CD137信号调控P53/P21通路对血管平滑肌细胞衰老的机制研究

目的探讨CD137信号调控P53/P21通路对血管平滑肌细胞(VSMC)衰老的机制。方法选择8周龄雄性C57BL/6J小鼠30只,随机分为年轻组(8周龄)和衰老组(80周龄),每组15只。饲养对应时间后处死小鼠并分离血浆及主动脉血管。细胞实验中将正常VSMC分为空白对照组、博来霉素(BLM)组、联合激动剂组和联合抑制剂组。采用细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒染色检测VSMC衰老水平。Western blot和聚合酶链反应检测组织及细胞中衰老相关蛋白,酶联免疫吸附测定衰老相关炎性因子表达。结果衰老组小鼠主动脉中CD137、组蛋白h2ax(γ-H2AX)表达明显高于年轻组,增殖细胞核抗原(PCNA)表达明显低于年轻组(P<0.05)。衰老组小鼠血浆CD137水平明显高于年轻组[(154.0±4.1)pg/ml vs(98.0±2.3)pg/ml,P<0.05]。与空白对照组比较,BLM组衰老VSMC明显增加(P<0.05);与BLM组比较,联合激动剂组衰老VSMC明显增加(P<0.05);与联合激动剂组比较,联合抑制剂组衰老VSMC明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,BLM组肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β水平明显增高(P<0.05);与BLM组比较,联合激动剂组TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显增加(P<0.05);与联合激动剂组比较,联合抑制剂组TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,BLM组、联合激动剂组和联合抑制剂组B淋巴细胞瘤2基因、γ-H2AX、P53和P21表达明显增加,PCNA表达明显减少(P<0.05);与BLM组比较,联合激动剂组P53和P21表达明显增加(P<0.05);与联合激动剂组比较,联合抑制剂组P53表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CD137信号调控P53/P21通路促进VSMC衰老。

电针干预老年膝骨关节炎大鼠关节软骨及软骨下骨P53、P21的表达

背景:膝骨关节炎的治疗方法有很多,其中电针作为一种重要的非药物治疗方法,治疗膝骨关节炎疗效确切,目前其确切的作用机制尚不明确。目的:探讨电针对老年大鼠膝骨关节炎关节软骨及软骨下骨P53、P21表达的影响。方法:青年组为8只6月龄SD雄性大鼠,16只24月龄SD雄性大鼠按随机抽样法分为老年组和电针组,每组8只。电针组大鼠接受电针刺激,每周5 d,1次/d,连续刺激8周,其余两组不做处理。8周后取材,ELISA法检测外周血Ⅱ型胶原C端肽水平,番红O-固绿染色对左膝关节软骨及软骨下骨进行形态学观察;改良Mankin’s评分评估膝关节软骨退变程度;显微CT检测左膝关节软骨及软骨下骨微结构;RT-qPCR、Western blot检测右膝关节软骨及软骨下骨基质金属蛋白酶13、P53、P21 mRNA及蛋白表达水平。结果与结论:①与青年组相比,老年组大鼠外周血Ⅱ型胶原C端肽水平升高(P<0.05);显微CT显示老年组大鼠骨体积分数、骨密度、骨小梁数量均降低(P<0.05),骨小梁分离度增大(P<0.05);番红O-固绿染色显示老年组大鼠软骨表层不平整,出现裂层,软骨细胞形态不均,染色不均匀,软骨与软骨下骨分界模糊,基质损失严重;Mankin’s评分增加(P<0.05);基质金属蛋白酶13、P53、P21 mRNA表达升高(P<0.05),蛋白表达升高(P<0.05);②与老年组相比,电针组大鼠Ⅱ型胶原C端肽水平降低(P<0.05);显微CT显示电针组大鼠骨体积分数、骨密度、骨小梁数量均升高(P<0.05),骨小梁分离度减小(P<0.05);番红O-固绿染色显示软骨表面较平整,红染较均匀,细胞形态结构介于青年组和老年组之间;Mankin’s评分降低(P<0.05);基质金属蛋白酶13、P21 mRNA表达降低(P<0.05),P53 mRNA表达有降低趋势,但差异无显著性意义(P>0.05);基质金属蛋白酶13、P53蛋白表达降低(P<0.05),P21蛋白表达有下降趋势,差异无统计学意义(P>0.05);③结果表明电针可能通过抑制P53和P21的表达而延缓老年大鼠关节软骨退变,并抑制关节软骨下骨骨质疏松,从而达到保护关节的作用延缓关节衰老。

