慢性肾脏病NF-κB p65和炎性因子与动脉硬化的关系及HDF治疗对其影响

目的 探讨慢性肾脏病(CKD)患者体内核因子(NF)-κB p65和相关炎性因子水平与并发动脉硬化之间的关系及进行血液滤过透析(HDF)治疗对其产生影响。方法 随机选取肾功能正常的CKD1期患者(N组)40例N组,血液净化中心维持性血液透析(HD)CKD5D期患者80例,分别测定血清NF-κB p65和人单核细胞趋化蛋白(MCP)-1水平、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素(IL)-6、IL-8及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,同时B超测定患者颈动脉内-中膜厚度(IMT),以判断是否并发动脉硬化;之后CKD5D期患者随机分为在线(OL)HDF组及HD组,分别以OL HDF及HD进行治疗,治疗3个月后两组复测以上指标进行比较并再次进行颈动脉超声检查测定IMT。结果 与N组相比,HD组、HDF组治疗前血清IL-6、IL-8、TNF-α、hs-CRP、MCP-1、NF-κB p65水平均明显增高(P<0.01);NF-κB p65蛋白表达明显增高,发生动脉硬化比例也明显增高(P<0.05)。经3个月治疗后,HD组血清IL-6、IL-8、TNF-α、hs-CRP、MCP-1、NF-κB水平,NF-κB p65蛋白表达均无明显变化(P>0.05),仍明显高于N组,但HDF组上述指标较治疗前相比明显改善(P<0.05),NF-κB p65蛋白表达受抑制。3个月后HD组动脉硬化发生率明显增高(P<0.05),而HDF组减少,但无统计学差异(P>0.05)。结论 HDF治疗下调NF-κB p65蛋白表达,能明显减轻慢性肾衰患者的微炎症状态,减少动脉硬化的发生率,是维持性HD患者的必要治疗。

雷公藤甲素双向调控Nrf2/p65产生毒/效作用的机制研究

目的探索雷公藤甲素(TP)双向调控Nrf2/p65产生毒性与保护的双重作用及机制。方法通过小分子与蛋白质对接模拟,分析TP与Nrf2/p65的潜在作用关系。在细胞实验里,采用不同浓度的TP分别干预人正常肝脏细胞(L02)与小鼠肝库普弗细胞(KC),采用MTT法检测细胞存活率,Western blot检测Nrf2、HO1、p65、IL-6的蛋白表达;在动物实验里,采用TP干预糖尿病肾病(DN)模型大鼠,HE染色法检测大鼠肾脏病理,靛酚蓝比色法检测血清BUN,ELISA法检测血清炎症因子TNF-α、IL-6与IL-1β的含量变化,RT-qPCR检测肾组织中p65、podocin和Kim-1的mRNA水平,Western blot检测肾组织中p65的蛋白表达,免疫组化法观察肾组织细胞p65与Nrf2的蛋白表达情况。结果分子对接结果表明,TP与Nrf2及p65具有良好结合活性;体外实验表明,TP可以降低L02细胞存活率,呈剂量和时间依赖性降低Nrf2蛋白表达,降低KC细胞存活率,抑制Nrf2及其下游HO-1的表达,上调p65及IL-6的表达;动物实验表明,TP对DN大鼠有明显保护作用,降低大鼠肾组织中p65的mRNA及蛋白的表达,上调Nrf2蛋白的表达,下调血清中TNF-α、IL-6、IL-1β炎症因子水平。结论TP可以通过下调Nrf2蛋白表达,上调p65蛋白的表达对肝细胞造成毒性损伤;同时也可以上调Nrf2蛋白表达,下调p65蛋白与mRNA的表达而对DN大鼠产生保护作用,即对Nrf2/p65分子产生双向调控而表现毒性或药性。

