【目的】观察髓核源性坐骨神经痛大鼠模型中背根神经节磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)表达的变化及其与炎性反应和机械痛敏的关系,以探讨腰椎间盘突出症的病理机制。【方法】选择成年SD雄性大鼠66只随机分为空白组(12只)、假...【目的】观察髓核源性坐骨神经痛大鼠模型中背根神经节磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)表达的变化及其与炎性反应和机械痛敏的关系,以探讨腰椎间盘突出症的病理机制。【方法】选择成年SD雄性大鼠66只随机分为空白组(12只)、假手术组(18只)和模型组(36只)。模型组在左腰5神经背根神经节(L5DRG)自体髓核移植以建立大鼠非压迫性腰椎间盘突出模型,假手术组自体肌肉移植。空白组不进行手术。测量各组大鼠术前至术后21 d的左后肢50%机械性撤足阈值(50%PWT)以测定机械痛敏的变化,空白组、假手术组术后7 d及模型组术后7、14、21 d各12只大鼠取左腰5DRG用免疫组化法测定环氧化酶-2(COX-2)与p-p38MAPK的阳性细胞比率。【结果】假手术组50%PWT术后无明显变化,模型组术后7 d出现明显的50%PWT下降损伤,术后14 d达最低值,术后21 d部分恢复;空白组、假手术组术后7 dDRG的COX-2和p-p38MAPK微弱表达,模型组术后7 d DRG的COX-2和p-p38MAPK高表达,模型组术后14 d DRG的COX-2和p-p38MAPK表达更高,模型组术后21 d DRG的COX-2和p-p38MAPK表达减弱。【结论】背根神经节的p-p38MAPK的表达与非压迫性髓核所致炎性反应和坐骨神经病理性神经痛的变化密切相关。展开更多
目的探讨背根神经节(DRG)神经元P2X3受体在神经病理痛(NP)大鼠疾病发生和进展中的作用,并分析其与磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)的相关性。方法60只大鼠采用体质量排序法随机分为假手术组、模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受...目的探讨背根神经节(DRG)神经元P2X3受体在神经病理痛(NP)大鼠疾病发生和进展中的作用,并分析其与磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)的相关性。方法60只大鼠采用体质量排序法随机分为假手术组、模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动剂组4组,每组各15只。采用坐骨神经缩窄性损伤法建立NP大鼠模型,假手术组仅分离坐骨神经不结扎。建模成功大鼠假手术组14只、模型组12只,分别鞘内注射20μL无菌生理盐水;P2X3受体拮抗剂组12只,鞘内注射10μL无菌生理盐水+10μL A-317491;P2X3受体激动剂组13只,鞘内注射10μL无菌生理盐水+10μL ATP。评估各组大鼠手术前后各时间点热刺激缩足反射潜伏期(PWTL)、机械缩足反射阈值(MWT);检测各组术后7、14 d DRG中P2X3受体、p-p38MAPK蛋白表达情况,并采用Pearson相关性系数法分析P2X3受体与p-p38MAPK的相关性。结果模型组术后患肢出现明显痛觉过敏体征,P2X3受体激动剂组更为严重,P2X3受体拮抗剂组有所改善。与假手术组比较,模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动剂组术后1 d PWTL较术前缩短,且术后1~14 d保持平稳(P<0.05);与模型组比较,术后1~14 d P2X3受体拮抗剂组PWTL均延长,P2X3受体激动剂组均缩短,但模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动组仍短于假手术组(P<0.05)。模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动剂组术后1 d开始MWT降低,且分别于术后14、7 d降至最低(P<0.05);与模型组比较,术后1~14 d P2X3受体拮抗剂组MWT均升高,P2X3受体激动剂MWT均降低,但模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动组仍低于假手术组(P<0.05)。与模型组比较,P2X3受体拮抗剂组术后7、14 d DRG中P2X3受体、p-p38MAPK蛋白相对表达量均降低,P2X3受体激动剂组均升高,但模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动组均高于假手术组(P<0.05)。经Pearson相关性分析,术后7、14 d DRG中P2X3受体相对表达量与p-p38MAPK蛋白相对表达量呈正相关(P<0.001)。结论DRG神经元P2X3受体激活参与促进NP大鼠疾病发生和进展,且P2X3受体激活可促进p38 MAPK磷酸化量增多。展开更多
