氯胺酮抑制人离体中性粒细胞释放超氧阴离子的机制

目的研究氯胺酮的异构体S(+)氯胺酮[S(+)-Ket]和R(-)氯胺酮[R(-)-Ket]对中性粒细胞释放超氧阴离子的影响及机制。方法细胞色素C还原法测定3种刺激剂介导的中性粒细胞超氧阴离子释放量。用荧光分光法检测中性粒细胞内钙的水平。用Western Blot法检测中性粒细胞蛋白质p47phox磷酸化水平。结果S(+)-Ket和R(-)-Ket可抑制N-甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸(N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine,fMLP)介导的中性粒细胞释放超氧阴离子(P<0.01)。S(+)-Ket可抑制佛波豆蔻醚乙酸盐(phorbol12-myristate13-acetate,PMA)介导的中性粒细胞释放超氧阴离子和钙离子的增加,而R(-)-Ket可轻度增加PMA介导的中性粒细胞释放超氧阴离子和促进钙离子的增加。S(+)-Ket抑制PMA介导中性粒细胞蛋白质p47phox磷酸化,而R(-)-Ket增强上述作用;钙螯合剂EGTA可取消R(-)-Ket对PMA介导中性粒细胞蛋白质p47phox磷酸化的抑制作用。结论S(+)-Ket通过PKC-钙信息通道,抑制NADPH氧化酶p47phox,抑制超氧阴离子的产生。