TPPU通过抑制p38 MAPK/NF-κB p65信号通路对阿尔茨海默病细胞模型的抗神经炎症作用

目的在Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病(AD)小胶质细胞(BV2细胞)模型中,采用对BV2细胞进行干预,探讨1-三氟甲氧基苯基-3-(1-丙酰哌啶-4-基)脲(TPPU),TPPU是否具有抗神经炎症作用及其可能的抗炎机制。方法利用Aβ25-35作用BV2细胞构建AD细胞模型,CCK8法分别检测不同浓度Aβ25-35和TPPU处理对BV2细胞活性的影响,最终选择20μM Aβ25-35诱导BV2细胞48 h作为造模组,0.1μM TPPU预处理BV2细胞3h,20μM Aβ25-35诱导BV2细胞48 h作为治疗组进行后续实验。利用ELISA法检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,倒置荧光显微镜检测活性氧(ROS)产生,real-time PCR检测小胶质细胞M1表型促炎因子肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-1β(IL-1β)基因mRNA表达水平和检测M2表型抗炎因子IL-10及标志物Arg1基因mRNA表达水平。通过Western blot法检测细胞中炎症因子TNF-α蛋白及p38 MAPK/NF-κB p65信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组BV2细胞活力降低(P<0.05),ROS显著升高(P<0.05),MDA含量显著增多(P<0.05),SOD活性显著下降(P<0.05),TNF mRNA、IL-1βmRNA表达水平明显上调(P<0.05),IL-10 mRNA、Arg1 mRNA表达水平明显下调(P<0.05),TNF-α蛋白及p-p38 MAPK、p-NF-κB p65蛋白表达明显上调(P<0.05)。与模型组相比,经TPPU预处理后,BV2细胞活力明显升高(P<0.05),ROS显著降低(P<0.05),MDA含量显著下降(P<0.05),SOD活性显著提高(P<0.05),TNF mRNA、IL-1βmRNA表达水平明显下调(P<0.05),IL-10 mRNA、Arg1 mRNA表达水平明显上调(P<0.05),TNF-α蛋白及p-p38 MAPK、p-NF-κB p65蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论TPPU抑制Aβ25-35诱导的BV2细胞炎症反应,促进BV2细胞由M1表型向M2表型极化,其机制可能与抑制p38MAPK/NF-κB p65信号通路激活有关。

腹主动脉瘤患者血清转胶蛋白、基质金属蛋白酶9和核因子-κB p65水平检测及意义

目的:检测腹主动脉瘤(AAA)患者血清转胶蛋白(TAGLN)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和核因子-κB(NF-κB)p65水平变化,探讨其临床意义。方法:通过酶联免疫吸附法检测肾下AAA患者80例(AAA组)及体检健康者50例(健康组)血清TAGLN、MMP-9和NF-κB p65水平并进行比较。分析三者间的相关性,分析三者对AAA的诊断价值。结果:健康组血清TAGLN水平高于AAA组,MMP-9和NF-κB p65水平低于AAA组(均P<0.05)。血清TAGLN与MMP-9和NF-κB p65呈负相关(r=-0.196、-0.364,均P<0.05),MMP-9与NF-κB p65呈正相关(r=0.213,P=0.015)。TAGLN、MMP-9和NF-κB p65联合诊断AAA的曲线下面积(AUC)高于任意单独指标,而敏感度和特异度不低于任意单独指标(均P<0.05)。结论:AAA患者血清TAGLN水平升高,MMP-9和NF-κB p65水平降低,三者联合检测对AAA的诊断具有较高价值。

