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p40基因酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用的检测
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作者 苏成芝 邓艳春 +2 位作者 张晓光 药立波 刘新平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期186-187,共2页
关键词 酵母双杂交 载体构建 p40基因 自激活应用
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棉铃虫核型多角体病毒p40基因序列分析
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作者 武家才 张传溪 《中国病毒学》 CSCD 2001年第3期242-245,共4页
克隆了棉铃虫 (Helicoverpaarmigera)单粒包埋型核型多角体病毒 (HaSNPV)基因组HindⅢ H、J片段 ,其长度分别为 10kb和 6 .7kb。通过对克隆片段末端测序 ,得到HaSNPVp40基因全序列。p40基因编码区全长 96 6bp ,预计可编码 36 .kD的多肽... 克隆了棉铃虫 (Helicoverpaarmigera)单粒包埋型核型多角体病毒 (HaSNPV)基因组HindⅢ H、J片段 ,其长度分别为 10kb和 6 .7kb。通过对克隆片段末端测序 ,得到HaSNPVp40基因全序列。p40基因编码区全长 96 6bp ,预计可编码 36 .kD的多肽。HaSNPVp40基因核苷酸序列与HzSNPVp40基因有 98%的相同性。这两种基因与BmNPVp40(GenBank -L33180 )和AcMNPVgp41(GenBank -L2 2 85 8)的氨基酸序列相似性 43%左右 ,但四种蛋白对应于HzSNPVp40、HaSNPVp40的 2 8~ 2 77氨基酸区域 ,同源性高达 6 2 % ,并且存在一个保守的亲水性结构域。进一步将在基因组中相邻的HindⅢ -H、J两片段用BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ、PstⅠ四种限制性内切酶进行了分析。 展开更多
关键词 棉铃虫 核型多角体病毒 p40基因序列 限制性内切酶图谱
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烫伤对小鼠腹腔巨噬细胞LPS/Toll信号通路的影响——c-fos基因表达、AP-1和NF-кB的DNA结合活性及IL-12 p40基因表达的抑制 被引量:1
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作者 王兴宇 张劲松 +3 位作者 苏踊跃 李昌麟 冯卫国 张宗梁 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2002年第3期256-263,共8页
烫伤能够引起机体免疫系统功能的抑制,其机制目前还不很清楚.巨噬细胞在机体防御系统的调节中居重要地位,因此研究烫伤对巨噬细胞的效应就显得非常必要.转录因子AP-1和NF-кB是Toll样受体介导的信号通路中的重要成员,对于多种参与免疫... 烫伤能够引起机体免疫系统功能的抑制,其机制目前还不很清楚.巨噬细胞在机体防御系统的调节中居重要地位,因此研究烫伤对巨噬细胞的效应就显得非常必要.转录因子AP-1和NF-кB是Toll样受体介导的信号通路中的重要成员,对于多种参与免疫反应的基因尤其是细胞因子基因的诱导表达必不可少[1].应用小鼠烫伤模型,研究了烫伤对于上述两个重要转录因子的效应.发现烫伤后,小鼠腹腔巨噬细胞中LPS介导的c-fos基因表达,AP-1和NF-кB的DNA结合活性及IL-12p40基因表达均被显著地抑制.这一结果提示,巨噬细胞Toll信号通路的变化与烫伤引起的机体免疫功能紊乱密切相关. 展开更多
关键词 烫伤 小鼠 腹腔巨噬细胞 LpS/Toll 信号通路 C-FOS基因 Ap-1 NF-κB IL-12p40基因
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含人IL-12基因的重组质粒p2Bac-hIL-12p35p40的构建
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作者 陆宇新 高志昕 张学光 《苏州医学院学报》 1998年第10期1021-1023,共3页
用PCR技术克隆hIL-12p35和p40两个亚基的cDNA,经酶切反应和琼脂电泳,获得的p35和p40基因的大小分别为0.77kb和1.1kb。SK+质粒酶切后和p35、p40片段分别进行连接.形成SK+-p35和SK+-p40重组质粒。再经酶切反应.p35、p40片段先后连接... 用PCR技术克隆hIL-12p35和p40两个亚基的cDNA,经酶切反应和琼脂电泳,获得的p35和p40基因的大小分别为0.77kb和1.1kb。SK+质粒酶切后和p35、p40片段分别进行连接.形成SK+-p35和SK+-p40重组质粒。再经酶切反应.p35、p40片段先后连接至p2Bac质粒中,形成同时含有hIL-12两个亚基基因的重组质粒p2Bac-hIL-12p35p40。SK+-p35和SK+-p40作为模板,进行p35、p40重组基因的测序,其结果与文献报道一致。 展开更多
关键词 HIL-2 p2Bac 质粒 p35基因 p40基因
