p53上调凋亡调控因子在舌鳞癌中的表达及临床意义

目的:观察p53上调凋亡调控因子(p53 up-regulated modulator of apoptosis,PUMA)在舌鳞癌组织、舌癌旁组织及正常舌黏膜组织中的表达,探讨其在舌鳞癌发生、发展中的作用及临床意义。方法:通过免疫组化检测30例舌鳞癌组织、13例舌癌旁组织及10例正常舌黏膜组织中PUMA的表达水平,分析PUMA在舌鳞癌中的表达与临床分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移之间的关系。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:PUMA在舌鳞癌组织、舌癌旁组织及正常舌黏膜组织中的阳性表达率分别为36.67%、53.85%和80.00%,3组之间PUMA表达均有显著差异(P<0.05)。淋巴结转移组中PUMA的阳性表达率为18.18%,而无淋巴结转移组中PUMA的阳性表达率为47.37%,2组差异显著(P<0.05)。而在不同年龄、性别、临床与病理分期、肿瘤分化程度的舌鳞癌组织中,PUMA的表达差异无显著性(P>0.05)。结论:PUMA蛋白表达降低在舌鳞癌的发生、发展及转移过程中具有重要作用,对判断舌鳞癌的预后及治疗有一定的指导意义。

p53上调凋亡调控因子:口腔癌治疗新靶点

据2008年的全球统计，口腔癌年新发病例约274，000例，年死亡病例约127，000例［1］。在一些高发地区，每年新增病例甚至占男性恶性肿瘤的25%［2］。口腔癌已经成为严重威胁人类生命健康的恶性肿瘤之一。口腔癌的治疗方法主要有手术切除、放疗及化疗，但上述常规疗法在治疗肿瘤的同时会导致正常组织损伤，肿瘤治疗效果不佳及患者生活质量下降。因此，寻找能够减少正常细胞损伤的肿瘤治疗靶点具有重要的临床意义。

GPR30激活后下调P53-PUMA信号抑制全脑缺血诱导的海马神经元线粒体凋亡途径

目的采用GPR30特异激动剂、拮抗剂作为工具药,已证实GPR30激活具有抗神经炎症和抗凋亡作用。但具体机制尚不清楚。文章旨在研究揭示G蛋白耦联雌激素受体30(GPR30)激活对脑缺血后海马CA1区神经元凋亡的作用并进一步阐明其对P53-PUMA信号的影响。方法采用大鼠四动脉结扎全脑缺血模型,选择性诱导海马CA1区神经元延迟性死亡。雌性SD大鼠随机分为:假手术(Sham)组,缺血/再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)1d、3d、7d组,GPR30特异激动剂G1处理组(I/R 1d+G1,I/R 3d+G1),P53特异抑制剂Pifithrin-α(Pifi-α)处理组(Pifi-α,I/R 3d+Pifi-α,I/R 7d+Pifi-α),GPR30特异拮抗剂G36处理组(I/R 7d+Pifi-α+G36)。于大鼠切除双侧卵巢同时皮下埋置G1或G36微量释放泵,至实验结束;缺血前侧脑室注射P53抑制剂Pifi-α。Western Blot、免疫组化检测蛋白水平;TUNEL法检测海马CA1区神经元凋亡、NeuN染色观察神经元生存情况。结果激光扫描共聚焦显微镜下观察结果显示,I/R 7d组海马CA1区NeuN阳性染色细胞数量(7.500±2.320)较假手术组(61.000±2.671)减少(P<0.01),但TUNEL阳性细胞数量(73.667±5.296)增多较假手术组(3.667±1.174),差异有统计学意义(P<0.01)。与I/R 7d组相比,Pifi-α处理组海马CA1区NeuN阳性细胞数(58.143±4.783)增加(P<0.01),而TUNEL阳性细胞数(23.571±3.545)减少(P<0.01)。与I/R 7d+Pifi-α组相比,I/R 7d+Pifi-α+G36组NeuN阳性细胞数量(46.143±4.426)减少(P<0.01),而TUNEL阳性细胞数(46.143±3.985)增加(P<0.01)。Western blot结果显示,与假手术组相比,GCI后1d、3d海马CA1区P53磷酸化水平均升高(P<0.05)。与缺血/再灌注相应时间点相比,用G1激活GPR30受体降低了缺血/再灌注诱导的P53磷酸化水平(P<0.01)。免疫组化结果显示,与假手术组相比,缺血再灌注3d组海马CA1区p-P53免疫荧光强度增强,且与DAPI荧光共定位;而G1处理组类似于假手术组,显示海马CA1区p-P53免疫荧光强度较I/R 3d组降低。Western blot分析结果显示,与假手术组相比较,I/R 3d组海马CA1区PUMA水平明显升高,Bcl2水平降低(P<0.01);与I/R 3d组比较,I/R 3d+Pifi-α组PUMA蛋白降低(P<0.01),而Bcl2水平升高(P<0.01)。结论激活GPR30具有显著的神经保护作用,其作用机制与下调P53-PUMA信号通路、抑制线粒体凋亡密切相关。