归原疏筋合剂治疗腰椎间盘突出症的临床疗效及对血清NF-κB p65表达水平的影响

【目的】探究归原疏筋合剂治疗腰椎间盘突出症(LDH)患者的临床疗效及其可能的作用机制。【方法】将68例气滞血瘀证LDH患者随机分为试验组和对照组,每组各34例。对照组给予塞来昔布及甲钴胺片内服治疗,试验组在对照组的基础上加用归原疏筋合剂内服治疗,疗程为4周。观察2组患者治疗前后腰痛和下肢痛视觉模拟量表(VAS)评分、Oswestry功能障碍指数(ODI)评分、改良日本骨科协会(JOA)评分以及血清炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)]和血清核因子κB p65(NF-κB p65)水平的变化情况,并评价2组患者的临床疗效和用药安全性。【结果】(1)脱落情况方面,研究过程中,试验组脱落1例,对照组脱落3例,最终试验组33例、对照组31例纳入疗效统计。(2)疗效方面,治疗4周后,试验组的总有效率为96.97%(32/33),对照组为87.10%(27/31);组间比较(秩和检验),试验组的疗效明显优于对照组(P<0.05)。(3)量表评分方面,治疗后,2组患者的腰痛及下肢痛VAS评分、ODI评分均较治疗前降低(P<0.05或P<0.01),改良JOA评分均较治疗前升高(P<0.01),且试验组对腰痛及下肢痛VAS评分、ODI评分的降低幅度及对改良JOA评分的升高幅度均明显优于对照组(P<0.05或P<0.01)。(4)血清炎症相关指标方面,治疗后,2组患者血清TNF-α、IL-6、IL-1β、NF-κB p65水平均较治疗前降低(P<0.01),且试验组的降低幅度均明显优于对照组(P<0.01)。(5)安全性方面,治疗过程中,试验组的不良事件发生率为2.94%(1/34),对照组为8.82%(3/34),组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】归原疏筋合剂治疗气滞血瘀证LDH患者疗效确切,可有效缓解患者疼痛症状,改善患者腰椎功能,降低血清炎症因子及NF-κB p65表达水平,其作用机制可能与降低炎症因子水平,抑制NF-κB信号通路的活化有关。

基于NF-κBp65信号通路探索PRMT5靶向调控RPA2对肺腺癌细胞活性和侵袭能力的影响

目的基于NF-κB p65信号通路探索蛋白精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)靶向调控复制蛋白A2(RPA2)对肺腺癌细胞活性和侵袭能力的影响。方法选择肺腺癌细胞株A549、H1299,随机分为空白对照组、质粒对照组、RPA2高表达组、PRMT5沉默组、PRMT5沉默+RPA2高表达组。质粒对照组予阴性对照siRNA转染,RPA2高表达组予pcDNA3.1/RPA2转染,PRMT5沉默组予PRMT5 siRNA转染,PRMT5沉默+RPA2高表达组予PRMT5 siRNA和pcDNA3.1/RPA2转染,然后用嘌呤霉素筛选获得稳定转染细胞。空白对照组常规培养,不予转染。收集各组细胞,采用CCK-8法检测细胞活性,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,采用Western blotting法检测PRMT5、RPA2以及p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达。结果在A549细胞和H1299细胞中,RPA2高表达组PRMT5、RPA2蛋白表达及细胞活性、侵袭能力均高于空白对照组和质粒对照组,PRMT5沉默组PRMT5、RPA2蛋白表达及细胞活性、侵袭能力均低于空白对照组和质粒对照组(P均<0.05);PRMT5沉默组和PRMT5沉默+RPA2高表达组PRMT5、RPA2蛋白表达及细胞活性、侵袭能力均低于RPA2高表达组(P均<0.05);PRMT5沉默+RPA2高表达组PRMT5、RPA2蛋白表达及细胞活性、侵袭能力均高于PRMT5沉默组(P均<0.05)。在A549细胞和H1299细胞中,RPA2高表达组p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达均低于空白对照组和质粒对照组,PRMT5沉默组p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达均高于空白对照组和质粒对照组(P均<0.05);PRMT5沉默组和PRMT5沉默+RPA2高表达组p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达均高于RPA2高表达组(P均<0.05);PRMT5沉默+RPA2高表达组p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达均低于PRMT5沉默组(P均<0.05)。结论PRMT5可通过靶向调控RPA2增强肺腺癌细胞活性和侵袭能力,其作用机制可能与激活NF-κB p65信号通路有关。

