p53基因缺失和248位密码子点突变与肺癌发生和预后间关系的研究

以野生型p53cDNA片段作探针，采用DNA分子印迹杂交（Southernblot）技术检测20例原发性肺癌和10例肺良性病变p53基因缺失与重排。肺癌组阳性率为30％；肺良性病变组均为阴性。同时采用聚合酶链反应结合限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）检测20例原发性肺癌，2例肺转移癌以及它们相应的非癌肺组织p53基因248位密码子点突变。结果发现，4例原发性肺癌和2例肺转移癌有p53基因248位密码子点突变，非癌肺组织均为阴性。P53基因缺失和突变与肿瘤大小、分期、非小细胞肺癌病理分型无关（P＞0．05），与肿瘤转移有关（P＜0．05）。提示：p53基因缺失和突变与肺癌的发生和预后密切相关。

甲状腺肿瘤组织中p53基因248位密码子突变及其蛋白过度表达

近年来的研究表明，野生型ｐ５３基因发生点突变后，失去阻止细胞分裂和抑癌功能，在肿瘤的发生发展和预后中发挥重要作用。目前已在多种恶性肿瘤中发现ｐ５３基因的点突变，如结肠癌、肝癌、胃癌、乳腺癌、肺癌等［１］，为研究甲状腺癌中是否存在ｐ５３基因突变，作者用...

肝细胞癌p53基因249密码子热点突变的研究

目的 研究肝细胞癌(HCC)中p53基因249密码子(p53 E7 cd249)点突变情况。方法 用PCR法及HAEⅢ限制性片段长度多态性分析(HAEⅢ/RFLP)检测河南豫东地区38例HCC石蜡包埋组织及2例肝细胞癌株中p53 E7cd249点突变情况,DNA测序证实。选取广西桂西南地区的10例HCC作对照。结果 来自河南豫东地区的HCC p53 E7 cd249点突变率为10.5％(4/38),对照组广西桂西南地区的HCC p53 E7 cd249点突变为40％(4/10),二者相比具有显著性差异(P<0.05)。2例肝细胞癌株中均未发现HCC p53 E7 cd249点突变。结论 河南豫东地区HCC中p53基因E7 cd249点突变为非高发事件;p53 E7 cd249点突变可能发生在肝细胞癌变的晚期。

广西原发性肝癌P53基因第249密码子点突变的研究

用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法分析了原发性肝癌（ＰＨＣ）组织中Ｐ５３基因第２４９密码子的点突变，突变率为４８．４％，结果表明Ｐ５３基因的突变可能与环境致癌物ＡＦＢ１和ＨＢＶ有关。

卵巢癌中k-ras基因点突变及p53蛋白表达

目的 探讨k-ras基因点突变和p53蛋白表达在卵巢癌发生中的作用及致癌机制。方法 采用显微切割技术、半巢 式PCR RFLP技术和免疫组化染色检测55例卵巢癌及其交界性病变中的k-ras基因点突变和p53蛋白表达。结果 k ras基 因点突变率在黏液性腺癌(61.9%)明显高于浆液性腺癌(14.2%),在黏液性交界性腺瘤(61.5%)明显高于浆液性交界性腺 瘤(12.5%)。p53蛋白表达率在浆液性腺癌(80%)明显高于黏液性腺癌(52%),并随组织学分级而增高。结论 黏液性腺 癌主要通过腺瘤-交界性腺瘤-腺癌途径致癌,k-ras基因点突变是黏液性腺癌的早期事件,黏液性交界性腺瘤是黏液性腺癌 的癌前病变。浆液性腺癌主要通过生发上皮直接恶性转化形成,p53蛋白表达在浆液性腺癌的发生中起重要作用,是浆液性 腺癌的晚期事件。