PUMA介导大蒜素诱导人卵巢癌耐顺铂SKOV-3/DDP细胞凋亡

目的探讨p53上调凋亡调控因子(PUMA)在大蒜素诱导人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株(SKOV-3/DDP)细胞凋亡中的作用。方法将SKOV-3/DDP细胞随机分为4组:正常对照组、大蒜素组(于培养基中加入终质量浓度为20μg/mL大蒜素作用细胞48 h)、顺铂组(5μg/mL)、大蒜素+顺铂组。MTT法检测细胞存活率,荧光显微镜和流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR和Western-blot检测PUMA、bax及bcl-2的基因表达。结果与对照组比较,大蒜素组SKOV-3/DDP细胞凋亡率有明显的增加(P<0.05),且作用呈剂量依赖性,PUMA,Bax mRNA和蛋白表达上调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05);与大蒜素组比较,顺铂+大蒜素组的细胞生长抑制率及凋亡率均有显著增加(P<0.05),Bax表达上调及Bcl-2表达下调的程度大于单用组(P<0.05);用特异性SiRNA沉默PUMA后,大蒜素组细胞凋亡率呈显著性下降(P<0.05)。结论 PUMA在介导大蒜素诱导SKOV-3/DDP细胞凋亡中发挥了关键性作用。

斑蝥酸钠对结肠癌HCT116细胞凋亡及PUMA表达的影响

目的探讨斑蝥酸钠对结肠癌细胞凋亡及p53上调凋亡控制因子(PUMA)表达的影响。方法采用不同浓度斑蝥酸钠(0.1、0.25、0.5、1、2μg/ml)处理结肠癌细胞HCT116 24 h,并设不加药对照组。测量其单层细胞跨膜电阻值(TER)以评价斑蝥酸钠对HCT116细胞凋亡的影响,同时采用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测HCT116细胞的PUMA mRNA和蛋白水平变化;HCT116细胞经0.05、0.1、0.2、0.4、0.8μg/ml抑制性κB激酶β(IKKβ)质粒转染或10、20、40、80 nmol/L核因子(NF)-κB抑制剂(BAY 11-7082)处理后,采用Western blotting检测其PUMA蛋白水平。结果与对照组比较,各浓度斑蝥酸钠处理后HCT116细胞的TER降低,PUMA mRNA和蛋白水平升高,且以上效应呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.05);与未处理的HCT116细胞相比,IKKβ质粒转染后,PUMA蛋白表达增加,而BAY 11-7082可降低斑蝥酸钠对PUMA的上调作用,差异有统计学意义(P<0.05)。结论斑蝥酸钠可通过NF-κB通路上调PUMA的表达,进一步诱导结肠癌细胞HCT116的凋亡。

促凋亡基因puma的研究进展

p53上调凋亡调控因子(puma)可通过p53依赖途径和p53非依赖途径诱导多种肿瘤细胞的凋亡,可能在肿瘤及自身免疫性疾病的发生、发展和治疗中发挥重要的作用,并有望成为人类肿瘤和凋亡相关疾病治疗的新靶点。现就其结构和功能、促凋亡作用、化学药物对多种细胞株中puma表达水平的影响、其他转录途径调节以及转录后调节puma予以综述。