SIRT2、P65和Survivin在乳腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的通过检测SIRT2、P65和生存素(Survivin)蛋白在乳腺癌中的表达,探讨其在乳腺癌中的相互关系及与乳腺癌的临床病理特征的关系。方法384例乳腺浸润性癌患者作为乳腺癌组,31例乳腺纤维腺病患者作为对照组,采用免疫组化EnVision二步法检测两组乳腺病变组织内SIRT2、P65、Survivin的蛋白表达,同时收集乳腺癌组患者相关临床病理特征资料(年龄、分子分型、TNM分期、组织学分级、淋巴结转移及月经情况),分析SIRT2、P65及Survivin蛋白在乳腺癌组中的表达与临床病理特征的关系,分析SIRT2、P65及Survivin蛋白在乳腺癌组表达的相关性。结果乳腺癌组中SIRT2、Survivin蛋白高表达,表达率均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);SIRT2、P65及Survivin蛋白在不同分子分型、TNM分期乳腺癌患者的高表达,差异有统计学意义(P<0.05);SIRT2蛋白在LuminalB1型中的高表达率高于其他分型(P<0.05),P65蛋白在LuminalA型中的高表达率高于其他分型(P<0.05),Survivin蛋白在HER-2阳性型的高表达率高于其他分型(P<0.05);SIRT2、P65及Survivin蛋白在TNM分期中Ⅲ~Ⅳ期高表达率较Ⅰ~Ⅱ期高(P<0.05);SIRT2和P65蛋白在淋巴结转移与非转移乳腺癌患者间的高表达,差异有统计学意义(P<0.05),其中转移的高表达率较非转移高;P65和Survivin蛋白在不同组织学分级乳腺癌患者间高表达,差异有统计学意义(P<0.05),其中Ⅰ级的高表达率较Ⅱ、Ⅲ级高;乳腺癌组中SIRT2与P65和Survivin蛋白表达均呈正相关(r分别为0.371和0.310,P<0.001),P65与Survivin蛋白表达呈正相关(r=0.466,P<0.001)。结论乳腺癌组织存在SIRT2及Survivin蛋白表达上调,这可能是影响乳腺癌组织学分级及TNM分期、分子分型等临床病理特征的机制。

Liu-Jun-Zi decoction alleviates chemotherapy-induced anorexia by regulating gut microbiota and TLR4/MyD88/NF-κB p65 signaling pathway

Background:Liu-Jun-Zi decoction(LJZD),a classical nourishing formula in China,has been proven to be effective in treating chemotherapy-induced anorexia.In this study,the mechanism of LJZD in alleviating chemotherapy-induced anorexia was discussed from the aspects of regulating gut microbiota,repairing intestinal barrier injury and inhibiting inflammatory pathways.Methods:A rat model of chemotherapy-induced anorexia was established using cisplatin.The study evaluated the therapeutic effects of LJZD by observing the weight,food intake,and intestinal pathology of rats.The impact of LJZD on gut microbiota and metabolites,specifically short-chain fatty acids,was investigated through gut microbiota analysis and targeted metabolomics.The anti-inflammatory and intestinal protective effects of LJZD were assessed by examining the expression of intestinal tight junction proteins associated with the inflammatory pathway.Results:LJZD alleviated cisplatin-induced inflammation and intestinal barrier disruption,as evidenced by upregulated expression of tight junction protein 1(TJ-1)and occludin,along with reduced serum levels of interleukin 6(IL-6),interleukin-1β(IL-1β),tumor necrosis factor-α(TNF-α),and lipopolysaccharide.Additionally,LJZD alleviated microbiota imbalance and regulated the levels of short-chain fatty acids,especially increased the relative abundance of Coriobacteriales Incertae Sedis,Lactabacillus johnsonii F19785,Parasutterella,and reduced the Tyzzerella.In the hypothalamus,LJZD exerts suppressive effects on the toll-like receptor 4(TLR4)/myeloid differentiation factor 88(MyD88)/nuclear factor-κB(NF-κB)p65 signaling pathway,leading to a downregulation in the transcriptional activity of IL-6 and IL-1β,as well as Interleukin 6 receptors(IL-6R)and Interleukin-1βreceptors(IL-1R1)mRNA expression levels.Conclusion:In summary,LJZD alleviate chemotherapy-induced anorexia by modulating the gut microbiota,repairing the intestinal mechanical barriers,and suppressing the TLR4/MyD88/NF-κB p65 signaling pathway.

