有丝分裂原激活蛋白激酶p38在佐剂关节炎大鼠滑膜及肺组织的表达

目的研究有丝分裂原激活蛋白激酶（MAPK）-p38在佐剂关节炎（AA）大鼠滑膜及肺组织中表达，探讨类风湿关节炎（RA）的发病机制。方法给大鼠右后足跖部皮下注射完全弗氏佐剂（CFA）复制RA的动物模型-AA。用原位杂交法检测p38mRNA在AA大鼠滑膜及肺组织中的表达。结果AA大鼠滑膜和肺组织p38mRNA阳性细胞的平均灰度值（0～255，深～浅）明显低干正常大鼠（P〈0．01）。AA大鼠滑膜的巨噬细胞，成纤维细胞和淋巴细胞的胞浆内均有p38mRNA的表达。肺组织中p38mRNA主要表达于巨噬细胞，单核细胞及浸润的淋巴细胞中。结论AA大鼠p38mRNA过表达与AA的滑膜及肺部病变有关，可能在RA的发病中有重要作用。

丙酮酸通过抑制p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)磷酸化减轻低氧对PC12细胞的损伤

目的观察丙酮酸对低氧诱导神经细胞损伤的保护作用及机制。方法采用丙酮酸处理PC12细胞,10 m L/L O2的低氧环境暴露12、24、48 h。MTT法观察细胞增殖情况,检测胱天蛋白酶3(caspase-3)活性观察细胞凋亡情况,ELISA检测白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,Western blot法检测p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化的p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白水平。结果低氧暴露24、48 h,抑制PC12细胞增殖,caspase-3活性增强,IL-1β、IL-6、TNF-α和p-p38MAPK水平增高;丙酮酸处理可显著增加PC12细胞增殖,减少细胞凋亡,降低IL-1β、IL-6、TNF-α水平,抑制p38MAPK的磷酸化水平。结论丙酮酸通过抑制p38MAPK的磷酸化而抑制低氧暴露引起PC12细胞炎症因子的表达,对低氧暴露导致的神经元损伤起保护作用。

脑缺血预适应大鼠脑内p38丝裂原激活蛋白激酶磷酸化水平和蛋白表达量的测定

目的初步探讨p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)在大鼠脑缺血预适应(IPC)形成中的作用。方法选用成年雄性Sprague-Dawley大鼠复制整体脑缺血预适应模型。将大鼠随机分为空白对照(control)、假手术(SI)、缺血预适应或缺血耐受(IT)、外周伤害对照(PNC)、外周伤害耐受(PNT)5组。应用SDS-PAGE、Western blot等实验方法,借助Gel Doc和Versa Doc凝胶成像系统,半定量检测脑躯体感觉皮层、海马组织内p38 MAPK的磷酸化水平和蛋白表达量。结果经脑IPC后,大鼠躯体感觉皮层和海马组织内p38 MAPK磷酸化水平和蛋白表达量与各自对照组相比均未见显著性差异(P>0.05,n=6)。结论大鼠大脑躯体感觉皮层和海马组织内p38 MAPK可能未以磷酸化水平和蛋白表达量改变的形式参与脑缺血预适应的形成。

p38分裂原激活蛋白激酶在小肠缺血再灌注损伤中的作用研究进展

目前国内外学者对于小肠缺血再灌注损伤的发病机制已经进行了一系列研究,其中分子机制成为研究热点.本文就p38分裂原激活蛋白激酶（p38 mitogen activated protein kinase,p38MAPK）在小肠缺血再灌注损伤发病机制中的作用（包括p38MAPK与氧化应激、炎症细胞因子、肠黏膜屏障功能、细胞凋亡的关系）以及p38MAPK在脏器缺血预处理、缺血后处理等干预措施中的研究现状作一综述.

