压力对大鼠纯化视网膜神经节细胞中bcl-2、bax及p53mRNA表达的影响

目的 :通过检测不同压力下纯化培养的大鼠视网膜神经节细胞 (Retinalganglioncells,RGCs)中bcl - 2 ,bax ,p5 3mRNA表达情况 ,了解压力对视网膜神经节细胞凋亡的影响。方法 :用SD系大鼠脑源性星型胶质细胞同化培养液双界面法[1] 培养羊抗鼠Thy1.1单克隆抗体纯化的SD系大鼠RGCs;在纯化培养的RGCs上分别施加 0 ,2 0mmHg ,4 0mmHg ,6 0mmHg和 80mmHg气压 ,培养 2 4h及 4 8h后TUNEL法检测各组细胞的凋亡 ,原位杂交检测细胞中bcl- 2 ,bax及p5 3mRNA的表达。结果 :纯化的RGCs培养 12h及 2 4h用羊抗鼠FITC -Thy - 1.1单克隆抗体进行鉴定阳性 ,纯度为 97%。传三代后星型胶质细胞用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)单克隆抗体标记和鉴定阳性。培养 2 4h组TUNEL法检测对照组极少数细胞凋亡 ,2 0mmHg组见较多细胞凋亡 ,随着压力的增高细胞凋亡数增多 ,凋亡指数增高 ;与对照组相比差异均有显著性。培养 4 8h组压力≥ 2 0mmHg各组较相同压力培养 2 4h组凋亡指数增高 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。压力≥ 4 0mmHg时bcl-2mRNA表达逐渐减少 ,压力≥ 2 0mmHg时bax及 p5 3mRNA表达则逐渐增加 ;与对照组相比均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 :高于 2 0mmHg压力时间超过 2 4h可激活体外培养的视网膜神经节细胞的相关凋亡基因导致细?

系统性红斑狼疮外周血单个核细胞p53基因及蛋白的表达

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)p53mRNA及蛋白表达水平变化,从而了解p53是否通过异常的凋亡调节参与SLE的发病。方法以SLE疾病活动指数(SLEDAI)评价疾病活动性,流式细胞术检测p53 蛋白,半定量RT PCR检测p53mRNA。结果(1)SLE患者PBMC p53蛋白表达水平显著高于正常人(P<0 05)。(2)活动期与缓解期SLE患者PBMC p53蛋白的表达无显著差异, p53 蛋白水平与SLEDAI评分无关(P>0 05)。(3)SLE患者PBMC p53mRNA表达量与阳性率与正常相比无显著性差异(P>0 05)。结论(1)p53蛋白通过增加表达量而导致异常的淋巴细胞凋亡参与SLE发病,但与疾病活动性无关。(2) SLE患者PBMCp53mRNA表达未见异常。

术前大黄素联合顺铂化疗对人食管鳞癌WIG-1mRNA的影响及其机制的研究

目的探讨术前大黄素联合顺铂化疗对人食管鳞癌野生型p53诱导基因1(WIG-1)mRNA的影响及机制。方法选择2017年3月～2018年10月我院收治的40例食管鳞癌患者作为研究对象,所有患者均经术前病理组织检查确诊。患者确诊后均给予大黄素联合顺铂进行术前化疗,连续治疗3个疗程后对患者行手术治疗,根据术中所取组织部位的不同,分为观察组和对照组,每组各20例。观察组术中取病灶组织,对照组术中取癌旁组织(距离肿瘤部位≥3 cm)。运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定两组患者组织中的WIG-1m RNA表达水平和观察组手术前后WIG-1mRNA的表达水平。结果观察组患者组织中的WIG-1mRNA表达水平为0.68±0.11,高于对照组的0.04±0.01,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者手术后食管鳞癌组织中的WIG-1mRNA表达水平为0.25±0.05,低于手术前的0.68±0.11,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 WIG-1mRNA在正常组织中表达水平较低,且术前大黄素联合顺铂化疗用于食管鳞癌患者中有助于降低WIG-1mRNA的表达水平,有助于改善患者的预后,能为食管鳞癌的治疗提供分子学依据。