CD137信号调控P53/P21通路对血管平滑肌细胞衰老的机制研究

目的探讨CD137信号调控P53/P21通路对血管平滑肌细胞(VSMC)衰老的机制。方法选择8周龄雄性C57BL/6J小鼠30只,随机分为年轻组(8周龄)和衰老组(80周龄),每组15只。饲养对应时间后处死小鼠并分离血浆及主动脉血管。细胞实验中将正常VSMC分为空白对照组、博来霉素(BLM)组、联合激动剂组和联合抑制剂组。采用细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒染色检测VSMC衰老水平。Western blot和聚合酶链反应检测组织及细胞中衰老相关蛋白,酶联免疫吸附测定衰老相关炎性因子表达。结果衰老组小鼠主动脉中CD137、组蛋白h2ax(γ-H2AX)表达明显高于年轻组,增殖细胞核抗原(PCNA)表达明显低于年轻组(P<0.05)。衰老组小鼠血浆CD137水平明显高于年轻组[(154.0±4.1)pg/ml vs(98.0±2.3)pg/ml,P<0.05]。与空白对照组比较,BLM组衰老VSMC明显增加(P<0.05);与BLM组比较,联合激动剂组衰老VSMC明显增加(P<0.05);与联合激动剂组比较,联合抑制剂组衰老VSMC明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,BLM组肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β水平明显增高(P<0.05);与BLM组比较,联合激动剂组TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显增加(P<0.05);与联合激动剂组比较,联合抑制剂组TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,BLM组、联合激动剂组和联合抑制剂组B淋巴细胞瘤2基因、γ-H2AX、P53和P21表达明显增加,PCNA表达明显减少(P<0.05);与BLM组比较,联合激动剂组P53和P21表达明显增加(P<0.05);与联合激动剂组比较,联合抑制剂组P53表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CD137信号调控P53/P21通路促进VSMC衰老。

大黄素调控P53/P21通路对H_(2)O_(2)诱导损伤HUVEC的保护作用

目的研究大黄素对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导损伤的血管内皮细胞(HUVEC)保护作用及作用机制。方法MTT法筛选H_(2)O_(2)造模浓度及大黄素给药浓度。取HUVEC细胞,分为正常对照组、H_(2)O_(2)模型组(终浓度100μmol/L H_(2)O_(2))和大黄素4个不同剂量(终浓度15.0、7.5、5.0、2.5μmol/L)组,置于37℃、5%CO_(2)培养箱中培养24 h。电镜和荧光显微镜观察细胞形态和结构,Hoechst法观察细胞凋亡,化学法检测各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)含量;Western印迹检测各组细胞中P53、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3和P21蛋白的表达。结果与正常对照组比较,模型组HUVEC细胞增殖活力显著下降;细胞形态与结构改变;SOD、NO、NOS含量显著降低;P53、caspase-3和P21蛋白表达显著提高;经不同剂量大黄素干预后,能明显改善和拮抗H_(2)O_(2)对HUVEC的氧化损伤。结论大黄素对H_(2)O_(2)诱导的HUVEC氧化损伤具有显著保护作用,其作用机制可能是调控P53/P21/caspase-3通路、抑制HUVEC氧化损伤和细胞凋亡。

p53/p21通路与细胞周期阻滞在急性肾损伤中的研究进展

急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)是住院患者最常见的急危重症之一,可导致肾功能急剧下降。DNA损伤存在于AKI早期,细胞对DNA损伤的主要反应之一是细胞周期阻滞,其中肿瘤蛋白p53在此过程中发挥重要作用。本文旨在综述AKI过程中细胞周期阻滞和p53/p21信号通路的作用,明确细胞周期阻滞的内在保护作用以及进一步了解p53/p21信号通路和细胞周期阻滞的机制和功能,将有助于制定治疗AKI的策略。