N-乙酰半胱氨酸影响p38有丝分裂原活化蛋白激酶对顺铂诱导急性肾损伤的保护作用

目的研究N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对顺铂(cisplatin,CDDP)诱导大鼠急性肾损伤(acute kidney in-jury,AKI)后组织细胞凋亡的影响和与p38有丝分裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38MAPK)的关系。方法静脉注射CDDP制备大鼠AKI模型。大鼠随机分为正常对照组、AKI模型对照组、NAC低剂量组(50 mg.kg-1)、NAC中剂量组(100 mg.kg-1)、NAC高剂量组(200 mg.kg-1)、特异性p38MAPK抑制剂SB203580组(10mg.kg-1)。大鼠预先连续给药3 d,给予CDDP,再继续给药5 d。TUNEL法进行细胞凋亡检查。试剂盒测定肾脏组织caspase-3。Western blot测定caspase-3、Bax、Bcl-2、磷酸化p38MAPK(phosphorylated p38MAPK,p-p38MAPK)表达。结果与正常对照组相比,CDDP诱导AKI模型组肾组织凋亡细胞增加,caspase-3、Bax、p-p38MAPK表达升高,Bcl-2表达降低(P<0.01)。与AKI模型组相比,NAC与SB203580减少凋亡细胞、降低肾脏组织caspase-3、Bax、p-p38MAPK表达和增加Bcl-2表达(P<0.01)。结论 NAC可有效防治CD-DP诱导大鼠AKI,并与p38MAPK相关。

1,25-(OH)_2-VD_3下调糖尿病肾病肾脏组织p38MAPK和胶原蛋白的表达

目的研究2型糖尿病肾间质纤维化中p38丝裂原激活蛋白激酶（p38MAPK）、Ⅲ型胶原蛋白（Col3）和Ⅳ型胶原蛋白（Col4）表达，及1，25-（OH）2-VD3对其表达的影响；探讨p38MAPK与Col3和Col4表达的相关性。方法以高糖高脂饮食联合30mg／kg链脲佐菌素（STZ）诱导大鼠2型糖尿病模型。将60只大鼠随机平均分为对照组、模型组、1，25-（OH）2-VD3治疗组[建模后给予6ng／（100g·d）1，25-（OH）2-VD3治疗]、胰岛素组（建模后给予2～3U胰岛素治疗）。干预8周后检测4组血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、24h蛋白尿水平；过碘酸希夫反应（PAS）染色观察肾脏病变情况；采用Western blot及免疫组织化学染色检测大鼠肾间质p38MAPK、CoD和Col4的表达；采用Spearman法进行相关性分析。结果与模型组相比，1，25-（OH）2-VD3治疗组和胰岛素治疗组血清肌酐、尿素氮、24h蛋白尿和肾间质受损面积均降低；与对照相比，模型组p38MAPK、Col3和Col4水平增加，1，25-（OH）2-VD3治疗组和胰岛素治疗组明显降低；相关性分析发现24h蛋白尿与p38MAPK、CoB和Col4免疫组织化学的结果呈正相关，p38MAPK的表达与Col3和Col4表达呈正相关。结论2型糖尿病大鼠肾间质组织p38MAPK、Col3和Col4表达上调，1，25-（OH）2-VD3可能通过p38MAPK下调Col3、Col4的表达改善糖尿病肾病肾组织纤维化。

过表达硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)通过激活p38MAPK通路促进MIN6细胞凋亡

目的研究硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)对MIN6细胞凋亡的影响及其相关机制。方法将处于对数生长期的MIN6细胞,进行TXNIP慢病毒感染,用荧光显微镜和Western blot法检测感染效率。将MIN6细胞分为对照组、空载体(LV-GFP)组、TXNIP过表达(LV-GFP-TXNIP)组。利用CCK-8法检测细胞增殖活性,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测TXNIP、硫氧还蛋白(TRX)、Bax、Bcl2、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)及其磷酸化蛋白激酶(p-p38MAPK)的蛋白水平。用p38MAPK抑制剂SP169316处理上述三组细胞,Western blot法检测其蛋白磷酸化水平及Bax、Bcl2、c-caspase-3蛋白水平的变化。结果感染慢病毒72 h后,LV-GFP组、LV-GFP-TXNIP组感染率分别为(87.10±2.30)%、(92.21±0.54)%,说明病毒感染成功。与对照组和LV-GFP组相比较,LV-GFP-TXNIP组的细胞生存率明显降低,细胞凋亡率、Bax/Bcl2比值、c-caspase-3蛋白、p38MAPK蛋白磷酸化水平明显增高。p38MAPK特异性抑制剂作用后,LV-GFP-TXNIP组Bax/Bcl2表达比率及c-caspase-3蛋白表达均显著减少。结论过表达TXNIP通过激活p38MAPK信号通路促进MIN6细胞的凋亡。