超早期小骨窗微创术治疗高血压脑出血疗效及对核因子-κB p65通路的影响

目的:分析超早期小骨窗微创术治疗高血压脑出血的疗效及对核因子-κB p65(NF-κB p65)通路的影响。方法:选取高血压脑出血86例,根据手术时间不同分为观察组(46例,发病6 h内进行小骨窗微创颅内血肿清除术)和对照组(40例,发病6~24 h内进行小骨窗微创颅内血肿清除术)。比较两组临床疗效、围手术期指标、脑血流灌注指标、脑组织创伤应激指标、NF-κB p65通路相关因子以及并发症发生情况。结果:与对照组比较,观察组总有效率更高(P<0.05)。与对照组比较,观察组术中出血量更高,但意识恢复时间、下床时间、住院时间更短(均P<0.05)。与术前比较,术后7 d两组大脑中动脉舒张压末期血流速度(EDV)、收缩期峰值流速(PSV)水平以及血清脑源性神经营养因子(BDNF)水平升高,且观察组更高;两组大脑中动脉阻力指数(RI)、患侧颈总动脉外周阻力(R)降低,血清血清神经肽Y(NPY)、星形胶质源性蛋白(S100β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、NF-κB p65水平降低,且观察组更低(均P<0.05)。观察组并发症总发生率低于对照组(P<0.05)。结论:相对于发病6~24 h进行手术,发病6 h内的超早期小骨窗微创术疗效更好,不但可以改善患者围手术期指标,降低创伤应激,改善脑血流灌注,还可以调控NF-κB p65通路,安全性更高。

TLR4/NF-κB p65高表达对皮肤鳞状细胞癌增殖、侵袭和转移的影响

目的探讨与分析Toll样受体4(Toll-like recepTor 4,TLR4)/核因子KappaB(NF-κB)p65高表达对皮肤鳞状细胞癌增殖、侵袭和转移的影响。方法对数生长期的人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株分为三组,空白组、对照组与实验组,分别转染DMEM培养基、pc3.0空载体、pc3.0-TLR4NF-κB p65载体,检测皮肤鳞状细胞癌增殖、侵袭和转移表达情况。结果转染24 h、48 h后,实验组的TLR4、NF-κB p65 RNA表达水平显著高于空白组与对照组,差异有统计学意义(P<0.05),空白组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。实验组的细胞增殖指数显著低于空白组与对照组,差异有统计学意义(P<0.05),对照组与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。实验组的细胞侵袭指数与细胞转移指数都明显低于空白组与对照组,差异有统计学意义(P<0.05),对照组与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。实验组的Caspase-9/Myc蛋白表达水平显著高于空白组与对照组,差异有统计学意义(P<0.05),空白组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论TLR4/NF-κB p65高表达能抑制皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖、转移与侵袭,也可促进Caspase-9/Myc蛋白的表达,从而发挥促进肿瘤细胞凋亡的作用。

苍附导痰汤对肥胖型PCOS-IR模型大鼠卵巢TLR4/NF-κB p65信号通路的影响

目的 探讨苍附导痰汤对肥胖型PCOS-IR (polycystic ovarian syndrome-insulin resistance, PCOS-IR)模型大鼠卵巢Toll受体4(TLR4)/核转录因子κB p65(NF-κB p65)信号通路的调控作用。方法 48只♀大鼠随机分为正常组8只和模型组40只。来曲唑(1 mg·kg^(-1))联合高脂饮食建立肥胖型PCOS-IR大鼠模型,快速革兰染色法观察动情周期,挑选24只模型大鼠随机分为:模型组、阳性药(二甲双胍135 mg·kg^(-1))组、苍附导痰汤高、低剂量(57.96、14.49 g·kg^(-1))组,每组各6只,药物干预21 d。观察动情周期、卵巢和子宫指数变化;血液生化仪测定空腹血糖(FBG)和血脂(甘油三酯TG和总胆固醇TC)变化;酶联免疫吸附(ELISA)法测定空腹胰岛素(FINS)水平;免疫组化法和荧光定量PCR法检测卵巢中TLR4和NF-κB p65蛋白及基因的表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠动情周期紊乱,卵巢多囊性改变明显,FBG、TG、TC含量和FINS、HOMA-IR水平上调,卵巢中TLR4和NF-κB p65蛋白及mRNA表达均增加(P<0.05);与模型组比较,苍附导痰汤高剂量组大鼠排卵周期得到改善,卵巢多囊性改变减轻,上述指标出现明显逆转(P<0.05)。结论 苍附导痰汤能有效改善肥胖型PCOS-IR大鼠卵巢排卵和糖脂代谢功能,作用机制可能与调控卵巢TLR4/NF-κB p65信号通路有关。