P53/P21通路在电针抑制骨质疏松大鼠模型成骨细胞衰老中的机制

目的探讨电针对老年大鼠骨质疏松及衰老细胞通路P53/P21的影响。方法27月龄雄性大鼠随机分为老年组和电针治疗组(n=8),电针治疗组接受电针干预(每周5次,共8周),6月龄雄性大鼠设为青年组。8周后处死大鼠,ELISA检测血清Ⅰ型胶原C末端肽(CTX-I)、Ⅰ型胶原羧基端前肽(PICP)水平;Micro-CT扫描骨组织;检测P53、P21等mRNA及蛋白表达水平。结果老年组CTX-I较青年组增加,PICP较青年组降低(P<0.01);电针可降低老年大鼠CTX-I,增高PICP(P<0.01);Micro-CT显示相对青年组,老年组大鼠骨小梁分布紊乱、稀疏,BMD、BV/TV、Tb.N等下降(P<0.01),Tb.Sp增高(P<0.01)。电针可改善骨小梁紊乱分布,增加BMD、BV/TV、Tb.N(P<0.05),降低Tb.Sp(P<0.01)。相对于青年组,老年组大鼠P53、P21 mRNA及蛋白表达量增高(P<0.01)。电针能下调老年大鼠P53、P21 mRNA及蛋白表达量(P<0.01)。结论电针可能通过抑制P53/P21信号通路来缓解成骨细胞衰老、增加成骨细胞活性,并以此来促进骨形成,改善骨质疏松。

淫羊藿苷对D-半乳糖诱导的脑衰老模型小鼠p53/p21信号通路的影响

目的:观察淫羊藿苷对脑衰老模型小鼠p53/p21信号通路的影响,并探讨淫羊藿苷抗衰老的可能机制。方法:将实验小鼠随机分为空白组、模型组、淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组,除空白组外,其他各组通过D-半乳糖诱导建立脑衰老模型。淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组灌胃淫羊藿苷药液,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水。用Morris水迷宫评价各组小鼠的学习记忆能力;用ELISA检测各组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST、MDA的表达。用Real time-PCR和免疫组化检测各组小鼠海马中p53和p21的表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠上平台潜伏期、游泳总路程和第1次抵原平台时间都明显增加(P<0.01),而小鼠穿越平台次数和目标象限时间则明显较少(P<0.01)。与模型组相比,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠上平台潜伏期、游泳总路程和第1次抵原平台时间均有所较少(P<0.01,P<0.05),而小鼠越平台次数和目标象限时间有所增加(P<0.01,P<0.05)。与空白组比较,模型组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST明显降低(P<0.01),而MDA明显升高(P<0.01);与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST均有不同程度升高(P<0.01,P<0.05),而MDA则有所降低(P<0.01)。与空白组比较,模型组小鼠海马中p53、p21 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01)。与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠海马中p53、p21 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.01,P<0.05)。结论:淫羊藿苷具有延缓衰老作用,其机制可能与其抑制衰老信号通路p53/p21有关。

麦味养肺汤通过调控p53/p21信号通路抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞衰老抗肺纤维化的作用机制研究