槲皮素通过p53-p21-Rb通路缓解慢性阻塞性肺疾病的肺衰老

目的 探讨槲皮素对慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠肺衰老的治疗作用及机制。方法 将30只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、槲皮素组,每组10只。模型组和槲皮素组采用烟熏联合气道内滴注脂多糖(LPS)的方法构建COPD小鼠模型。造模成功后,槲皮素组给予槲皮素(50 mg/kg)灌胃,1次/d,持续4周;对照组和模型组给予等体积生理盐水。采用苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠肺组织病理改变,并评估肺部病理损伤;采用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法观察小鼠肺组织的衰老状况;采用免疫组化法检测肺组织中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达情况;采用蛋白质印迹(Western blot)法检测肺组织中衰老相关蛋白p53、p21、Rb表达水平。结果 与对照组比较,模型组小鼠肺组织病理损伤明显,SA-β-gal染色的阳性面积明显增加,肺组织中Bcl-2蛋白表达减少、Bax蛋白表达增多,衰老相关蛋白p53、p21、Rb表达水平明显升高(均P<0.05);与模型组比较,槲皮素组小鼠肺组织病理损伤减轻,SA-β-gal染色阳性面积减少,肺组织中Bcl-2蛋白表达增高、Bax蛋白表达均减弱,衰老相关蛋白p53、p21、Rb表达水平明显降低(均P<0.05)。结论 槲皮素可能通过下调p53-p21-Rb信号通路减轻肺组织病理损伤、抑制肺组织细胞凋亡、延缓肺组织的衰老,从而起到治疗慢性阻塞性肺疾病的作用。

补阳还五汤药物血清对体外培养大鼠皮层神经元缺氧后p53和p21表达的影响

目的:探讨补阳还五汤对体外培养大鼠皮层神经元缺氧凋亡的作用,以及对神经元缺氧过程p53、p21基因表达的影响。方法:采用Daniel方法建立神经元缺氧凋亡模型,加入补阳还五汤药物血清,应用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色法经流式细胞仪检测神经元凋亡率,免疫组化法流式细胞仪检测p53和p21的表达。结果:补阳还五汤显著抑制缺氧导致的神经元凋亡,下调p53和p21基因的表达。结论:补阳还五汤对神经元缺氧凋亡有抑制作用,p53和p21基因表达下调是其机制之一。

淫羊藿苷对D-半乳糖诱导的脑衰老模型小鼠p53/p21信号通路的影响

目的:观察淫羊藿苷对脑衰老模型小鼠p53/p21信号通路的影响,并探讨淫羊藿苷抗衰老的可能机制。方法:将实验小鼠随机分为空白组、模型组、淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组,除空白组外,其他各组通过D-半乳糖诱导建立脑衰老模型。淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组灌胃淫羊藿苷药液,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水。用Morris水迷宫评价各组小鼠的学习记忆能力;用ELISA检测各组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST、MDA的表达。用Real time-PCR和免疫组化检测各组小鼠海马中p53和p21的表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠上平台潜伏期、游泳总路程和第1次抵原平台时间都明显增加(P<0.01),而小鼠穿越平台次数和目标象限时间则明显较少(P<0.01)。与模型组相比,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠上平台潜伏期、游泳总路程和第1次抵原平台时间均有所较少(P<0.01,P<0.05),而小鼠越平台次数和目标象限时间有所增加(P<0.01,P<0.05)。与空白组比较,模型组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST明显降低(P<0.01),而MDA明显升高(P<0.01);与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST均有不同程度升高(P<0.01,P<0.05),而MDA则有所降低(P<0.01)。与空白组比较,模型组小鼠海马中p53、p21 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01)。与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠海马中p53、p21 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.01,P<0.05)。结论:淫羊藿苷具有延缓衰老作用,其机制可能与其抑制衰老信号通路p53/p21有关。