p38有丝分裂原激酶活化参与继发性脊髓损伤后神经细胞凋亡的实验研究

探索脊髓损伤(SCI)后p38有丝分裂原激酶(p38MAPK)的表达及其与神经细胞凋亡的关系。采用Allen’s法建立大鼠急性SCI动物模型,用蛋白印迹法和免疫组织化学染色方法检测SCI后p38MAPK和caspase-3表达的变化;采用实时定量PCR法检测SCI后caspase-3 mRNA的表达;用原位末端标记法(TUNEL)检测SCI后神经细胞凋亡。结果表明SCI后总p38MAPK表达无变化,但p38MAPK磷酸化明显增多,于伤后6h达高峰;伤后24hcaspase-3表达明显增加。TUNEL检测显示,伤后6h受损伤的脊髓组织有少许凋亡细胞出现,24h细胞凋亡最明显。鞘内注射p38MAPK抑制剂SB203580,明显减少caspase-3的表达,并减少细胞凋亡。以上结果显示SCI后损伤局部p38MAPK激活诱导了caspase-3基因表达,导致神经细胞凋亡;抑制p38MAPK可以阻止SCI后继发的神经细胞凋亡。

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂对人精子活动力的影响

丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）属于丝/苏氨酸蛋白激酶,有报道[1]其家族成员细胞外信号调节激酶（extracellular-signal regulated protein kinase,ERK）和p38MAPK定位于精子尾部中段,参与精子活动力的调节;17-β雌二醇可通过PI3K/Akt通路激活ERK,增加精子活动力,

p38丝裂原活化蛋白激酶在糖尿病心肌病发病过程中的作用

糖尿病心肌病（diabetic cardiomyopathy，DCM）是糖尿病患者的一种独立心脏并发症（不依赖心肌缺血和高血压病），临床表现为心脏舒张和（或）收缩功能障碍，可诱发心力衰竭、心律失常、心源性休克和猝死等。其特征为心脏舒张障碍先于收缩障碍，伴有心肌形态学和生物化学指标异常[1]。

地黄合剂介导p38 MAPK通路对糖尿病大鼠主动脉的影响

目的研究地黄合剂抑制p38有丝分裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38 MAPK)对糖尿病大鼠主动脉蛋白羰基和炎症因子的影响。方法50只SPF大鼠均分为5组,分别为正常组、糖尿病组、氯沙坦组、低剂量地黄(合剂)组、高剂量地黄(合剂)组,除正常组外,其他组大鼠建立糖尿病大鼠模型,对其用药,麻醉抽血,开腹取出主动脉,采用放免法、苏木素-伊红染色法(HE染色法)、蛋白印迹法(Western blot)等检测大鼠基本指标、主动脉病理学变化情况、p38 MAPK通路相关蛋白情况、蛋白羰基相关指标水平、炎性因子情况并进行对比分析。结果与正常组相比,糖尿病组大鼠体质量下降,血糖和血管紧张素2升高(P<0.05);氯沙坦组和高剂量地黄组体质量明显升高,血糖和血管紧张素2降低(P<0.05);低、高剂量地黄组组织形态均有不同程度的变化,高剂量地黄组和氯沙坦组大鼠细胞变化减轻程度最为明显(P<0.001),低剂量地黄组次之(P<0.05)。与糖尿病组相比,正常组大鼠的p38 MAPK、cAMP反应元件结合蛋白1(cAMP response element-binding protein 1,CREB1)、MAPK激酶3/6(MAPK kinase3/6,MKK3/6)、环氧化酶2(cyclooxygenase 2,COX2)水平明显升高,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1(MAP kinase phosphatase-1,MKP-1)降低(P<0.05),低、高剂量地黄组p38 MAPK、COX2明显降低(P<0.05),氯沙坦组和高剂量地黄组p38 MAPK、CREB1、MKK3/6、COX2水平显著降低,MKP-1明显升高(P<0.05);丙二醛(malondialdehyde,MDA)明显降低(P<0.05);超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(gbutathione peroxidase,GSH-px)显著升高(P<0.05)。与糖尿病组相比,氯沙坦组炎性因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、白细胞介素6(interleukin 10,IL-10)明显降低(P<0.001);低剂量地黄组TNF-α、MCP-1、IL-10有所降低(P<0.05),高剂量地黄组TNF-α、MCP-1、IL-10显著降低(P<0.001)。结论高剂量地黄合剂的药效与氯沙坦相当,能够有效阻断p38 MAPK信号通路,改善糖尿病大鼠主动脉的病理组织结构,降低主动脉蛋白羰基水平,抑制氧化还原反应的发生,降低炎性因子水平。