目的探讨麦味养肺汤(麦冬、五味子、党参等)通过调控p53/p21信号通路抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)衰老抗肺纤维化的作用机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、麦味养肺汤组(60 g·kg^(-1)·d^(-1))和阳性对照组(吡非尼酮,0.3 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组6只。采用气管滴注博来霉素(5 mg·kg-1)复制肺纤维化小鼠模型;造模后次日开始灌胃给药,每日1次,连续给药21 d。检测并记录小鼠肺顺应性与肺阻力的变化;活体micro-CT成像法检测小鼠肺组织纤维化程度;采用HE、Masson染色法观察、评估肺组织炎症和纤维化程度;免疫组织化学法测定肺组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原的表达;β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法测定肺组织细胞衰老情况;ELISA法测定肺组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量;Western Blot法测定肺组织中Fibronectin、Vimentin、α-SMA、p53、p21、p16、SP-C蛋白表达;免疫荧光法检测小鼠肺组织中p21、p16及SP-C的表达。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量显著下降(P<0.01),肺组织中炎症及纤维化评分均显著升高(P<0.01);肺顺应性显著下降(P<0.01),肺阻力显著增加(P<0.01);肺组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原沉积量及Hyp含量显著增加(P<0.01);肺组织中Fibronectin、Vimentin、α-SMA蛋白表达显著上调(P<0.01);肺组织呈大面积SA-β-gal蓝染,细胞衰老程度明显,肺组织中p53、p21、p16等衰老相关蛋白表达显著上调(P<0.01);肺组织中p21、p16的红色荧光表达明显增强,Merge图像显示p21、p16与SP-C共染的橙色荧光明显增多,SP-C蛋白表达显著下调(P<0.01)。与模型组比较,麦味养肺汤组小鼠的体质量明显升高(P<0.05),肺组织中炎症及纤维化评分均明显降低(P<0.05,P<0.01);肺顺应性明显上升(P<0.05),肺阻力显著下降(P<0.01);肺组织中Ⅰ/Ⅲ型胶原沉积量及Hyp含量显著减少(P<0.01);肺组织中Fibronectin、Vimentin、α-SMA蛋白表达明显下调(P<0.05);肺组织SA-β-gal蓝染明显减轻,细胞衰老程度得到明显改善,肺组织中p53、p21、p16蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01);肺组织中p21与p16的红色荧光表达明显下调,Merge图像显示p21、p16与SP-C共染的橙色荧光明显减少,SP-C蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论麦味养肺汤能够减轻博来霉素诱导肺纤维化小鼠的肺组织炎症反应,改善胶原沉积,促进肺功能,可能与调控p53/p21信号通路抑制AECⅡ衰老有关。

Nrf2与p53/p21信号通路在肿瘤中作用的研究进展

氧化应激普遍存在于肿瘤发生和发展的病理过程中。转录因子红细胞系-2p45相关因子-2(NF-E2 p45-related factor 2,Nrf2)信号通路是人体内重要的抗氧化机制,其产物保护机体的细胞免受毒性和氧化性损伤,对癌症的治疗具有重要的价值。肿瘤抑制基因p53能显著促进细胞周期调控因子p21转录活性,p53/p21信号通路是控制细胞周期进程以及调节肿瘤细胞凋亡的核心调控途径。然而,目前有关Nrf2和p53/p21信号通路在肿瘤中的相互调控机制尚未完全阐明。本文将从Nrf2信号通路的组成,p53/p21信号通路的结构与功能,Nrf2信号通路与p53/p21信号通路相互调控对肿瘤的作用关系以及相关抗肿瘤药物的研究进展等方面进行阐述。

头花蓼对幽门螺杆菌相关性胃炎大鼠胃组织SIRT1、p53和p21的影响

目的:观察头花蓼对幽门螺杆菌相关性胃炎(HAG)的治疗效果及对HAG胃组织中SIRT1/p53/p21信号通路的影响。方法:30只SD大鼠均分为正常对照组、模型组和药物组,正常对照组给予无菌脑心浸液肉汤灌胃,模型组和药物组大鼠给予H.pylori灌胃(1×1011CFU/L SS2000菌液1.5 m L/只)建立HAG模型,药物组HAG模型大鼠给予1.58 mg/(kg·d)头花蓼灌胃治疗,正常对照组大鼠和模型组大鼠给予等量无菌生理盐水灌胃,连续给药14 d;治疗结束4周时检测大鼠胃组织H.pylori定植量、观察各组大鼠胃黏膜组织学改变,采用Real time PCR和Western blot技术检测大鼠胃组织SIRT1、p53及p21 mRNA及蛋白表达水平。结果:正常对照组大鼠胃组织H.pylori定植量为0,模型组和药物组大鼠胃黏膜均有H.pylori定植,与模型组比较,药物组H.pylori定植量显著降低(P<0.05);正常对照组大鼠胃组织无病理形态学改变,模型组大鼠H.pylori感染后的胃黏膜腺体排列不规则,胃黏膜固有层中有较多淋巴细胞浸润,细胞浸润多呈弥漫性;药物组大鼠胃组织病理形态学改变少于模型组;与正常对照组比较,模型组病理评分显著升高,而药物组病理评分显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);H.pylori感染后,与正常对照组相比,模型组大鼠胃组织SIRT1、p53基p21 mRNA表达量增加(P<0.05);头花蓼治疗后,与模型组相比,药物组大鼠胃组织SIRT1、p53及p21 mRNA水平都明显升高(P<0.05);与正常对照组相比,模型组大鼠胃组织SIRT1、p53及p21蛋白表达均有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05);而头花蓼治疗后,与模型组相比,SIRT1、p53和p21蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:头花蓼治疗可能是通过上调SIRT1、p53和p21基因表达来发挥作用。

