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稳定转染HBx基因的HepG2细胞株的建立及其对p53-p21途径的影响
被引量:
2
1
作者
曹鹏飞
柳永和
贺玉香
《肿瘤防治研究》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期380-383,共4页
目的将构建的乙型肝炎病毒X基因的真核表达载体稳定转染HepG2细胞株,并研究转染后对p53-p21途径的影响。方法用基因转染的方法将已构建的载体pcDNA3.1-HBx转染入肝癌细胞HepG2中,G418筛选出稳定转染X基因的细胞株。细胞生长曲线、平板...
目的将构建的乙型肝炎病毒X基因的真核表达载体稳定转染HepG2细胞株,并研究转染后对p53-p21途径的影响。方法用基因转染的方法将已构建的载体pcDNA3.1-HBx转染入肝癌细胞HepG2中,G418筛选出稳定转染X基因的细胞株。细胞生长曲线、平板克隆形成实验检测转染后肝癌细胞的恶性表型,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期,Western blot检测p53蛋白的表达,RT-PCR检测p21基因。结果成功筛选出pcDNA3.1-HBx稳定转染的HepG2细胞株;细胞生长实验、平板克隆形成实验显示稳定转染乙型肝炎病毒X基因的肝癌细胞恶性表型增高;流式细胞仪结果显示,转染后的细胞株凋亡率增高,G1/G0期细胞减少,G2期细胞增多;Western blot和RT-PCR分别显示,转染株p53蛋白表达增高,且下调p21基因水平。结论乙型肝炎病毒X蛋白可刺激肝癌细胞生长,稳定转染X基因的细胞株可能通过p53-p21途径增加肝癌细胞的恶性表型。
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关键词
乙型肝炎病毒X基因
真核表达载体
HE
p
G2细胞
p53-p21途径
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职称材料
大鼠增殖抑制基因通过P53-P21cip1途径抑制胶质瘤细胞增殖
被引量:
6
2
作者
邹有瑞
蒋树财
+3 位作者
霍国进
王军成
赵巍
沈冰
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2016年第19期3143-3146,共4页
目的:探究大鼠增殖抑制基因(r HSG)过表达抗C6大鼠胶质瘤细胞增殖的机制。方法:体外培养C6细胞,感染运载r HSG基因的腺病毒载体(Adv-r HSG-GFP),倒置显微镜及流式细胞仪分析腺病毒载体感染效率;应用流式细胞仪分析C6细胞周期;Western b...
目的:探究大鼠增殖抑制基因(r HSG)过表达抗C6大鼠胶质瘤细胞增殖的机制。方法:体外培养C6细胞,感染运载r HSG基因的腺病毒载体(Adv-r HSG-GFP),倒置显微镜及流式细胞仪分析腺病毒载体感染效率;应用流式细胞仪分析C6细胞周期;Western blot检测细胞r HSG蛋白、抑癌基因P53蛋白、细胞周期调控蛋白P21cip1、磷酸化及非磷酸化成视网膜细胞瘤蛋白(p-Rb,Rb)表达变化。结果:腺病毒可以高效的将目的基因导入C6靶细胞;Adv-r HSG-GFP组r HSG蛋白的表达量明显高于PBS组和Adv-GFP组(P<0.01);r HSG过表达的C6细胞停滞于G0/G1期细胞的数量明显增加(P<0.01);P53、P21cip1蛋白表达量明显增加(P<0.01),p-Rb蛋白表达降低(P<0.01),Rb蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论:r HSG可能通过P53-P21cip1途径抑制胶质瘤细胞增殖。
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关键词
大鼠增殖抑制基因
p
53
-p
21
ci
p
1信号
途径
细胞周期
胶质瘤
C6细胞
下载PDF
职称材料
题名
稳定转染HBx基因的HepG2细胞株的建立及其对p53-p21途径的影响
被引量:
2
1
作者
曹鹏飞
柳永和
贺玉香
机构
中南大学湘雅医院血液研究室
中南大学湘雅医学院检验系
中南大学湘雅医院肿瘤科
出处