食管癌变过程中p53、BrdU、P21^(waf1)和PCNA蛋白表达的变化

目的:探讨食管癌及癌前病变组织中p53、P21^(waf1)、PCNA及S期细胞标记指数(BrdU)表达的变化。方法:采用免疫组化ABC法对食管癌高发区无症状食管活检组织179例(正常上皮31例,基底细胞过度增生(BCH)117例,不典型增生(DYS)31例)、食管癌手术切除标本26例以及同一个体食管癌手术标本37例及相应癌旁组织中(正常上皮7例,BCH29例,DYS23例)p53、PCNA、BrdU和P21^(waf1)进行检测。结果:不同个体和同一个体病理形态学相似的食管正常、各级癌前病变和癌组织中p53、P21^(waf1)、PCNA和BrdU蛋白表达变化相似。随病变程度加重,PCNA、p53和BrdU阳性细胞数均呈上升趋势,但P21^(waf1)呈下降趋势(P<0.05)。BrdU阳性表达与食管癌患者的年龄、性别、分化程度、肿瘤浸润程度及淋巴结转移均无关(P>0.05)。p53蛋白表达与食管癌患者淋巴结转移有关(P<0.05),与其他指标无关;P21^(waf1)的表达与细胞分化程度有关(P<0.05);PCNA的表达与细胞分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:不同个体和同一个体食管癌变过程中存在相似的分子变化。在食管癌变过程中p53蛋白可能起重要的促进细胞增生的作用;P21^(waf1)可能是一个重要的保护因子。

罗格列酮激活p38MAPK通路调控p53及p21影响人肝癌HepG2细胞周期

目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路及相关蛋白在罗格列酮引发的人肝癌HepG2细胞周期阻滞过程中的作用。方法 MTT法检测罗格列酮对人肝癌HepG2细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期分布,Western blot检测p38MAPK通路相关蛋白的表达变化。结果罗格列酮可抑制HepG2细胞的增殖,并引发G0/G1期阻滞(P<0.05)。Western blot检测结果显示罗格列酮可激活p38MAPK通路,上调HepG2细胞中磷酸化p53蛋白及p21蛋白的表达水平(P<0.05);而ERK1/2及JNK的磷酸化程度没有明显变化。p38MAPK通路抑制剂SB203580可明显减弱罗格列酮对HepG2细胞的增殖抑制及周期阻滞作用;并且SB203580可部分逆转由罗格列酮引发的磷酸化p53及p21蛋白的表达变化。结论罗格列酮可通过激活p38MAPK通路引发人肝癌HepG2细胞周期阻滞,其机制可能与p38MAPK通路激活后参与对磷酸化p53蛋白及p21蛋白的调控有关。

再生障碍性贫血患者骨髓单个核细胞端粒长度及P53、P21的表达

目的:研究再生障碍性贫血(AA)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)的端粒长度以及P53和P21表达水平,探讨它们与AA发病的关系。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测60例AA患者[其中非重型再障(NSAA)38例,重型再障(SAA)22例]和25例对照者BMMNC中端粒长度以及P53和P21的mRNA表达情况;采用Western blot法检测P53和P21蛋白表达情况;并进行相关性比较。骨髓活检术检测骨髓造血细胞成分分布情况;流式细胞术检测CD34^+细胞占有核细胞百分比情况。结果:AA患者端粒长度较对照组明显缩短骨髓造血细胞成分及CD34^+细胞占有核细胞百分比较对照组明显减少(P<0.05);NSAA、SAA患者与对照组相比端粒长度均明显缩短,骨髓造血细胞成分及CD34^+细胞占有核细胞百分比均明显减少(P<0.05);SAA与NSAA比较,端粒长度明显缩短,骨髓造血细胞成分及CD34^+细胞占有核细胞百分比明显减少(P<0.05)。AA患者P53和P21的mRNA及蛋白表达水平均较对照组明显升高(P<0.05);NSAA和SAA患者P53和P21的mRNA及蛋白表达水平与对照组相比均明显升高(P<0.05);SAA患者P53和P21的mRNA及蛋白表达水平较NSAA明显升高(P<0.05)。端粒长度与P53表达水平或P21表达水平之间没有相关性(P>0.05);P53表达水平与P21表达水平之间呈正相关(P<0.05)。结论:端粒长度的改变以及P53和P21可能参与了再障的发病经过,推测可能是通过抑制造血干细胞的增殖和分化,从而引发造血细胞凋亡。