目的:观察P38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)抑制剂SB203580对TNF-α诱导的原代培养大鼠小胶质细胞高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)表达的影响。方法:采用原代培养大鼠小...目的:观察P38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)抑制剂SB203580对TNF-α诱导的原代培养大鼠小胶质细胞高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)表达的影响。方法:采用原代培养大鼠小胶质细胞,设立对照组、TNF-α组(25 ng/m L)、TNF-α(25 ng/m L)+SB 203580组(10μmol/L)、SB203580组(10μmol/L),各组细胞经药物处理16 h后分别用ELISA法检测细胞培养上清中HMGB1的表达情况,Western印迹检测细胞HMGB1和磷酸化p38MAPK表达情况,用反转录PCR检测HMGB1 m RNA表达。结果:经TNF-α刺激后,大鼠小胶质细胞及其培养上清液中HMGB1蛋白表达增高;SB 203580可抑制TNF-α诱导的磷酸化p38 MAPK表达(P<0.01),同时下调HMGB1m RNA和HMGB1蛋白的表达。结论:TNF-α可诱导小胶质细胞晚期炎症因子HMGB1的表达,并且其诱导机制与p38 MAPK被快速激活相关。展开更多
文摘目的观察针刺对实验性自身免疫性脑脊髓炎(encephalomyelitis,EAE)小鼠神经系统损伤症状的改善程度和脊髓磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(phosphorylated P38 mitogen-activated protease,p-p38MAPK)及血清IL-1β的影响,初步探究针刺对多发性硬化(multiple sclerosis,MS)实验动物模型-EAE小鼠的治疗作用和机制。方法将40只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、模型+针刺组(针刺组)、模型+激素组(激素组),每组10只。除空白组外,其余各组小鼠采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白33-55(myelin oligodendrocyte glycoprotein 33-55,MOG 33-55 )与完全弗氏佐剂诱导建立EAE模型。各组自造模第14天开始,每日上午同一时间干预治疗。空白组和模型组每日抓取、固定,并用生理盐水[0.1 mL/(10 g·d)]灌胃;针刺组针刺小鼠“大椎”、双侧“足三里”“肾俞”穴15分钟;激素组用醋酸泼尼松龙(0.6 mg/mL)灌胃[0.1 mL/(10 g·d)]治疗;以上各组均连续干预治疗15天。从造模当天开始,隔日测量体质量和神经功能评分评价小鼠行为学变化;于免疫第28天对各组小鼠进行眼球采血并留取脊髓组织,采用LFB染色技术检测小鼠脊髓脱髓鞘损伤程度;分别采用酶联免疫吸附法和蛋白质免疫印迹法检测小鼠血清IL-1β的含量及脊髓组织p-p38MAPK蛋白表达。结果针刺组和激素组小鼠体质量明显增加,神经功能评分明显降低,与模型组比较差异有统计学意义( P <0.05);与模型组相比,针刺组及激素组小鼠脊髓脱髓鞘程度明显减轻;免疫第28天时,模型组小鼠血清IL-1β表达与空白组相比水平升高( P <0.05);针刺组与激素组小鼠血清IL-1β水平与模型组相比均降低( P <0.05);模型组小鼠脊髓p-p38MAPK蛋白表达水平比空白组表达水平升高( P <0.05);而针刺组与激素组小鼠脊髓p-p38MAPK蛋白水平与模型组相比均降低( P <0.05)。结论针刺可以明显改善EAE小鼠神经系统损伤症状,降低EAE小鼠的神经功能评分;针刺缓解EAE模型小鼠神经系统损伤症状的机制可能与其能抑制EAE小鼠脊髓p38MAPK蛋白激活及其能降低小鼠血清IL-1β的表达水平有关。