重组HBcAg激活p38MAPK信号通路增加髓源性树突状细胞IL-15的分泌

目的探讨重组人乙型肝炎病毒核心抗原(rhHBcAg)诱导髓源性树突状细胞(mDC)分泌白细胞介素15(IL-15)的机制。方法采用人单核细胞磁珠负分选试剂盒分选外周血单核细胞,采用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、IL-4和肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导分化为mDC,10μg/m L rhHBcAg刺激mDC 1~6 d;分别用25μmol/L磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路抑制剂LY294002、1μmol/L p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)信号通路抑制剂SB203580、100 nmol/L c-Jun N末端激酶(JNK)信号通路抑制剂SP600125和150 nmol/L胞外信号调节激酶(ERK)信号通路抑制剂U0126预处理1 h,再给予10μg/m L rhHBcAg刺激48 h。之后收集细胞和细胞培养上清,实时定量PCR检测IL-15 mRNA水平,ELISA检测IL-15蛋白水平,Western blot法检测PI3K/Akt和MAPK信号通路分子磷酸化水平。结果与rhHBcAg未刺激组比较,rhHBcAg刺激组IL-15 mRNA和蛋白水平显著升高;与rhHBcAg刺激组比较,p38抑制剂预处理组IL-15水平明显降低,但PI3K/Akt、JNK和ERK抑制剂预处理组IL-15水平未见显著性改变。结论 rhHBcAg通过p38MAPK信号通路上调外周血mDC IL-15的分泌。

p38蛋白激酶活性测定方法

蛋白激酶ｐ３８／ＨＯＣ１是ＭＡＰＫ家族重要组成部分，在全身性炎症反应、休克、细胞迁移、细胞凋亡、心血管疾病等方面具有重要作用，测定上述病理过程中Ｐ３８蛋白激酶活性，对于了解ｐ３８信号传导通路与疾病的关系以及ｐ３８信号传导通路作为某些疾病的治疗靶点提供理论依据。ｐ３８蛋白激酶活性有同位素和非同位素两种方法，目前主要用同位素方法测定，但非同位素方法具有无放射性污染、时间短、灵敏度高等特点。

H_2O_2预处理通过ERK1/2和p38 MAPK信号通路上调14-3-3蛋白在PC12细胞中的表达(英文)