采用PCR—RFLP技术分析石蜡包埋胃癌组织ras和p53基因点突变

采用多聚酶链延伸反应一限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ—ＲＦＬＰ）法对福尔马林固定、石蜡包埋胃癌组织ｒａｓ和ｐ５３基因点突变进行分析，结果表明，Ｃ—Ｈａ—ｒａｓ第１２位密码子突变率为１３．６％（１２／８８），第６１位密码子为３．８％（３／８０）；Ｃ—Ｋｉ—ｒａｓ第１２位密码子点突变率为７．２％（５／６９），第１３位密码子未发现有点突变者；Ｎ—ｒａｓ第１２位密码子点突变率为１．４％（１／６８）。ｐ５３基因第２４８位密码子点突变率为７．４％（５／６８），第２４９位密码子未见有点突变者。以上提示采用ＰＣＲ—ＲＦＬＰ技术可对多数从石蜡包埋胃癌组织提取的ＤＮＡ进行ｒａｓ和ｐ５３基因点突变分析。

p53基因第72位密码子突变与食管鳞癌临床病理特征关系的研究

目的研究p53基因第72位密码子(p53 codon72)突变与人食管鳞癌临床病理特征的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度(PCR-RFLP)方法检测118例人食管鳞癌组织及癌旁正常食管黏膜组织的p53codon72的突变及其差异,并分析其与食管鳞癌临床病理特征的关系。结果p53 codon72的A rg/A rg和P ro/P ro或A rg基因型在癌组织和癌旁正常食管黏膜组织的频率分别为11.0%和38.1%、4.2%和7.6%。p53 codon72 A rg/P ro基因型在癌组织和癌旁正常食管黏膜组织分布差异具有显著性(χ2=55.75,P<0.01),p53 codon72突变与p53蛋白表达有关(χ2=15.21,P<0.01);且p53 codon72的P ro等位基因与食管癌的TNM分期、分化程度和淋巴结转移均呈显著相关(P<0.01)。结论抑癌基因p53第72位密码子突变在食管癌发生、发展中可能起重要作用。

非放射性PCR-LIS-SSCP技术快速分析肝癌患者p53基因249位密码子的突变

目的 应用非放射性PCR LIS SSCP方法快速分析肝癌患者p5 3基因第 2 4 9位密码子突变。方法 采用PCR LIS SS CP方法 ,研究了 16例来自中国广西、江苏启东和上海地区肝癌患者p5 3基因第 2 4 9位密码子的突变情况 ,并用限制性内切酶和DNA测序对PCR LIS SSCP方法所获得的结果进行了验证。结果 从 16例肝癌病人中检出 3例在该位点具有突变。其中广西地区的 4例肝癌病人有 1例发生突变 ,江苏启东地区的 4例肝癌病人有 1例发生突变 ,上海地区的 8例肝癌病人有 1例发生突变。结论 用该方法检测肝癌病人 p5 3基因第 2 4 9位密码子突变频率为 18.8% (3/ 16 ) 。

应用PCR产物直接银染测序技术检测大肠癌p53基因点突变

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ结合ＰＣＲ产物直接银染测序技术对２４例大肠癌ｐ５３基因第５～７外显子进行点突变的研究。结果检出５例（２６７％）阳性，均为错义突变；其中３例为碱基ＧＣ到ＡＴ的转换，１例为ＧＣ到ＴＡ的颠换，另１例为ＡＴ到ＣＧ的颠换，后者尚未见报道。突变位点分布在ｐ５３基因第１４１、１７５、２４５、２４８和２５８位密码子，其中４例发生在ＣｐＧ位点。本文对ｐ５３基因点突变谱的分析为大肠癌的病因学研究提供了科学依据，并讨论了ＰＣＲ产物直接银染测序技术的优越性。