迷迭香酸调节p53/p21信号通路诱导非小细胞肺癌凋亡的体外研究

目的:探讨迷迭香酸(RA)对肺癌95D和A549细胞的凋亡作用及其作用机制。方法:CCK-8检测RA(25、50、100、200、300、400μmol/L)对95D和A549细胞不同时间(42、72 h)的细胞增殖作用;碘化丙啶(PI)单染法检测RA(150、200、250μmol/L)对95D和A549细胞周期的影响;异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)凋亡试剂盒检测RA(150、200、250μmol/L)对95D和A549细胞凋亡的影响;Western Blot检测RA(150、200、250μmol/L)对95D和A549细胞中p53和p21蛋白水平的影响。结果:95D和A549细胞随着RA给药剂量增加细胞存活率逐渐降低;RA各剂量组95D和A549细胞较空白对照组细胞阻滞在G1/G0期(P<0.05,P<0.01);RA高剂量组95D早凋亡细胞和A549中早、晚凋亡细胞凋亡量较空白对照组显著升高(P<0.01);与空白对照组比较,RA各剂量组95D和A549细胞中p53和p21蛋白表达水平升高。结论:RA可以抑制95D和A549细胞的增殖,周期阻滞G1/G0期,进而诱导细胞凋亡,其机制可能与调节p53/p21信号通路有关。

灵芝miRNA对人皮肤成纤维细胞衰老的作用研究

为探究灵芝中miRNA对细胞衰老的干预作用及影响,利用过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导人皮肤成纤维细胞(Human skin fibroblasts,HSF)构建了细胞衰老模型,将灵芝特有的miRNA Glu-miR-01和Glu-miR-03转染HSF衰老细胞,分析细胞衰老相关氧化应激指标,并通过Western blotting检测衰老相关蛋白表达水平的变化。结果显示:构建HSF细胞衰老模型的最适条件为H_(2)O_(2)浓度0.8mmol/L,诱导时间3h;Glu-miR-01和Glu-miR-03均能促使衰老细胞中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)和总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)水平上升,丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量下降,细胞衰老相关β-半乳糖苷酶(Senescence associated-β-Galactosidase,SA-β-gal)染色阳性率降低,线粒体膜电位升高;衰老信号通路中P53、P21和P16蛋白的表达显著降低,Rb蛋白表达显著升高。该结果表明灵芝中Glu-miR-01和Glu-miR-03对HSF衰老细胞具有保护作用,并对衰老相关的p53/p21/Rb信号通路具有调控作用,为阐明灵芝miRNA对细胞衰老的分子作用机制提供了理论依据。

氯沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导人肾小球系膜细胞衰老作用机制的研究

目的探讨氯沙坦对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人肾小球系膜细胞(HMCs)衰老的作用及其可能机制。方法将HMCs随机分为对照组、AngⅡ组和氯沙坦干预组。衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色鉴别细胞衰老变化,流式细胞术分析细胞周期及3组细胞中活性氧(ROS)水平的变化,并采用蛋白免疫印迹法对p53、p21蛋白的表达情况进行检测。结果 AngⅡ可以诱导HMCs衰老,氯沙坦干预后,SA-β-gal染色阳性细胞百分率、G0/G1期细胞比例、ROS水平及p53、p21蛋白表达水平均低于AngⅡ组(P<0.05)。结论 p53/p21信号通路参与调控AngⅡ诱导的HMCs衰老过程,氯沙坦可能通过改变该通路的表达,减轻氧化应激而发挥其抗衰老的作用。