目的探讨H2O2预处理对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4- phenylpyridinium, MPP+)诱导PC12细胞毒性损伤的保护作用及其可能的机制。方法分别用3-(4,5-二甲基噻唑-2)–2,5-二苯基四氮唑嗅盐[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]和4,6-二氨基-2-苯基吲哚(4’,6’-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色技术检测PC12 细胞的活力及细胞凋亡核形态改变;Western blot检测PC12细胞中14-3-3蛋白、磷酸化p38 MAPK的水平。酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒检测ERK1/2磷酸化水平。结果 MPP+处理PC12细胞24 h使细胞活力显著下降(51.6%),DAPI染色显示(51.3±6.6)%的PC12细胞呈现核固缩等细胞凋亡形态改变;H2O2预处理能显著增加PC12细胞活力(83.4%),减少凋亡细胞数[(24.9±4.3)%],说明H2O2预处理能对抗MPP+ 毒性,对 PC12 细胞具有保护作用。Western blot 结果显示,H2O2 预处理在减少 PC12 细胞凋亡的同时伴随有14-3-3蛋白及磷酸化p38 MAPK表达上调;ELISA实验显示ERK1/2磷酸化水平显著增加。相关分析显示14-3-3蛋白表达的上调与ERK1/2磷酸化水平呈正相关(r = 0.923,P < 0.01),而且PD98059抑制ERK1/2磷酸化后,H2O2预处理诱导14-3-3蛋白表达上调的作用消失。结论 H2O2预处理能对抗MPP+对PC12细胞的毒性作用,这种保护作用与细胞内14-3-3蛋白表达上调有关;而14-3-3蛋白表达上调与ERK1/2和p38 MAPK信号通路的激活有关。

肺炎链球菌热休克蛋白40通过p38MAPK和JNK通路诱导小鼠巨噬细胞免疫应答

目的探讨肺炎链球菌热休克蛋白40(HSP40)引起小鼠巨噬细胞免疫应答的机制。方法表达、纯化重组HSP40蛋白(r HSP40),去除其中的脂多糖(LPS)。r HSP40处理C57BL/6野生小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)后,反转录PCR检测BMDM中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β、IL-23p19、IL-12p40、IL-12p35、IL-10的mRNA水平,ELISA检测TNF-α、IL-6、IL-12p40水平;r HSP40刺激后,ELISA检测野生型、Toll样受体2(TLR2)和TLR4缺陷的BMDM中TNF-α和IL-6的表达水平;丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂预处理BMDM后,ELISA检测其对r HSP40诱导TNF-α和IL-6水平的影响;Western blot法检测p38MAPK和c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化水平。结果获得纯度90%以上的r HSP40;r HSP40可显著增强p38MAPK、JNK的磷酸化水平和TNF-α、IL-6的表达;p38MAPK和JNK抑制剂可显著抑制TNF-α和IL-6的表达;与野生BMDM相比较,TLR4缺陷的BMDM表达TNF-α和IL-6显著降低。结论 HSP40诱导小鼠巨噬细胞产生免疫应答受JNK及p38MAPK信号通路调控,并且此过程依赖TLR4。

白细胞介素17通过激活p38MAPK信号通路调控人牙周膜成纤维细胞RANKL和OPG的表达

目的使用p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路抑制剂确定白细胞介素17(IL-17)是否通过该通路参与调控人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)和护骨因子(OPG)的表达。方法组织块法分离培养HPDLF,20 ng/mL IL-17分别刺激0、20、40、60、80 min,Western blot法检测HPDLF磷酸化的p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白水平。HPDLF随机分为空白对照组、二甲基亚砜(DMSO)组、p38MAPK抑制剂SB203580组、IL-17组、IL-17联合DMSO组、IL-17联合SB203580组。IL-17及联合处理组,分别添加10μmol/L SB203580、20 ng/mL IL-17。实时定量PCR检测HPDLF的RANKL、OPG mRNA水平,Western blot法检测RANKL蛋白水平、ELISA检测OPG蛋白含量。结果p-p38MAPK蛋白水平在IL-17刺激后的0~60 min内随时间增加,在60 min时达到最高,在80 min时下降。IL-17可上调HPDLF中RANKL mRNA及蛋白表达,下调OPG mRNA和蛋白表达。较单纯使用IL-17刺激,添加SB203580通路抑制剂后,RANKL mRNA和蛋白水平均降低,OPG的mRNA水平升高。结论IL-17通过激活p38MAPK信号通路,上调HPDLF的RANKL表达,抑制OPG mRNA表达。