PUMA对高糖诱导的大鼠H9C2心肌细胞凋亡的作用及机制

目的:观察促凋亡蛋白p53上调凋亡调控因子(PUMA)在高糖所致H9C2心肌细胞凋亡中的作用及机制。方法:H9C2心肌细胞随机分为对照组(使用5.5mmol/L葡萄糖作用于细胞)和高糖组(使用35 mmol/L葡萄糖作用于细胞,HG组)分别刺激6 h,12 h,24 h和48 h,每组设复孔5个,TUNEL染色检测细胞凋亡率;RT-PCR及Western blot法分别测定PUMA mRNA及蛋白表达情况;JC-1法检测线粒体膜电位;Western blot测定caspase-3表达和细胞色素c(Cyt C)释放。H9C2细胞随机分为四组,对照组、高糖(35 mmol/L)、HG+si-scramble组(使用si-scramble转染心肌细胞24 h,使用35mmol/L葡萄糖作用于细胞)和Si-PUMA组(使用si-PUMA转染心肌细胞24 h,使用35mmol/L葡萄糖作用于细胞),观察抑制PUMA表达对高糖诱导细胞凋亡率、线粒体膜电位、Cyt C的影响。结果:与对照组相比,高糖刺激心肌细胞组TUNEL染色阳性率、活化caspase-3和PUMA表达明显升高(P<0.05或P<0.01),细胞损伤和PUMA表达增高具有时间依赖性,其中高糖24 h组和48 h细胞凋亡率和PUMA表达差异无统计学意义,后续实验采用高糖刺激24 h作为作用时间。与高糖组相比,HG+si-PUMA组PUMA表达抑制、线粒体膜电位恢复、Cyt C释放减少、心肌细胞凋亡减少(P<0.05或P<0.01);HG+si-Scramble组与高糖组相比,PUMA表达、线粒体膜电位、Cyt C释放、心肌细胞凋亡均无显著性差异(P>0.05)。结论:PUMA介导高糖所致的大鼠心肌细胞凋亡,提示PUMA可能是糖尿病心肌病治疗的一个重要的靶基因。

促凋亡基因PUMA与肿瘤

细胞凋亡信号通路和机制的异常是肿瘤得以发生发展的原因之一.p53上调凋亡调控因子(p53up-regulated modulator of apoptosis,PUMA)是近十多年来新发现的一个促凋亡基因,其编码的PUMA蛋白是Bcl-2家族成员之一,经线粒体途径诱导细胞凋亡.目前在多种肿瘤中未发现PUMA基因的突变,提示PUMA基因突变与肿瘤的发生并无直接关联.PUMA蛋白的表达受到p53、内质网应激、JNK、FOXO3a、E2F1等多个信号通路的转录调控和翻译后的磷酸化调节.一些研究表明PUMA蛋白在肿瘤中的表达下降与肿瘤的形成、淋巴结转移、及预后有关,而增加PUMA在肿瘤中的表达具有抑制肿瘤的作用.随着对PUMA在肿瘤中表达异常的机制的深入研究,PUMA有望成为一个具有重要治疗价值的肿瘤治疗靶点.

PUMA基因对胰腺癌细胞BxPC-3的促凋亡作用及其可能机制

目的:研究P53正向凋亡调节因子基因(P53 up-regulate modulator of apoptosis,PUMA)对胰腺癌细胞株BxPC-3凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:以100 MOI的携PUMA基因重组腺病毒(Ad-PUMA)感染BxPC-3细胞0～96 h,流式细胞术检测BxPC-3细胞凋亡率,Western blotting检测BxPC-3细胞中PUMA、Bcl-2、Bax、Cytochrome C和Caspase-3蛋白的表达,Western blotting检测BxPC-3细胞中细胞质和线粒体内Bax的表达及Bax寡聚体。结果:随着Ad-PUMA感染时间的延长,BxPC-3细胞凋亡率逐渐增加,48 h时最高。Ad-PUMA感染促进BxPC-3细胞中PUMA、Cytochrome C和Caspase-3蛋白的表达,抑制BxPC-3细胞中Bcl-2蛋白的表达。Ad-PUMA感染后BxPC-3细胞的凋亡率与BxPC-3细胞中PUMA蛋白的表达具有明显的相关性。Ad-PUMA感染不影响BxPC-3细胞中Bax蛋白的总表达量,但细胞质中的Bax几乎完全消失,而线粒体中的Bax表达明显增加;Ad-PUMA感染诱导BxPC-3细胞中Bax蛋白的寡聚化。结论:PUMA基因通过线粒体途径促进胰腺癌细胞凋亡。

PUMA的促凋亡作用与肿瘤治疗

p53上调凋亡调控因子(PUMA)是具有强大促凋亡作用的Bcl-2家族BH3-only亚家族成员。它可以通过p53依赖途径及非依赖途径促进细胞凋亡,在肿瘤的发生过程中及治疗中发挥着重要作用。PUMA的作用与p53状态无关,可能成为人类肿瘤治疗的新靶点。