顺铂通过调控P53及P21表达水平影响HepG2细胞衰老及周期阻滞(英文)

目的化疗药物能够通过诱导肿瘤细胞衰老从而发挥治疗效果。顺铂作为最常用的化疗药物能否诱导肝癌细胞发生加速性衰老目前尚不清楚。方法使用MTT法和克隆形成试验检测不同剂量顺铂对HepG2细胞增殖的影响;分别用流式细胞仪及衰老相关β-半乳糖苷酶染色检测细胞周期及衰老情况;RT-PCR检测TP53、P21及P19基因的mRNA表达水平,Western blotting检测P53和P21蛋白表达水平。结果顺铂能够诱导HepG2细胞出现不可逆的生长停滞及细胞周期阻滞。2.0μg/ml顺铂作用于HepG2后衰老相关β-半乳糖苷酶染色阳性,并呈现时间依赖性。在顺铂诱导衰老过程中,P19基因表达水平升高,在诱导48 h后达到峰值后逐渐下降,而P53和P21表达水平则持续升高。结论本研究提示顺铂能够诱导肝癌细胞出现衰老样表型,这一结果为进一步探讨其抗肝癌机制提供了基础。

脑缺血耐受与细胞凋亡及p53、p21、Bax表达关系的实验研究

目的 探讨大鼠局灶性缺血预处理的脑保护作用与细胞凋亡及凋亡相关因子p5 3、p2 1和Bax的关系。方法 采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉造成脑缺血预处理和致死性缺血模型 ,图像分析测算相对梗死体积 ,使用TUNEL染色标记神经细胞凋亡 ,免疫组化染色观察p5 3、p2 1和Bax蛋白表达。结果 与致死缺血组比较 ,缺血预处理组梗死体积减少 4 6 % (P <0 0 5 ) ,半暗区TUNEL阳性细胞数和p5 3阳性细胞数均明显降低 (均P <0 0 5 ) ,p2 1和Bax阳性细胞数无显著变化 (均P >0 0 5 )。结论 缺血预处理可能通过抑制严重缺血后p5 3表达 ,减轻神经细胞凋亡 ,发挥脑保护作用。p2 1和Bax在脑缺血耐受形成中可能不起重要作用。

ATM与辐射激活的磷酸化P53、P21蛋白的相互作用

背景与目的:ATM基因属于PI-3K激酶家族成员,其编码蛋白具有调控DNA修复过程和调整细胞周期关卡的功能。毛细血管扩张性共济失调症(ataxia-telangiectasia,AT)患者AT细胞中ATM基因的突变导致了辐射诱发的P53、P21磷酸化缺失,说明辐射激活ATM基因可调控P53、P21的磷酸化。本实验利用免疫共沉淀及Westernblot技术来研究辐射激活的ATM基因与p53的关系,并观察ATM基因是否不通过P53而直接调控P21的磷酸化。方法:利用电穿孔技术将含有ATM基因cDNA的真核表达载体pEBS7-YZ5转染到AT细胞中,用潮霉素筛选以获得稳定表达细胞株,RT-PCR检测ATMcDNA的转录以进一步验证;在ATM稳定表达的AT细胞中,利用免疫共沉淀及Westernblot技术研究ATM基因与p53基因的相互关系;以K562细胞(p53突变)为p53突变细胞模型,研究ATM是否直接磷酸化P21。结果:pEBS7-YZ5成功转进AT细胞,RT-PCR检测到ATMcDNA片段;ATM稳定表达的AT细胞株在电离辐射诱导下,P53被磷酸化,免疫共沉淀显示ATM与P53相互作用;K562细胞经60Coγ射线照射后,P21被磷酸化,ATM抗体免疫共沉淀物中检测到P21蛋白的存在。结论:细胞遭受电离辐射作用后所激活的ATM激酶,可通过磷酸化P53继而活化细胞周期检控点P21蛋白,也可在电离辐射导致DNA损伤早期直接磷酸化P21蛋白,来启动DNA修复机制。