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新孢子虫表面抗原P40基因的克隆及原核表达 被引量:3
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作者 杨滨僮 赵权 +7 位作者 贺鹏飞 常乐 宫鹏涛 李建华 杨举 李赫 张国才 张西臣 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第6期789-792,共4页
目的克隆并原核表达新孢子虫表面抗原P40基因。方法 PCR扩增新孢子虫表面抗原P40基因,克隆至原核表达载体pET-28a中,构建重组原核表达质粒pET-28a-P40,转化入大肠埃希菌Rosseta(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物... 目的克隆并原核表达新孢子虫表面抗原P40基因。方法 PCR扩增新孢子虫表面抗原P40基因,克隆至原核表达载体pET-28a中,构建重组原核表达质粒pET-28a-P40,转化入大肠埃希菌Rosseta(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。结果重组原核表达质粒pET-28a-P40经PCR及双酶切鉴定构建正确;表达的重组P40蛋白相对分子质量约为40 000,有效识别鼠抗新孢子虫阳性血清。结论成功在Rosseta(DE3)中表达了新孢子虫表面抗原P40基因,为新孢子虫病疫苗的研制及血清学检测方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 新孢子虫 p40基因 原核细胞 基因表达
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Association of interleukin-12 p40 gene 3'-untranslated region polymorphism and outcome of HCV infection 被引量:7
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作者 Li-MinYin Wan-FuZhu LaiWei Xiao-YuanXu De-GuiSun Yan-BinWang Wen-MeiFan MinYu Xiu-LanTian Qi-xinwang YanGao HuiZhuang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2004年第16期2330-2333,共4页
AIM: To investigate the effect of interleukin-12 p40 gene (IL12E 3'-untranslated region polymorphism on the outcome of HCV infection.METHODS: A total of 133 patients who had been infected with HCV for 12-25 (18.2... AIM: To investigate the effect of interleukin-12 p40 gene (IL12E 3'-untranslated region polymorphism on the outcome of HCV infection.METHODS: A total of 133 patients who had been infected with HCV for 12-25 (18.2±3.8) years, were enrolled in this study. Liver biochemical tests were performed with an automated analyzer and HCV RNA was detected by fluorogenic quantitative polymerase chain reaction. B-mode ultrasound was used for liver examination. Polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) was used for the detection of IL12B (1188A/C) polymorphism.RESULTS: Self-limited infection was associated with AC genotype (OR = 3.48; P = 0.001) and persistent infection was associated with AA genotype (OR = 0.34; P = 0.014)at site 1188 of IL12B. In patients with persistent HCV infection, no significant differences were found regarding the age, gender, duration of infection and biochemical characteristics (P>0.05). According to B-mode ultrasound imaging and clinical diagnosis, patients with persistent infection were divided into groups based on the severity of infection. No significant differences were found in the frequency of IL-12 genotype (1188A/C) between different groups (P>0.05).CONCLUSION: The polymorphism of II12B (1188A/C)appears to have some influence on the outcome of HCV infection. 展开更多