外源性PUMA对非小细胞肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨外源性p53上调凋亡调制因子(PUMA)对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响。方法将肺癌A549细胞分为Control组、空载体组、PUMA组(转染pCEP4-(HA)2-PUMA质粒),DDP组(10μg·mL-1)和PUMA+DDP组(转染pCEP4-(HA)2-PUMA质粒,加10μg·mL-1顺铂)5个组。细胞生存率和凋亡率分别用MTT法和流式细胞仪检测,细胞PUMA、Bax及Bcl-2蛋白表达水平采用Western blot方法检测。结果与Control组比较:PUMA组、DDP组及PUMA+DDP组A549细胞增殖均显著降低(P<0.01),且PUMA+DDP组降低程度最强(P<0.01);凋亡率均显著升高(P<0.01);Bax蛋白水平呈显著性升高(P<0.01),Bcl-2蛋白呈显著性下降(P<0.01)。结论外源性PUMA可抑制肺癌A549细胞增殖,促进凋亡,其机制与增加细胞Bax蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达有关。

PUMA对高脂饮食小鼠LPS诱导的急性肾损伤和凋亡的影响

目的探讨p53上调凋亡调控因子(PUMA)是否参与调节高脂饮食(HFD)所致糖尿病小鼠脂多糖(LPS)诱导的急性肾损伤。方法将24只小鼠随机均分为普食(Chow)组与HFD组,分别以普通饲料或者高脂饮食喂养12周,饮食干预结束后分别再分为LPS组与Con组,LPS组小鼠腹腔注射LPS 10 mg/kg制备脓毒症急性肾损伤模型,Con组给予等体积磷酸盐缓冲液腹腔注射,24 h后检测小鼠肾病理损伤、血清肌酐、血尿素氮、PUMA蛋白和Caspase-3蛋白表达水平以及肾脏凋亡情况。结果与Chow组相比,HFD组小鼠体质量增加、随机血糖升高(P均<0.05),产生胰岛素抵抗。与Con组相比,LPS组血清肌酐和血尿素氮升高(P均<0.05),出现肾上皮细胞形态异常、上皮细胞坏死和炎症浸润等病理损伤,原位末端转移酶标记技术染色显示肾组织出现大量凋亡细胞,PUMA蛋白水平及Caspase-3蛋白表达增高(P均<0.05)。与Chow+LPS组相比,HFD+LPS组上述表现更为明显(P均<0.05)。结论HFD通过上调PUMA表达,促进了LPS诱导的小鼠急性肾损伤以及凋亡。

细胞凋亡相关因子与耐药性的关系研究进展

细胞凋亡和肿瘤多药耐药是目前制约肿瘤临床疗效的两个重要因素，多数抗肿瘤药物通过诱导细胞凋亡而发挥作用，如果发生凋亡逃逸即细胞抗凋亡能力提高如抗凋亡基因过表达或促凋亡基因丢失等，可能导致肿瘤细胞产生耐药性。细胞凋亡功能的异常不仅在肿瘤的发生与发展过程中发挥重要作用，还参与介导肿瘤细胞的MDR，使肿瘤细胞对多种化疗药物诱导的凋亡耐受而产生耐药性。许多调节细胞凋亡的因子如SIRTl、Survivin、PUMA等可参与耐药的发生。

反义miR-222上调PUMA基因表达对腺样囊性癌细胞生长的影响

目的探讨反义miR-222转染腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,Acc)细胞SACC-83后p53上调凋亡调控因子(p53 up-regulated modulator of apoptosis,PUMA)基因表达的改变观察其对ACC细胞生长的影响。方法以SACC-83细胞作为实验对象,转染反义miR-222的细胞为实验组转染反义miR-222 NC的细胞为阴性对照组,并设置未转染的SACC-83细胞为空白对照组。应用RT-PCR与免疫印迹法,分别从mRNA水平与蛋白水平测定转染后备组细胞PUMA的表达,CCK-8法检测细胞增殖情况,Transwell法检测细胞迁移能力,流式细胞仪测定细胞凋亡情况。结果 RT-PCR与免疫印迹检测结果显示,实验组miR-222的表达水平较对照组明显降低(P<0.01),而PUMA的表达水平却显著上调(P<0.01)。实验组细胞生长受到抑制,细胞迁移能力明显降低。流式细胞仪分析结果显示,空白对照组、阴性对照组、实验组的细胞凋亡率分别为1.48%、1.76%和16.73%,实验组细胞凋亡率明显升高差异有统计学意义(P<0.01)。结论反义miR-222转染能上调PUMA的表达,降低SACC-83细胞的增殖与迁移能力,并促进SACC-83细胞凋亡。