丹参酮ⅡA纳米粒对肝癌小鼠p38MAPK、TGFβ_1及Cyclin E蛋白表达的影响

目的观察丹参酮ⅡA纳米粒对肝癌小鼠p38有丝分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、转化生长因子β1(TGFβ1)及细胞周期素E(Cyclin E)蛋白表达的影响。方法 60只小鼠制备肝癌模型后随机分为6组,分别给予生理盐水以及等体积的空白纳米粒、丹参酮ⅡA、不同剂量丹参酮ⅡA纳米粒。观察各组肿瘤抑制率及p38MAPK、TGFβ1、Cyclin E蛋白的表达。结果各给药组瘤体质量均较对照组显著缩小(P<0.01),且高剂量组肿瘤抑制率显著高于丹参酮ⅡA组及低剂量组(P<0.01);给药后各给药组p38MAPK、TGFβ1及Cyclin E阳性表达率均显著高于或低于对照组及空白载体组(P<0.01),各剂量丹参酮ⅡA纳米粒组与丹参酮ⅡA组差异显著(P<0.01),且随着剂量增加,表达水平呈现逐步升高或降低趋势,组间差异显著(P<0.01)。结论丹参酮ⅡA纳米粒较丹参酮ⅡA具有更显著的抗肿瘤功效,可能与上调p38MAPK蛋白表达,下调TGFβ1及Cyclin E蛋白表达有关。

代谢综合征大鼠肥胖特征及ERK1/2和p38MAPK的作用研究

目的探讨ERK1/2和p38MAPK在脂肪组织生长中的作用。方法Wistar雄性大鼠20只,随机均分为代谢综合征组和正常对照组,观察代谢综合征大鼠的代谢指标及体重、内脏脂肪含量、脂肪细胞大小和组织病理学改变,Westernblot法检测ERK1/2及p38MAPK蛋白在脂肪组织中的表达情况。结果代谢综合征大鼠血压、血浆游离脂肪酸、甘油三酯、空腹血糖及胰岛素均显著高于对照组(P<0·01),其体重、腹围、内脏脂肪含量、脂肪系数和各部位脂肪细胞大小亦比对照组显著增高(P<0·01),肝细胞存在脂肪变性。在棕色脂肪组织中ERK1/2蛋白的表达与对照组比较无显著性差异,皮下脂肪和内脏脂肪中ERK1/2蛋白的表达均显著高于对照组(P<0·01),而p38MAPK蛋白的表达在所有脂肪组织中均显著高于对照组(P<0·01)。结论代谢综合征大鼠肥胖特征为腹型肥胖,脂肪组织生长以肥大性增生为主,并存在脂质异位沉着(脂肪肝)。代谢综合征大鼠脂肪组织增生可能与ERK1/2和p38MAPK信号通路激活有关。

胰岛素联合硒抑制糖尿病心肌病大鼠p38MAPK/CBP通路减少心肌细胞凋亡

目的观察胰岛素联合硒对糖尿病心肌病大鼠p38丝裂原激活蛋白激酶/CREB结合蛋白(p38MAPK/CBP)通路的影响。方法 50只SD大鼠随机分为空白对照组、糖尿病心肌病组、糖尿病心肌病胰岛素治疗组、糖尿病心肌病硒治疗组、糖尿病心肌病胰岛素联合硒治疗组。流式细胞术检测细胞周期;末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法观察心肌细胞凋亡;Western blot法检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、cyclin E、Bax、Bcl-2、p38MAPK/磷酸化p38丝裂原激活蛋白激酶(p-p38MAPK)、CBP及Ku70的水平;免疫共沉淀法检测Ku70的乙酰化。结果胰岛素联合硒明显抑制心肌细胞凋亡,增加Bcl-2表达,降低Bax、cyclin D1、cyclin E、p38MAPK/p-p38MAPK、CBP、Ku70和乙酰化Ku70的表达水平。结论胰岛素联合硒通过抑制p38MAPK/CBP通路抑制心肌细胞凋亡。