关键词 白细胞间介素-12 p40基因 3'-未翻译 基因多态性 HCV 传染病 流行病 丙型肝炎
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绵羊肺炎支原体Y98 P26-P40融合基因的表达及免疫原性 被引量:2
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作者 刘文青 范琼瑛 +2 位作者 赵红艳 车腾飞 赵宝华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1552-1558,共7页
根据猪肺炎支原体(Mycoplasma Hyopneumoniae,Mhp)外膜蛋白P30基因和P46基因序列设计引物,通过PCR克隆了绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)标准株Y98膜蛋白P26基因和P40基因片段。通过对该序列的同源性分析表明MO P26基因与M... 根据猪肺炎支原体(Mycoplasma Hyopneumoniae,Mhp)外膜蛋白P30基因和P46基因序列设计引物,通过PCR克隆了绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)标准株Y98膜蛋白P26基因和P40基因片段。通过对该序列的同源性分析表明MO P26基因与Mhp P30基因核酸序列同源性为79%,MO P40基因与Mhp P46基因核酸序列同源性为74%。分别将MO P26基因、MO P40基因以及P26-P40融合基因与原核表达载体pET28a连接构建了表达质粒pET28a-P26,pET28a-P40,pET28a-P26-P40,并转化受体菌BL21(DE3)得到重组菌株BL21(DE3)(pET28a-P26),BL21(DE3)(pET28a-P40),BL21(DE3)(pET28a-P26-P40)。经IPTG诱导后SDS-PAGE表明有26 000,40 000和66 000左右的目的条带出现;Western blotting表明表达的目的蛋白具有良好的反应原性;小鼠免疫试验表明重组菌株BL21(DE3)(pET28a-P26),BL21(DE3)(pET28a-P40),BL21(DE3)(pET28a-P26-P40)表达的蛋白对小鼠的保护率分别为90%,90%和100%;重组菌株BL21(DE3)(pET28a-P26-P40)表达的蛋白对绵羊的保护率为85%。本试验结果为研制绵羊肺炎支原体基因工程疫苗奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体Y98 p26 p40融合基因 基因表达 免疫原性
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博尔纳病毒感染与精神分裂症的相关研究
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作者 姚能云 佘艳梅 +5 位作者 周红勤 赵锋 唐普照 刘丽桃 李海军 肖波 《中华精神科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期347-351,共5页
目的 探讨博尔纳病毒(Borna disease virus,BDV)感染与精神分裂症的相关性,分析感染BDV的精神分裂症患者临床特征.方法 采用荧光定量巢式逆转录聚合酶链式反应方法检测86例精神分裂症患者(患者组)和84名健康体检者(对照组)外周血... 目的 探讨博尔纳病毒(Borna disease virus,BDV)感染与精神分裂症的相关性,分析感染BDV的精神分裂症患者临床特征.方法 采用荧光定量巢式逆转录聚合酶链式反应方法检测86例精神分裂症患者(患者组)和84名健康体检者(对照组)外周血单个核细胞中BDVp24和BDVp40基因片段,以β-肌动蛋白作为内参照,将BDVp24和BDVp40基因片段均为阳性的标本基因进行测序分析,外周血进行抗BDV抗体滴度测定,对患者的精神症状采用PANSS进行量化评分,并总结阳性患者的临床特征.结果 86例精神分裂症患者中外周血标本BDV p24基因片段阳性检出率11.6% (10/86),BDVp40基因片段检出率13.4% (12/86),拷贝数均>10^2 kb/μl.对照组检测BDVp24、BDVp40基因片段均为阴性,两组阳性率比较差异有统计学意义(x^2=9.26,P<0.05).对BDV p24和BDVp40基因片段均为阳性的标本测序后,与马源的BDV病毒株亲缘关系最近.阳性标本的精神分裂症患者精神症状主要以幻觉、妄想等阳性症状为主,PANSS量表评分均>40分.结论 精神分裂症发病与BDV感染有一定的相关性,是否是唯一的相关性还有待进一步研究,BDV感染的精神分裂症患者主要以阳性精神症状为主. 展开更多
关键词 精神分裂症 BORNA病病毒 p40基因片段 p24基因片段
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