VEGF p53和p21 ras在原发性肝细胞癌中的表达及其临床病理意义

目的：研究ＶＥＧＦ，ｐ５３和ｐ２１ｒａｓ在原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）的表达和三者间的相关性及其与ＨＣＣ病理分级，转移行为的关系。方法：应用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法对３４例ＨＣＣ的癌组织中的ＶＥＧＦ，ｐ２１ｒａｓ和ｐ５３的表达作了研究。结果：ＶＥＧＦ，ｐ２１ｒａｓ和ｐ５３三者在肝癌和癌旁组织的阳性率均有非常显著的差异（Ｐ＜０．０１），ＶＥＧＦ的表达与ｐ２１ｒａｓ和ｐ５３均呈显著的正相关（Ｐ＜０．０１）。三者间的协同表达亦与ＨＣＣ的病理分级和转移行为有关，而与肿瘤大小，ＡＦＰ水平，ＨＢｓＡｇ阳性无关。结论：ＶＥＧＦ可能在ＨＣＣ的形成，发展和转移中与ｐ５３和ｒａｓ基因协同作用，三者的协同作用可能与ＨＣＣ的病理分级和转移行为有关。

MDM2、p53和p21^(WAF1/CIP1)蛋白在胃癌中的表达及意义

目的 :探讨 MDM2在胃癌中的表达情况以及 MDM2、p5 3和 p2 1W AF 1 /CIP1 在胃癌发生发展中的作用。方法 :应用免疫组化 SABC法检测 94例胃癌 MDM2、 p5 3和 p2 1WAF 1 /CIP1 蛋白的表达情况 ,并对三者之间的关系及其与胃癌临床病理特征的关系进行统计分析。结果 :94例胃癌中未发现有 MDM2的表达。 p5 3及 p2 1WAF1 /CIP1 的阳性表达率分别为 5 6 .38% (5 3/ 94 )和4 1.4 9% (39/ 94 ) ,阳性表达位于癌细胞核。在癌旁不典型增生灶中 ,p5 3有 3例 ,p2 1W AF 1 /CIP1 有 5例阳性 ,癌旁正常黏膜均为阴性。 p5 3和 p2 1WAF1 /CIP1 两者的阳性表达率之间无显著相关性。在性别、年龄、部位、浸润深度、局部淋巴结转移及组织学类型等临床病理指标中 ,p5 3或 p2 1WAF 1 /CIP1 的阳性表达率的差异均无统计学意义。结论 :MDM2在胃癌的发展中不起重要作用 ,而在胃癌发展中起主要作用的是抑癌基因 p5 3的突变。p2 1WAF1 /CIP1 在胃癌中可能是以不依赖 p5 3的途径增高 ,说明癌细胞增生已不受