青蒿鳖甲汤加减治疗癌性发热疗效及对NF-κB p65蛋白、IL-6、IL-10、TNF-α的影响

目的 探讨青蒿鳖甲汤加减治疗癌性发热疗效及对核因子κB p65(Nuclear factor-kappaBp65,NF-kappaB p65)蛋白、白细胞介素-10(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-6(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)的影响。方法 选取诊治的癌性发热患者100例,随机分为对照组与观察组,每组50例,对照组常规西药治疗,观察组采用青蒿鳖甲汤加减治疗,治疗时间7 d,观察退热效果、治疗前血清总NF-κB p65蛋白及活性NF-κB p65蛋白、IL-6、IL-10、TNF-α变化。结果 观察组体温开始下降时间、体温恢复正常时间短于对照组,每次退热持续时间长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前血清总NF-κB p65蛋白及活性NF-κB p65蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗均下降,且观察组下降幅度大于对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前血清IL-6、IL-10、TNF-α水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗均下降,且观察组下降幅度大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应发生率为18.00%(9/50)、对照组为14.00%(7/50),差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗疗效整体优于对照组(P<0.05),治疗总有效率为96.00%(48/50),高于对照组的80.00%(40/50)(P<0.05)。结论 青蒿鳖甲汤加减治疗癌性发热退热效果显著,能够缩短患者体温恢复正常的时间,改善NF-κB p65蛋白、IL-6、IL-10、TNF-α水平。

苗药五香血藤提取物对慢性非细菌性前列腺炎大鼠NF-κB P65、iNOS表达的影响

目的观察苗药五香血藤提取物对慢性非细菌性前列腺炎(CAP)大鼠核因子(NF)-κB P65、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法健康雄性成年SD大鼠60只,随机分为正常组、CAP模型组、阳性药物组、苗药五香血藤提取物高(高剂量组)、中(中剂量组)、低(低剂量组)剂量组,每组10只。注射消痔灵进行大鼠造模,造模7 d,之后阳性药物组给予前列舒通胶囊水溶液灌胃治疗,苗药五香血藤提取物高、中、低剂量组分别给予252、126、63 mg/kg剂量灌胃治疗,正常组和模型组给予无菌生理盐水灌胃,每天灌胃1次,连续给药28 d;于末次给药后2 h股动脉取血处死大鼠,采用Western印迹检测前列腺组织NF-κB P65、iNOS蛋白表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-8水平,观察前列腺组织病理学改变等。结果给药结束后,与CAP模型组比较,各组前列腺组织内NF-κB P65、iNOS蛋白相对表达量、血清中TNF-α、IL-6和IL-8含量均出现不同程度的降低,而高剂量组与阳性药物组的差异性不显著(P>0.05),并逐渐接近正常组水平;前列腺指数比较显示,除低剂量组外其余各组前列腺指数均明显低于模型组(P<0.05),而高剂量组与阳性药物组的差异性不显著(P>0.05);脏器指数比较显示,高剂量组和阳性药物组的肝、肾脏器指数均明显高于正常组和模型组(P<0.05);病理观察显示,高剂量组前列腺组织的腺体上皮细胞排列整齐,无明显增生,纤维组织增生及炎症细胞渗出病变明显减轻,病理改变接近阳性药物组。结论苗药五香血藤提物能够通过抑制NF-κB P65、iNOS蛋白表达,降低血清中TNF-α、IL-6和IL-8含量,对前列腺组织炎症起到缓解作用。

