大鼠的骨愈合和成骨能力的影响及其可能机制

目的探讨过表达骨形态发生蛋白(BMP)-2对骨折大鼠的骨愈合和成骨能力的影响及其可能机制。方法将60只SD大鼠随机分为模型组、BMP-2过表达的阴性质粒组(pcDNA/NC组)和BMP-2过表达质粒组(pcDNA/BMP-2组),各20只。每组均通过横行切断大鼠股骨中段建立大鼠骨折模型。造模24 h后,给予模型组、pcDNA/NC组、cDNA/BMP-2组大鼠经尾静脉分别注射磷酸缓冲盐溶液、BMP-2过表达的阴性质粒溶液、BMP-2过表达质粒溶液。49 d后,处死所有大鼠,X线片观察各组大鼠骨折线的变化及达到骨性愈合的时间;micro-CT检测各组大鼠的骨密度、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁密度(Tb.Th)和骨小梁数量(Tb.N);蕃红O染色后观察各组大鼠股骨组织病理变化;检测各组大鼠血清中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10和ALP水平,以及骨组织BMP-2、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、鞘磷脂磷酸二酯酶(Smpd)3、Smad1和Runx2蛋白的表达情况。结果pcDNA/BMP-2组大鼠在第7周时骨折完全愈合。与其他两组比较,pcDNA/BMP-2组骨密度、BV/TV、Tb.Th和Tb.N均升高,血清IL-6、TNF-α水平均下降,血清IL-10水平及ALP活性升高,骨组织BMP2、Smad1、Runx2、p38 MAPK和Smpd3的蛋白表达水平均升高(均P<0.05)。结论过表达BMP-2可加快大鼠骨折愈合,这可能与BMP-2降低炎症因子的表达,上调Smad1和Runx2的表达以促进骨细胞中胶原蛋白的形成,以及通过p38 MAPK调节Smpd3的表达有关。

辣椒素通过p38 MAPK/COX-2信号通路对局灶性脑缺血大鼠认知功能的影响

目的:探讨辣椒素对脑缺血再灌注大鼠认知功能障碍的影响及可能的作用机制。方法:SD雄性大鼠随机选取12只作为假手术组,其余大鼠采用线栓法复制大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。将建模成功的大鼠分为模型组、SB203580[p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂,1 mg·kg^(-1)]组、辣椒素低、高剂量(50、100 mg·kg^(-1))组、anisomycin(p38 MAPK激动剂,2 mg·kg^(-1))+辣椒素(100 mg·kg^(-1))组,每组12只。再灌注及给药结束后对大鼠进行神经功能缺陷评分;Morris水迷宫和新型物体识别实验检测大鼠学习和认知能力;苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织海马区病理学变化;免疫荧光法检测海马组织小胶质细胞的活化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测脑组织白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))炎性因子的水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)、p38 MAPK、磷酸化(p)-p38 MAPK、环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分、逃避潜伏期、海马CA1区钙结合蛋白-1(Iba-1)阳性表达的小胶质细胞数量、脑组织IL-1β、TNF-α、PGE_(2)水平、海马组织p-p38 MAPK/p38MAPK、COX-2的表达显著升高(P<0.01);穿越平台位置次数、新颖物体辨别指数(DI)、海马组织TRPV1的表达显著减少(P<0.01),且海马神经细胞数量减少,大量炎性细胞浸润;与模型组比较,辣椒素低、高剂量组神经功能缺损评分、逃避潜伏期、海马CA1区Iba-1阳性表达的小胶质细胞数量、脑组织IL-1β、TNF-α、PGE_(2)水平、海马组织p-p38 MAPK/p38 MAPK、COX-2的表达明显降低(P<0.05,P<0.01);穿越平台位置次数、DI、TRPV1的表达明显升高(P<0.05,P<0.01),少量炎性细胞浸润,神经细胞数量明显增多;且使用p38 MAPK的激活剂anisomycin可增加COX-2的表达,明显减弱辣椒素对小胶质细胞活化的抑制作用。结论:辣椒素对脑缺血再灌注大鼠的认知功能具有保护作用,其作用机制可能与抑制p38 MAPK/COX-2信号通路的激活,进而抑制小胶质细胞的过度活化有关。