透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞p53和PUMA蛋白表达的影响

目的观察透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞形态和p53和p53上调凋亡调控因子(PUMA)蛋白表达的影响,探讨透骨草提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡的分子机制。方法用倒置显微镜观察透骨草提取物对SMMC-7721细胞形态的影响;采用免疫组化方法检测透骨草提取物对SMMC-7721细胞p53和PUMA蛋白表达的影响。结果倒置显微镜观察可见,40.91μg/mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞体积减小,形态轮廓不清晰,细胞皱缩变形,细胞脱壁增加。免疫组化检测结果显示,40.91μg/mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞p53蛋白和PUMA蛋白表达均明显高于与对照组(P<0.01)。结论透骨草提取物可能通过上调p53和PUMA蛋白表达,诱导SMMC-7721细胞凋亡。

长链非编码RNA-PURPL对肝细胞癌增殖和凋亡的影响及其机制

目的探讨长链非编码RNA-PURPL对肝癌细胞的调控。方法采用siRNA干扰肝癌细胞系中lnc RNA-PURPL的表达,分别用细胞计数法检测siRNA干扰后的细胞增殖情况、用流式细胞术检测siRNA干扰后的细胞凋亡率、Western blot法检测与凋亡相关的一些蛋白探究作用机制、ELISA法检测干扰后细胞分泌的指标蛋白的变化情况,并进行统计学分析。结果显示在lnc RNA-PURPL受到下调的细胞分组中,细胞增殖受到抑制(抑制率50%~80%)、凋亡率明显增加(10%~20%),影响了凋亡通路相关蛋白,且细胞分泌的DCP、AFP-L3、AFP也明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 lnc RNA-PURPL可能和实体瘤大小有关联,且可作为肝癌分子标志物作为诊断依据之一,其通过PI3K/Akt通过调节细胞凋亡的机制揭示了其在肝癌发生发展中的重要性。

PUMA蛋白在胰腺癌中的表达及临床意义

目的:初步探讨PUMA(P53 up-regulated modulator of apoptosis)蛋白在胰腺癌发生发展中的作用及其可能机制,并研究PIMA蛋白表达与临床病理学指标的关系.方法:应用免疫组化Envision方法检测60例导管胰腺癌组织石蜡标本中PuMA,Bcl-2和P53蛋白表达以及19例正常胰腺组织石蜡标本中PUMA蛋白表达;TUNEL检测细胞凋亡(AI);分析PUMA表达与临床病理学指标的关系以及其与AI和P53、Bcl-2表达的相关性.结果:PUMA在胰腺癌组织中的阳性率低于正常胰腺组织,有统计学差异(30%vs 57.9%,P<0.05);PUMA表达与肿瘤大小,淋巴结转移和远处转移有关(P<0.05),而与肿瘤分化程度和TNM分期无关:AI在PUMA阳性和阴性表达的肿瘤组织中,有统计学差异(20.63%±6.27%vs 17.44%±5.86%,P<0.05):P53和Bcl-2在胰腺癌中的表达率分别为46.7%(28/60)和41.7%(25/60);PUMA与P53和Bcl-2表达分别有显著的相关性(P=0.013,P=0.046).结论:胰腺癌的生长、淋巴结和远处转移与PUMA蛋白表达缺失有关,PUMA可能是胰腺癌基因治疗的新粑点.