降糖方对糖耐量异常大鼠糖脂代谢及骨骼肌组织IκB-α和NF-κBp65的影响

目的:探讨降糖方对糖耐量异常大鼠糖脂代谢及骨骼肌组织κB抑制蛋白α(IκB-α)、核转录因子肽p65(NF-κBp65)的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸二甲双胍组、降糖方低、高剂量组,采用高脂饮食喂养4周,链脲佐菌素(STZ)腹膜内注射建立糖耐量异常大鼠模型,治疗8周后,观察骨骼肌组织病理变化,测定空腹血糖(FPG)、血清胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、骨骼肌组织IκB-α mRNA、NF-κBp65 mRNA水平、骨骼肌组织白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白水平。结果:正常组大鼠骨骼肌组织结构正常,模型组骨骼肌排列紊乱、肌纤维断裂、可见明显炎症细胞浸润;盐酸二甲双胍及降糖方干预后,骨骼肌炎症细胞浸润减少,肌纤维排列趋于整齐。模型组大鼠FPG、FINS、HOMA-IR水平、血清TG、TC、LDL-C水平、骨骼肌IκB-α mRNA、NF-κBp65 mRNA和蛋白水平、骨骼肌组织IL-4、IL-12、TNF-α蛋白水平高于对照组(P<0.01);盐酸二甲双胍组、降糖方低、高剂量组大鼠FPG、FINS、HOMA-IR水平,血清TG、TC、LDL-C水平,骨骼肌IκB-α mRNA、NF-κBp65 mRNA和蛋白水平、骨骼肌组织IL-4、IL-12、TNF-α蛋白表达水平低于模型组(P<0.01)。结论:降糖方对糖耐量异常大鼠糖脂代谢具有明显改善作用,其机制可能与降糖方抑制骨骼肌IκB-α mRNA、NF-κBp65 mRNA和蛋白的表达有关。

尖锐湿疣患者皮损组织中Toll样受体4、核因子κB p65蛋白表达及临床意义

目的探讨尖锐湿疣患者皮损组织中Toll样受体4(TLR4)、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达及临床意义。方法选取2020年1月至2022年8月在江苏省南通市第三人民医院(以下简称“我院”)治疗的尖锐湿疣患者92例作为观察组,另选取同期于我院行包皮环切术的成年男性55例及外阴整形术的成年女性37例作为对照组,采用免疫组织化学染色检测观察组的皮损组织及对照组的皮肤组织中TLR4、NF-κB p65蛋白表达,比较两组TLR4、NF-κB p65蛋白表达的差异,并进一步分析观察组不同临床特征患者TLR4、NF-κB p65蛋白表达的差异。结果观察组TLR4、NF-κB p65蛋白表达阳性率高于对照组(P<0.05)。病程≥3个月、疣体数目≥10个、疣体最大直径≥10 mm患者的TLR4蛋白表达阳性率高于病程<3个月、疣体数目<10个、疣体最大直径<10 mm患者(P<0.05)。疣体数目≥10个、疣体最大直径≥10 mm患者NF-κB p65蛋白表达阳性率高于疣体数目<10个、疣体最大直径<10 mm患者(P<0.05)。结论尖锐湿疣患者皮损组织中TLR4、NF-B p65蛋白呈高表达,可能与疣体数目、疣体最大直径及病程有关。

逍遥散对雷公藤多苷致胃黏膜损伤大鼠TNF-α、IL-1β、NF-κB P65表达的影响

目的:研究逍遥散对雷公藤多苷致大鼠胃黏膜损伤的治疗效果及机制。方法:将24只SD大鼠随机分为空白对照组、雷公藤多苷组、逍遥散组,每组8只。雷公藤多苷组和逍遥散组通过灌胃雷公藤多苷混悬液(0.037 5 g·kg^(-1))制备胃黏膜损伤模型大鼠,逍遥散组在灌服雷公藤多苷混悬液1 h前灌服逍遥散水煎液(19.27 g·kg^(-1)),给药每日1次,持续5周。观测各组大鼠体质量、摄食量;采用苏木素-伊红染色法(HE)观察各组大鼠胃黏膜病理变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化;免疫组化、实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(WB)检测胃黏膜IL-1β、TNF-α、核转录因子-κB P65(NF-κB P65)蛋白和基因表达。结果:胃黏膜损伤模型大鼠体质量及摄食量明显低于正常大鼠,胃黏膜细胞排列紊乱,腺上皮萎缩呈囊状,黏膜层变薄,毛细血管充血明显,细胞发生水肿现象,肠上皮化生明显,黏膜固有层内有大量中性粒细胞浸润,核分裂多见,核大深染,异型性明显,细胞增生、细胞凋亡与坏死明显,血清中IL-1β、TNF-α含量升高(P <0.05),胃黏膜IL-1β、TNF-α、NF-κB P65蛋白与基因表达增加(P <0.05)。逍遥散干预后,大鼠体质量及摄食量增加,大鼠胃黏膜病理形态有不同程度减轻,血清中IL-1β、TNF-α含量降低(P <0.05),胃黏膜IL-1β、TNF-α、NF-κB P65蛋白与基因表达降低(P <0.05)。结论:逍遥散可在一定程度上缓解雷公藤多苷所致胃黏膜损伤,其机制可能与调节IL-1β、TNF-α、NF-κB P65的异常表达、减轻炎症级联反应有关。