银杏蜜环口服溶液作用p38 MAPK调节eNOS/NO信号途径保护人脐静脉内皮细胞缺氧复氧损伤

目的:评估银杏蜜环口服溶液对缺氧复氧损伤人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用;从p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)及内皮型一氧化氮合酶(e NOS)/一氧化氮(NO)信号途径探讨银杏蜜环口服溶液保护受损HUVECs的药效机制。方法:缺氧缺糖/复氧复糖法建立体外HUVECs缺血再灌注损伤模型。分为正常组、模型组、银杏蜜环口服溶液高质量浓度组(75 mg·L-1,简称银蜜高),低质量浓度组(36 mg·L-1,简称银蜜低),p38 MAPK抑制剂SB203580组,银蜜高+SB203580组,e NOS抑制剂亚硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)组,银蜜高+L-NAME组。细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)及微量酶标法检测细胞活力及细胞损伤;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)/p38 MAPK和磷酸化e NOS(p-e NOS)/e NOS蛋白表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),可溶性细胞间黏附分子-1(s ICAM-1),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)含量;硝酸盐还原酶法检测NO含量。结果:银蜜高、银蜜低组可显著提高缺氧复氧损伤HUVECs活力、降低细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量(P<0.05,P<0.01);抑制受损细胞p38的磷酸化(P<0.05),降低细胞培养上清中TNF-α,s ICAM-1含量(P<0.05,P<0.01)。在给予银蜜高或(和)SB203580后,受抑制的e NOS磷酸化表达水平显著升高(P<0.05);银蜜高可显著提高受损细胞NO含量,在加入e NOS抑制剂L-NAME后,银蜜高可拮抗L-NAME降低细胞NO生成和升高Caspase-3的作用(P<0.05)。结论:银杏蜜环口服溶液可提高氧复氧损伤HUVEs活力,具有抗炎、调节内皮系统、抑制细胞凋亡的作用,机制与其作用于p38 MAPK进而调节e NOS-NO信号途径相关。

基于p38 MAPK/iNOS信号通路探讨加味散偏汤对硝酸甘油诱导的大鼠偏头痛作用机制

目的:探讨加味散偏汤对硝酸甘油诱导的大鼠偏头痛的作用机制。方法:将72只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、模型组(硝酸甘油,10 mg·kg^(-1))、利扎曲坦组(0.89 mg·kg^(-1))、加味散偏汤高、中、低剂量组(12.96、6.48、3.24 g·kg^(-1))。腹腔注射硝酸甘油建立大鼠偏头痛模型。测试大鼠眼眶和足底痛觉敏感[机械痛阈值(MPT)]行为学实验;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-1β(IL-1β)等炎症因子水平;免疫组化法(IHC)检测大鼠三叉神经脊束核尾核(TNC)诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠TNC区磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和iNOS蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠TNC区iNOS、p38 MAPK和IL-1βmRNA表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠机械痛阈值显著降低(P<0.01);血清NO、TNF-α、IFN-γ和IL-1β炎症因子水平显著升高(P<0.01),TNC区脑组织p38 MAPK、iNOS和IL-1β等炎症因子表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠MPT水平均明显提升(P<0.05,P<0.01),且加味散偏汤中剂量组效果最为显著(P<0.01)。与模型组比较,经加味散偏汤治疗后,大鼠TNC区组织iNOS、p38 MAPK和IL-1βmRNA及p-p38 MAPK、iNOS蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),血清中NO、TNF-α、IFN-γ和IL-1β等表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:加味散偏汤可通过抑制p38 MAPK/iNOS通路,减少NO、TNF-α、IFN-γ和IL-1β等促炎因子表达,减轻神经源性炎症反应,发挥治疗偏头痛的作用。

独活寄生汤治疗膝骨关节炎的作用机制

背景:前期研究表明独活寄生汤可有效抑制膝骨关节炎炎症反应,但其具体机制尚不明确。目的:观察独活寄生汤对膝骨关节炎大鼠软骨、滑膜miR-146a/-155-NF-κB/p38MAPK信号通路相关因子的影响。方法:SD雄性大鼠36只,购于上海斯莱克实验动物有限责任公司。实验方案经福建中医药大学动物实验伦理委员会批准,批准号为[2018]福中医伦理审字第(014)号。大鼠适应性喂养1周后,随机分为空白组(12只)和造模组(24只)。造模组采用改良Hulth法于大鼠右膝关节复制膝骨关节炎模型,造模后1周将造模大鼠随机分为模型组(12只)和实验组(12只)。空白组和模型组给予生理盐水10 mL/(kg·d)灌胃;实验组给予独活寄生汤9.3 g/(kg·d)灌胃。治疗3个月后,麻醉后切取大鼠右膝关节滑膜组织,ELISA法检测诱导型一氧化氮合酶、环氧合酶2、基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13含量变化;取大鼠软骨组织,免疫组织化学法检测NF-κB p65和p38 MAPK蛋白表达;Real-time PCR法检测miR-146a、miR-155、NF-κB p65和p38 MAPK基因表达。结果与结论:①Real-time PCR结果表明独活寄生汤能抑制miR-155、NF-κB p65和p38 MAPK基因表达,促进miR-146a基因表达(P <0.01);②免疫组织化学结果与Real-time PCR结果趋势一致,即独活寄生汤能抑制NF-κB p65和p38 MAPK蛋白表达(P <0.01);③ELISA结果显示独活寄生汤可有效抑制诱导型一氧化氮合酶、环氧合酶2、基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13表达;④结果提示,独活寄生汤可通过调控miR-146a/-155-NF-κB/p38 MAPK信号通路,抑制膝骨关节炎炎症反应,从而起到治疗膝骨关节炎作用。