乳腺癌变过程中的P53基因点突变

目的 :探讨乳腺癌变、发展与P5 3基因点突变的关系。方法 :应用聚合酶链反应 单链构象多态性(PCR SSCP)方法对 87例癌前状态、癌症初期、癌症后期及正常乳腺组织的P5 3基因 5～ 8外显子点突变进行检测。结果 :3例癌前状态、8例癌症初期和 14例癌症后期者发生点突变 (突变率分别为 15 .8%、34 .8%和6 3.6 % ) ,三者 (亦即乳腺癌变、发展过程 )P5 3基因突变率 (统计学结果 )呈明显渐进性。结论 :P5 3基因突变是乳腺癌的早期、多发事件 ,是引起乳腺癌变、发展的因素和标志之一。

肝癌非高发区安徽省肝细胞癌p53基249密码子点突变的研究

目的： 研究 p53基因 249密码子在肝癌非高发区安徽省的点突变的发生率。方法：应用 PCR- RFLP技术分析肝细胞癌 p53基因 249密码子突变的频率。结果：所检测的 38例肝细胞癌均无出现 p53基因第七外显子纯合性缺失， 4例有 p53基因 249密码子的点突变，且均为杂合型突变，突变率为 10.53％ (4/38)。结论：本资料说明，在肝细胞癌非高发区中 ,肝细胞癌中 p53基因第七外显子发生的点突变并非为高发事件。提示 p53基因第七外显子的点突变在肝癌非高发区肝细胞癌的形成过程中可能不起主导作用。

全氟辛烷磺化物(PFOS)诱导斑马鱼胚胎p53基因的点突变

将斑马鱼胚胎于0μg·l-1(空白对照),5μg·l-1,16μg·l-1和50μg·l-1全氟辛烷磺化物(PFOS)溶液中暴露染毒5h,采用变性高效液相色谱方法对PCR扩增的含斑马鱼胚胎p53基因外显子7的173 bp的目标片段进行突变分析.结果显示,16μg·l-1和50μg·l-1两个处理组与对照组相比均有显著性差异,表明PFOS可以诱导斑马鱼胚胎p53基因外显子7的点突变.

毛细管电泳技术快速检测p53基因点突变

目的 探讨利用毛细管电泳技术快速检测 p5 3基因点突变的临床应用价值。方法 采用毛细管电泳作 SSCP分析 ,检测 2 0例结肠癌肿瘤标本 p5 3基因第 7外显子 PCR扩增产物 ,并与传统的聚丙烯酰胺凝胶电泳结果进行比较 ,最后用 DNA序列测定判断其准确性。结果 2 0例结肠癌标本中 ,毛细管电泳技术检测出 5例标本( Ca4,Ca6,Ca7,Ca8,Ca14)有突变 ,而凝胶电泳结合银染技术仅检出 4例标本 ( Ca4,Ca6,Ca7,Ca14)有突变 ,测序证实经毛细管电泳所检出的 5例标本均存在点突变。结论 对于 PCR产物的单链构象多态性分析 ,毛细管电泳技术是一种更加快速、简便、敏感的方法 。

西南地区原发性肝癌抗癌基因P^(53)点突变的研究

本文采用PCR－RFLP技术对西南地区原发性肝细胞癌P53基因第248和249位密码子点突变进行了研究。约17．4％的肝癌存在第249位密码子点突变。没有发现248位密码突变。本研究结果提示癌基因P53点突变在该地区肝癌发病中起有一定作用；西南地区肝癌的发生可能有AFB1的参与。

肝细胞癌组织和癌周组织中p53基因密码子249突变的比较研究

目的：本研究通过比较研究ＨＣＣ 癌组织和癌周组织中ｐ５３ 基因密码子２４９ 特征性突变来进一步阐明该基因在ＨＣＣ 发生机制中的意义。方法：收集９ 份癌组织中经单链构型多态性分析研究证实存在密码子２４９ 突变的ＨＣＣ 标本和１１ 例无此突变的ＨＣＣ 标本，采用等位基因特异性ＰＣＲ（ＡＳ－ ＰＣＲ） 方法比较研究癌组织和癌周组织中密码子２４９ 突变情况。结果：２０ 例ＨＣＣ 中，癌周组织中密码子２４９ 特征性突变检出率为７０ ％ 。９ 例ＳＳＣＰ 阳性者的癌周组织中的特征性突变检出率达１００ ％ 。１１ 例阴性患者的癌组织和癌周组织也能检出一定水平的突变。结论：ｐ５３基因密码子２４９ 突变在非癌肝组织中广泛存在。癌组织中密码了２４９ 特征性突变可能发生在肿瘤形成之前。