β-甘露聚糖酶部分水解香豆胶对自然衰老小鼠的抗衰老作用

目的:研究部分水解香豆胶对自然衰老小鼠的抗衰老作用及其作用机理。方法:采用β-甘露聚糖酶水解香豆胶制备的部分水解香豆胶饮食干预自然衰老小鼠12个月,观察小鼠大脑、肝脏、肾和结肠组织病理形态学变化并测定其血清中衰老标志物及总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)水平和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平,同时检测神经元数量、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及p53/p21/p16信号通路相关基因和蛋白的表达情况。结果:部分水解香豆胶能够有效提高衰老小鼠的存活率(约25.0%),明显改善其反应性、脱毛程度;T-AOC、CAT活力和GSH-Px活力较自然衰老组小鼠分别增加78.1%(P<0.05)、122.9%(P<0.05)和2.7%,而MDA浓度降低40.3%(P<0.01);增加大脑海马CA1区中神经元和BDNF阳性细胞数量,抑制肝脏p53/p21/p16信号通路中p53、p21和p16基因和p53、p16蛋白的表达。结论:部分水解香豆胶具有显著抗小鼠衰老的作用,能够抑制由衰老诱发的氧化应激和脑损伤,具有作为抗衰老功能性食品配料的潜力。

银杏叶提取物对叔丁基过氧化氢损伤人脐带间充质干细胞的干预作用

【目的】观察银杏叶提取物EGb761对叔丁基过氧化氢（t-BHP）诱导人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）损伤的干预作用。【方法】取原代培养的hUC-MSCs，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖，确定建立氧化应激损伤细胞模型所需的t-BHP浓度以及EGb761的最适作用浓度；采用Annexin V异硫氰酸荧光素/碘化丙啶（FITC/PI）双染流式细胞术测定100 mg/L EGb761对100μmol/L t-BHP所致hUC-MSCs凋亡的影响，同时检测脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化，并采用实时荧光定量PCR观察p53和p21Cip1/Waf1表达水平的改变。【结果】用10～200 mg/L的EGb761预处理3 h可降低hUC-MSCs对100μmol/L t-BHP所致细胞增殖抑制的敏感性，浓度超过100 mg/L后EGb761对hUC-MSCs的保护效果无明显提高；100 mg/L EGb761可显著抑制100μmol/L t-BHP作用6 h后对hUC-MSCs凋亡及其胞内MDA的诱导作用，保持hUC-MSCs内的SOD活性，并显著降低t-BHP损伤的hUC-MSCs内p53和p21Cip1/Waf1的表达。【结论】 EGb761具有保护被氧化应激损伤的hUC-MSCs的作用，其机制可能与p53/p21信号通路的下调有关。

左归丸联合西曲瑞克调节卵巢储备功能作用研究

探讨补肾养阴方药左归丸联合促性腺激素释放激素拮抗剂西曲瑞克调节SIRT1/P53/P21对卵巢储备功能下降(decreasing ovarian reserve,DOR)小鼠卵巢局部氧化应激反应的影响。所有动物实验均在暨南大学实验动物管理委员会的指导和标准下进行。以环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)诱导的DOR小鼠为实验对象,分别灌胃给予左归丸、西曲瑞克及两药联合治疗。治疗结束后,观察小鼠动情周期变化、血清性激素水平、氧化应激相关指标、生长生化因子水平及SIRT1/P53/P21的表达情况。结果显示,与模型组比较,左归丸和联合用药组可明显延长动情期、缩短动情间期,联合用药组更可明显缩短周期长度;与模型组比较,各治疗组性激素相关指标检测均出现卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)下降、雌二醇(estradiol,E)增高,氧化应激指标一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)、一氧化氮(nitric oxide,NO)及活性氧(reactive oxygen species,ROS)下降,生长生化因子指标脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)及生长分化因子9(growth differentiaction factor 9,GDF-9)浓度均明显上升,白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)在各治疗组与模型组差异不显著;SIRT1/P53/P21免疫组化结果显示,与模型组相比,各治疗组SIRT1表达增加,P53和P21蛋白表达减少,其中联合用药组各项指标差异显著,效果最优。综上所述,西曲瑞克联合补肾养阴方药左归丸可通过调控SIRT1/P53/P21通路改善卵泡内的氧化应激反应,减少过氧化产物的产生,保护卵巢功能,从而调节卵巢激素的分泌,其疗效优于单用西曲瑞克或左归丸。