胃癌组织中p21、p27、p53和Rb的表达及临床意义

目的探讨p21、p27、p53和Rb蛋白表达在胃癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组化EnVision法检测111例胃癌,38例不典型增生4、7例肠上皮化生2、5例慢性萎缩性胃炎和53例正常胃黏膜组织中p21、p27、p53和Rb蛋白的表达。结果 p21和p27蛋白表达水平在不典型增生组织最高,其次是胃癌组织,与正常胃黏膜组织相比差异均有显著性(P<0.001)。在胃癌组织中p21、p27、p53和Rb蛋白表达均高于正常胃黏膜组织(P均<0.01)。p21、p27蛋白表达与胃癌的类型和分化相关(P均<0.01),p53表达水平与患者的年龄、性别、胃癌的类型和患者的生存率相关。女性患者Rb蛋白表达明显高于男性,差异有显著性(P<0.05)。p21、p27、p53和Rb蛋白表达水平之间均呈正相关。结论 p21、p27、p53和Rb蛋白表达可以作为胃癌的辅助诊断指标,四种蛋白在判断胃癌的生物学行为上具有协同作用。

Survivin、p53、p21在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨抑癌基因Survivin、p53、p21在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学S-P法检测50例NSCLC组织及15例肺非癌组织中的Survivin、p53、p21蛋白的表达情况。结果:Survivin、p53、p21在NSCLC组织中的表达水平明显高于肺良性病变及癌旁组织;Survivin、p53、p21表达和TNM分期、淋巴结转移有关,而与不同的病理类型、性别无关。结论:Survivin、p53、p21与NSCLC的发生、发展有密切关系,与NSCLC的生长、浸润和转移有关;Sur-vivin、p53、p21可作为NSCLC的预后指标。

原发性肝细胞癌组织中p53和p21^(WAF/CIP1)及MDM2蛋白的表达及其临床意义

目的:探讨p53、p21WAF/CIP1及MDM2蛋白在原发性肝细胞癌(hepatocel-lularcarcinoma,HCC)组织中的表达及其临床病理意义。方法:选取115例HCC及其相应的癌旁肝组织构建组织芯片,应用免疫组织化学方法检测p53、p21WAF/CIP1及MDM2蛋白的表达,采用统计学分析它们的表达及其与临床病理参数之间的关系。结果:p53、p21WAF/CIP1及MDM2在HCC组织中的阳性表达率分别为83.5%(96/115)、36.5%(42/115)和48.7%(56/115),同癌旁组织相比,p53、p21WAF/CIP1及MDM2的表达均明显增高,P<0.05。两两相关分析比较,p53表达分别与p21WAF/CIP1和MDM2表达有关;p53、p21WAF/CIP1及MDM2的阳性表达率与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤数量、HB-sAg、病理分级、血清AFP浓度和患者生存时间均无关,P均>0.05。结论:p53、p21WAF/CIP1及MDM2在HCC组织中呈增高表达并具有一定的相关性,提示它们可能在HCC的发生发展中发挥重要的作用。

组蛋白乙酰化修饰对IEC-6恶性转化细胞细胞周期和p53、p21^(WAF1)基因表达的调控

目的分析和探讨IEC-6恶性转化细胞不同时期组蛋白乙酰化修饰对肿瘤发生相关基因表达的影响。方法采用我们已建立的3个转化期(化学致癌剂MNNG和诱导剂PMA共同作用6、12、24次)的IEC-6转化细胞进行培养,提取不同转化时期的IEC-6转化细胞的细胞核蛋白,采用免疫印迹检测H3乙酰化水平;并用ChIP及RT-PCR检测组蛋白H3乙酰化对p21WAF1表达的影响。结果24次IEC-6恶性转化细胞组蛋白H3乙酰化水平高于6次IEC-6转化细胞,而组蛋白H3去乙酰化水平低于6次IEC-6转化细胞;同时发现p21WAF1的启动子区PCR产物减少。在6、12次IEC-6转化细胞中均有较弱的p53、p21WAF1表达;在24次IEC-6恶性转化细胞中仍可检测到较弱的p53表达,但p21WAF1表达缺如。结论IEC-6恶性转化细胞过程中,组蛋白H3乙酰化水平增高,导致p21WAF1基因表达受抑,近而可能影响转化细胞的细胞周期。