《肿瘤防治研究》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期380-383,共4页
文摘
目的将构建的乙型肝炎病毒X基因的真核表达载体稳定转染HepG2细胞株,并研究转染后对p53-p21途径的影响。方法用基因转染的方法将已构建的载体pcDNA3.1-HBx转染入肝癌细胞HepG2中,G418筛选出稳定转染X基因的细胞株。细胞生长曲线、平板克隆形成实验检测转染后肝癌细胞的恶性表型,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期,Western blot检测p53蛋白的表达,RT-PCR检测p21基因。结果成功筛选出pcDNA3.1-HBx稳定转染的HepG2细胞株;细胞生长实验、平板克隆形成实验显示稳定转染乙型肝炎病毒X基因的肝癌细胞恶性表型增高;流式细胞仪结果显示,转染后的细胞株凋亡率增高,G1/G0期细胞减少,G2期细胞增多;Western blot和RT-PCR分别显示,转染株p53蛋白表达增高,且下调p21基因水平。结论乙型肝炎病毒X蛋白可刺激肝癌细胞生长,稳定转染X基因的细胞株可能通过p53-p21途径增加肝癌细胞的恶性表型。
关键词
乙型肝炎病毒X基因
真核表达载体
HE
p
G2细胞
p53-p21途径
Keywords
He
p
atitis B virus x gene
Eukaryotic ex
p
ression vector
He
p
G2 cell
p
53
-p
21
p
athway
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
大鼠增殖抑制基因通过P53-P21cip1途径抑制胶质瘤细胞增殖
被引量:
6
2
作者
邹有瑞
蒋树财
霍国进
王军成
赵巍
沈冰
机构
宁夏医科大学总医院神经外科
山东省滨州市人民医院神经外科
宁夏医科大学
宁夏医科大学科学技术研究中心
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2016年第19期3143-3146,共4页
基金
宁夏自然科学基金项目(编号:NZ13129)
文摘
目的:探究大鼠增殖抑制基因(r HSG)过表达抗C6大鼠胶质瘤细胞增殖的机制。方法:体外培养C6细胞,感染运载r HSG基因的腺病毒载体(Adv-r HSG-GFP),倒置显微镜及流式细胞仪分析腺病毒载体感染效率;应用流式细胞仪分析C6细胞周期;Western blot检测细胞r HSG蛋白、抑癌基因P53蛋白、细胞周期调控蛋白P21cip1、磷酸化及非磷酸化成视网膜细胞瘤蛋白(p-Rb,Rb)表达变化。结果:腺病毒可以高效的将目的基因导入C6靶细胞;Adv-r HSG-GFP组r HSG蛋白的表达量明显高于PBS组和Adv-GFP组(P<0.01);r HSG过表达的C6细胞停滞于G0/G1期细胞的数量明显增加(P<0.01);P53、P21cip1蛋白表达量明显增加(P<0.01),p-Rb蛋白表达降低(P<0.01),Rb蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论:r HSG可能通过P53-P21cip1途径抑制胶质瘤细胞增殖。
关键词
大鼠增殖抑制基因
p
53
-p
21
ci
p
1信号
途径
细胞周期
胶质瘤
C6细胞
Keywords
rHSG
p
53
-p
21
ci
p
1
p
athway
Cell cycle
Glioma
C6 cells
分类号
R739.41 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
稳定转染HBx基因的HepG2细胞株的建立及其对p53-p21途径的影响
曹鹏飞
柳永和
贺玉香
《肿瘤防治研究》
CAS
CSCD
北大核心
2014
2
下载PDF
职称材料
2
大鼠增殖抑制基因通过P53-P21cip1途径抑制胶质瘤细胞增殖
邹有瑞
蒋树财
霍国进
王军成
赵巍
沈冰
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2016
6
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职称材料
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