首乌丸对衰老大鼠肝肾组织的作用及机制研究

目的观察首乌丸对D-半乳糖致衰大鼠肝肾组织中SIRT1、p53、p21、FoxO4、DNMT1的影响,以探讨首乌丸延缓衰老的作用及可能机制。方法大鼠随机分为正常组、模型组、首乌丸组、维E组。模型组、首乌丸组、维E组用D-半乳糖造成衰老模型,造模同时首乌丸组以首乌丸混悬液灌胃,维E组以维生素E混悬液灌胃,正常组、模型组予等量生理盐水灌胃,连续6周。HE染色观察肝肾组织病理改变,三标免疫荧光染色观测大鼠肝肾组织p53、p21、SIRT1的表达,WB检测大鼠肝肾组织FoxO4的蛋白表达量,qPCR检测大鼠肝肾组织DNMT1 mRNA的表达。结果首乌丸可明显改善衰老大鼠肝细胞的脂肪变性以及肾脏结缔组织增生、肾小管扩张等病理改变。同时提高衰老大鼠肝肾组织中SIRT1阳性率,降低p53阳性率及p21阳性率,降低FoxO4蛋白表达量,促进DNMT1mRNA的表达。结论首乌丸可能通过上调肝肾组织中SIRT1的水平,抑制p53、p21及FoxO4的表达,促进衰老细胞凋亡,增强细胞的活性,同时上调DNMT1表达以增强肝肾组织的DNA甲基化水平,从而延缓衰老。

小鼠H22皮下移植肝肿瘤模型构建及干预效果与分子机制初探

目的:观察雷氏大疣蛛毒素、抗癌中药和有氧运动,对小鼠皮下移植H22肝肿瘤的干预效果及p53/p21信号通路及相关细胞因子的差异表达与分子机制探讨。方法:40只KM小鼠,以皮下移植法构建H22小鼠肝肿瘤模型。建模成功鼠随机分为4组:模型组,雷氏大疣蛛毒素组,中药组,有氧运动组。各干预组于动物建模成功后第三天进行雷氏大疣蛛毒素、中药和运动干预。HE染色法对各组小鼠肝肿瘤组织进行显微结构形态学观察;免疫组化技术检测肿瘤组织中突变型P53、P21、Bax及Survivin蛋白水平的差异表达;实时荧光定量PCR技术检测肿瘤野生型p53、p21、Bax、Survivin mRNA表达水平。结果:①HE染色显示结果:雷氏大疣蛛毒素组,可见较大坏死区;中药组,细胞核较小,可见坏死区;运动组细胞排列疏松欠规则,出现坏死区和免疫细胞;模型对照组,无明显组织坏死,可见丰富的血管。②免疫组化检测显示:p21、Bax免疫组化中雷氏大疣蛛毒素组阳性表达最高,而突变型p53、Survivin蛋白表达最低,中药组、有氧运动组表达均低于模型对照组。③Real-time PCR检测显示:与模型对照组相比,有氧运动组、中药组、雷氏大疣蛛毒素组野生型p53、p21和Bax mRNA表达量提高,而有氧运动组、中药组、雷氏大疣蛛毒素组Survivin mRNA表达均低于模型对照组。结论:雷氏大疣蛛毒素与抗癌中药、有氧运动三种干预手段,能有效提高野生型P53、P21、Bax相关蛋白和mRNA的含量,降低突变型P53、Survivin蛋白和mRNA含量,发挥抑制H22肝肿瘤增殖的作用。其具体机制还有待进一步研究证实。