P53、P21^(WAF1)和CDK1在卵巢上皮性癌组织中的表达及意义

背景与目的:P53、P21WAF1和CDK1是细胞周期中G2/M期DNA损伤检验点"P53通路"的关键因子,本研究拟探讨P53、P21WAF1和CDK1在卵巢上皮性癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学技术检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性上皮性肿瘤组织、76例卵巢上皮性癌组织中P53、P21WAF1、CDK1蛋白的表达,并分析卵巢上皮性癌组织中P53、P21WAF1、CDK1蛋白表达与其临床病理特征的关系以及各蛋白表达之间的相关性。结果:P53、P21WAF1和CDK1蛋白在卵巢上皮性癌中的阳性率与正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤相比其差异均有统计学意义(P<0.05),而在正常卵巢组织与良性卵巢肿瘤之间其阳性率差异均无统计学意义(P>0.05)。在卵巢上皮性癌中,临床分期越晚、组织分化越差,P53蛋白表达越高;随着临床分期的增加,P21WAF1蛋白表达逐渐降低;CDK1蛋白的表达与各临床病理特征无相关性。卵巢上皮性癌中P53蛋白和P21WAF1蛋白的表达与CDK1蛋白的表达呈负相关(r=-0.388,P=0.001;r=-0.282,P=0.014),P53蛋白与CDK1蛋白表达呈正相关(r=0.263,P=0.022)。结论:P53蛋白与卵巢上皮性癌的恶性程度相关,P53和P21WAF1蛋白可能与卵巢上皮性癌的恶性进展有关。检测CDK1可能有助于卵巢癌的早期诊断。

胃粘膜结肠型化生和小肠型化生对p21、p53、EGFR、PCNA及CEA的联合表达

目的 探讨胃粘膜的弱化生与胃癌之间的关系。方法 应用免疫组化S P法 ,检测胃粘膜结肠型及小肠型化生细胞中p2 1、p53、EGFR、PCNA和CEA的表达 ,并和胃癌组织及正常胃粘膜组织进行对照。结果 p2 1对判断细胞的癌变倾向有帮助 ,而p53仅在癌组织内才有明显表达 ,EGFR在胃癌组有明显表达 ,结肠型化生与小肠型化生有显著差异 ,CEA及PCNA在两型肠化生中的表达无显著差异。结论 结肠型化生较小肠型化生更易发生恶性转换。

阿霉素肾病小鼠肾组织中p53、p21表达及意义

目的探讨p53、p21在阿霉素肾病小鼠肾组织中的表达及意义。方法 将60只6周龄、雄性BALB/c小鼠随机分为阿霉素肾病模型组和对照组。两组分别于尾静脉注射阿霉素及生理盐水后第0、2、4、6周末随机选取6只小鼠处死,并检测24 h尿蛋白定量、血清白蛋白、血肌酐及总胆固醇。肾组织行HE、PAS染色,以半定量计分法计算各组肾小球硬化和肾小管间质损伤程度,免疫组化及RT-PCR法检测p53、p21蛋白及mRNA的表达。并分析p53、p21与其它指标的相关性。结果 从第2周开始模型组尿蛋白[(16.19±1.13) mg/24 h vs (2.02±0.47) mg/24 h]、总胆固醇[(7.56±1.10)mmol/L vs (2.17±0.15)mmol/L]明显高于对照组( P 均<0.05),白蛋白明显低于对照组[(19.63±1.28)g/L vs (36.77±1.81)g/L, P <0.05]。模型组肾小球硬化(0.535±0.116 vs 0.020±0.020, P <0.05)及肾小管间质损伤程度(1.133±0.136 vs 0.067±0.061, P <0.05)显著高于对照组,p53、p21蛋白及mRNA表达水平也显著高于对照组;模型组中p53、p21蛋白及mRNA表达水平分别与肾小球硬化、肾小管间质损伤、尿蛋白及总胆固醇呈正相关( r =0.877, r =0.830, r =0.456, r =0.576, P <0.05),与白蛋白呈负相关( r =-0.343, P <0.05)。结论 p53、p21在模型组第2周末即表达增加,且与病变程度呈正相关,提示衰老存在于阿霉素肾病,并参与疾病的发生、发展。