加味脑泰方对去势脑缺血大鼠海马ATF4/CHOP/Puma通路的影响

目的:研究加味脑泰方对去卵巢脑缺血大鼠海马活化转录因子4 (ATF4)/C/EBP同源蛋白(CHOP)/p53上调凋亡调控因子(Puma)通路的影响。方法:将雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、加味脑泰方组和阳性对照组,除假手术组外,其它大鼠均行去卵巢术;术后11 d,阳性对照组和加味脑泰方组给予相应药物灌胃,连续灌胃3 d后行脑缺血术。术后24 h进行行为学评价,取海马组织行RT-qPCR检测Bax、Bcl-2和caspase-3的mRNA表达,Western blot检测各组大鼠海马组织中Bax、Bcl-2、caspase-3、ATF4、CHOP和Puma蛋白表达。结果:与假手术组比较,各组的海马神经功能评分明显增高;与模型组比较,加味脑泰方组与阳性对照组的神经功能评分明显降低(P <0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠海马Bax、caspase-3、ATF4、CHOP和Puma的蛋白表达及Bax和caspase-3的mRNA表达明显升高,而Bcl-2的mRNA和蛋白表达明显降低(P <0.05);与模型组比较,加味脑泰方明显降低Bax、caspase-3、ATF4、CHOP和Puma表达,提高Bcl-2表达(P <0.05)。结论:加味脑泰方可能通过抑制ATF4/CHOP/Puma通路相关mRNA及蛋白的表达而减轻脑缺血损伤。

重组腺病毒P53上调凋亡调控因子增强胶质瘤细胞对替莫唑胺敏感性的体内研究

目的 通过体内实验探讨外源性p53上调凋亡调控因子（PUMA）对人类脑胶质瘤细胞生长的影响及其增强胶质瘤细胞对替莫唑胺（TMZ）敏感性的机制。方法建立人类脑胶质瘤细胞株U87MG裸鼠皮下移植瘤模型，将胶质瘤裸鼠用随机区组法随机分为四组，于建模2周后，分别自腹腔注射0．9％NaCl溶液100μl（对照组）、2×108pfu／100μlAd—PUMA（PUMA组）、TMZ10mg／kg（TMz组）和2×108pfu／100μlAd—PUMA＋TMZ10mg／kg（联合组），每组8只。治疗20d后处死裸鼠，剖腹测量原位肿瘤体积、抑瘤率。TUNEL检测肿瘤细胞凋亡情况及计算凋亡指数（AI）。半定量RT-PCR和Westernblot法检测DNA损伤修复蛋白6-氧-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶（MGMT）mRNA和MGMT蛋白表达情况。结果治疗20d时对照组、PUMA组、TMZ组、联合组诱发肿瘤瘤体积分别为（3．684±O．09）、（2．634±0．13）、（2．13±0．07）、（0．97±0．02）cm3，四组体积进行两两比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。治疗组抑瘤率分别为28．5％、42．1％、73．6％，两两比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。TUNEL染色并计算AI：对照组（2．0±1．2）％、Ad．PUMA组（11．44-2．6）％、TMZ组（7．6±3．2）％、联合组（20．64-8．6）％，进行两两比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。半定量RT—PCR和Western blot法检测显示MGMTmRNA和MGMT蛋白在TMZ组中表达最高，与其他三组比较差异有统计学意义（P均〈0．05）。结论Ad．PUMA联合TMZ具有协同抑制胶质瘤生长作用，其机制可能与Ad—PUMA促进凋亡和抑制MGMT表达有关。

放射诱导启动子介导p53上调凋亡调控因子基因靶向治疗舌鳞状细胞癌裸鼠移植瘤

目的探讨放射诱导启动子介导p53上调凋亡调控因子(PUMA)基因靶向治疗舌鳞状细胞癌(简称舌鳞癌)裸鼠移植瘤的疗效。方法构建放射诱导启动子介导PUMA基因表达的真核表达质粒pcDNA(+)3.1/E-PUMA,建立人舌鳞癌裸鼠移植瘤模型,以脂质体为载体进行瘤内转染,辅以3Gy放疗,描述肿瘤生长曲线,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PUMA的mRNA水平,免疫组化检测细胞核增殖抗原的表达,原位末端标记法检测细胞凋亡。数据分析采用SPSS 11.0统计软件,两样本均数比较采用χ2检验。结果放射诱导启动子介导的PUMA基因转染对舌鳞癌裸鼠移植瘤生长有明显抑制作用,诱导放疗显著增强了PUMA的mRNA表达水平,RT-PCR检测发现其电泳条带灰度值从(0.325±0.075)上调至(0.371±0.096),P<0.01;诱导放疗可显著提高疗效,增殖指数由32.27%下降至22.77%,P<0.01;凋亡指数从14.43%上升为27.98%,P<0.01。结论放射诱导启动子作为基因治疗分子开关可介导PUMA基因在人舌鳞癌裸鼠移植瘤中靶向表达促进细胞凋亡,为舌鳞癌放射基因治疗提供了新思路。