应用非同位素PCR-SSCP方法检测乳腺癌p53基因点突变

目的 探讨乳腺癌组织中p53基因点突变。方法应用非同位素PCR -SSCP技术检测 4 8例石蜡包埋乳癌组织中p53基因点突变。结果 4 8例乳腺癌中 2 0例出现异常电泳 ,表明这些病例相应DNA片段中发生了点突变 ,其中 8例位于第 5- 6外显子 ,9例位于第 7外显子 ,3例位于第 8外显子。免疫组化检测突变p53蛋白的表达 2 5例为阳性 ( 52 % ) ,其中 5例SSCP未发现基因突变 ,突变可能发生在所检测的基因片点以外。结论 非同位素PCR -SSCP是一简便、快速、有效的检测基因点突变的方法 ,特别适用于大量标本基因点突变的筛选 ;

鼻咽癌组织中p53基因249位点未发现突变

鼻咽癌组织中ｐ５３基因２４９位点未发现突变陈卫平，李扬，余升红，周微雅，王培中，曾毅关键词ｐ５３基因，鼻咽癌，点突变ｐ５３蛋白是细胞内的一个核蛋白。最近在鼻咽癌组织中发现有ｐ５３基因的突变〔１〕。此外，将野生型ｐ５３基因导入鼻咽癌细胞株可以有效地抑制...

寡核苷酸芯片技术检测中国肝细胞癌p53基因点突变

目的探讨寡核苷酸芯片技术在我国肝细胞癌p53基因点突变发生频率及形式,并以DNA测序法进行验证。方法参照国际p53突变公共数据库资料,以发生频率最高的7个点突变序列设计探针,制备p53基因点突变专用寡核苷酸芯片,应用该技术检测我国肝细胞癌p53基因7个常见突变位点的突变频率及形式,以DNA测序法验证结果,比较不同分组时p53基因点突变差异。结果共检测肝细胞癌石蜡包埋标本54例,p53基因突变率为38.9%(21/54)。54例中广西肝癌高发病区组17例,广西低发病区组(低发区组)19例,区(省)外组18例,三组突变率分别为47%、21%、50%。p53突变主要发生在249编码区,主要突变形式为249ser突变(由AGG→AGT,第三碱基G→T颠换);以DNA测序法对结果进行验证,两种技术检测结果重合率100%。结论寡核苷酸芯片技术可作为检测肝癌p53基因突变的一种新的、可靠和便捷的手段;我国肝癌不同地区之间p53基因突变在频率及形式上既有差异性又有类似性,可能预示不同地区肝细胞癌的病因学异同性。

银染PCR-SSCP法检测横纹肌肉瘤p53基因点突变

应用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法和免疫组织化学ＡＢＣ法，检测３０例横纹肌肉瘤（ＲＭＳ）中ｐ５３基因突变及其蛋白表达。结果显示：３０例ＲＭＳ中，７例ＳＳＣＰ阳性（２３．３％）。表明这些病例相应ＤＮＡ片段中发生了点突变，其中第５、６、７、８外显子ＳＳＣＰ阳性出现的例次分别为０、０、５、４次。ｐ５３蛋白表达率６６．７％（二者符合率５６．７％）。ｐ５３基因突变及蛋白表达与年龄、性别、肿瘤组织类型无关，而与肿瘤分化、转移和预后有关。提示，ｐ５３基因突变和蛋白表达可能是ＲＭＳ患者预后差的因素之一，可作为判断ＲＭＳ的恶性程度和预后的重要标准之一。