文摘【目的】观察髓核源性坐骨神经痛大鼠模型中背根神经节磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)表达的变化及其与炎性反应和机械痛敏的关系,以探讨腰椎间盘突出症的病理机制。【方法】选择成年SD雄性大鼠66只随机分为空白组(12只)、假手术组(18只)和模型组(36只)。模型组在左腰5神经背根神经节(L5DRG)自体髓核移植以建立大鼠非压迫性腰椎间盘突出模型,假手术组自体肌肉移植。空白组不进行手术。测量各组大鼠术前至术后21 d的左后肢50%机械性撤足阈值(50%PWT)以测定机械痛敏的变化,空白组、假手术组术后7 d及模型组术后7、14、21 d各12只大鼠取左腰5DRG用免疫组化法测定环氧化酶-2(COX-2)与p-p38MAPK的阳性细胞比率。【结果】假手术组50%PWT术后无明显变化,模型组术后7 d出现明显的50%PWT下降损伤,术后14 d达最低值,术后21 d部分恢复;空白组、假手术组术后7 dDRG的COX-2和p-p38MAPK微弱表达,模型组术后7 d DRG的COX-2和p-p38MAPK高表达,模型组术后14 d DRG的COX-2和p-p38MAPK表达更高,模型组术后21 d DRG的COX-2和p-p38MAPK表达减弱。【结论】背根神经节的p-p38MAPK的表达与非压迫性髓核所致炎性反应和坐骨神经病理性神经痛的变化密切相关。
文摘目的探讨背根神经节(DRG)神经元P2X3受体在神经病理痛(NP)大鼠疾病发生和进展中的作用,并分析其与磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)的相关性。方法60只大鼠采用体质量排序法随机分为假手术组、模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动剂组4组,每组各15只。采用坐骨神经缩窄性损伤法建立NP大鼠模型,假手术组仅分离坐骨神经不结扎。建模成功大鼠假手术组14只、模型组12只,分别鞘内注射20μL无菌生理盐水;P2X3受体拮抗剂组12只,鞘内注射10μL无菌生理盐水+10μL A-317491;P2X3受体激动剂组13只,鞘内注射10μL无菌生理盐水+10μL ATP。评估各组大鼠手术前后各时间点热刺激缩足反射潜伏期(PWTL)、机械缩足反射阈值(MWT);检测各组术后7、14 d DRG中P2X3受体、p-p38MAPK蛋白表达情况,并采用Pearson相关性系数法分析P2X3受体与p-p38MAPK的相关性。结果模型组术后患肢出现明显痛觉过敏体征,P2X3受体激动剂组更为严重,P2X3受体拮抗剂组有所改善。与假手术组比较,模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动剂组术后1 d PWTL较术前缩短,且术后1~14 d保持平稳(P<0.05);与模型组比较,术后1~14 d P2X3受体拮抗剂组PWTL均延长,P2X3受体激动剂组均缩短,但模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动组仍短于假手术组(P<0.05)。模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动剂组术后1 d开始MWT降低,且分别于术后14、7 d降至最低(P<0.05);与模型组比较,术后1~14 d P2X3受体拮抗剂组MWT均升高,P2X3受体激动剂MWT均降低,但模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动组仍低于假手术组(P<0.05)。与模型组比较,P2X3受体拮抗剂组术后7、14 d DRG中P2X3受体、p-p38MAPK蛋白相对表达量均降低,P2X3受体激动剂组均升高,但模型组、P2X3受体拮抗剂组、P2X3受体激动组均高于假手术组(P<0.05)。经Pearson相关性分析,术后7、14 d DRG中P2X3受体相对表达量与p-p38MAPK蛋白相对表达量呈正相关(P<0.001)。结论DRG神经元P2X3受体激活参与促进NP大鼠疾病发生和进展,且P2X3受体激活可促进p38 MAPK磷酸化量增多。