左归丸对5/6肾切除大鼠IL-1β、p65及胸主动脉钙化的影响

目的:观察左归丸对5/6肾切除大鼠IL-1β、p65及胸主动脉钙化的影响。方法:SPF级Wistar雄性大鼠予以5/6肾切除并给予高磷饮食造模,造模大鼠分为模型组、左归丸组,并同时设空白对照组。术后空白对照组予以普通饮水,模型组和左归丸组予以高磷饮水。术后4周空白对照组和模型组给予灭菌注射用水灌胃,左归丸组行左归丸水溶液灌胃,共8周。灌胃8周后处死大鼠,检测血清BUN、Scr、IL-1β,免疫组化检测胸主动脉IL-1β、p65表达,von kossa染色观察胸主动脉钙化情况。结果:给药8周后,空白对照组和左归丸组BUN与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组和左归丸组Scr与模型组比较,差异有统计学意义(分别为P<0.01,0.05)。空白对照组和左归丸组IL-1β与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。空白对照组大鼠各组IL-1β、p65在动脉血管壁几乎无表达,模型组大鼠表达明显,左归丸组大鼠与空白对照组比较增加,但明显少于模型组;von kossa染色观察空白对照组大鼠胸主动脉中内膜层无明显钙盐沉积,模型组大鼠主动脉钙盐沉积明显,左归丸组钙盐沉积较模型组明显减轻。结论:中药左归丸能够改善5/6肾切除大鼠胸主动脉钙化,其机制可能与抑制IL-1β、p65炎性因子表达有关。

猪脱细胞真皮基质对大鼠瘘管模型的修复作用及其对TGF-β1/NF-κB p65信号通路的影响

目的:观察猪脱细胞真皮基质对大鼠瘘管模型创面的修复作用,以及对TGF-β1/NF-κB p65信号通路的影响,探讨其可能的修复机制。方法:40只健康SD大鼠适应性喂养1周后,随机分为假手术对照组、模型组、猪脱细胞真皮基质组(真皮组)、瘘管栓阳性对照组(瘘管栓组),每组10只。连续给予相应材料治疗2周后,采用ELISA法检测血清中白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)和前列腺素E2(PGE2)含量;取大鼠创面组织进行病理观察;Western blot法检测创面组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)及VEGF蛋白表达水平。结果:与模型组相比,治疗2周后真皮组和瘘管栓组大鼠的体质量明显增加(P<0.05),创面脓液明显减少。真皮组中血清IL-1β、IL-6和PGE2的含量比模型组低(P<0.05),VEGF含量比模型组高(P<0.05)。HE染色显示,与模型组相比,真皮组炎细胞浸润明显减少,胶原纤维明显增多并且更加致密。真皮组及瘘管栓组大鼠的创面组织TGF-β1和VEGF蛋白表达增加,NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.05)。结论:猪脱细胞真皮基质可抑制大鼠瘘管创口组织炎症反应,促进血管新生及伤口愈合,且其促进胶原纤维生成的作用较瘘管栓更加明显,其机制可能与调控TGF-β1/NF-κB p65信号通路有关。

推拿按揉环跳穴对坐骨神经痛大鼠脊髓背角NF-κB p65蛋白的干预作用

目的:观察推拿按揉环跳穴对坐骨神经慢性压迫损伤(chronic constriction injury,CCI)模型大鼠的镇痛作用,探讨推拿对坐骨神经痛大鼠的镇痛机制。方法:选用32只体重180~220g SPF级别的SD雄性大鼠,随机分成空白组(不予以任何处理)、假手术组(只暴露不结扎坐骨神经)、模型组(结扎坐骨神经)和推拿组(结扎坐骨神经后予以手法干预)。通过结扎大鼠右侧坐骨神经制备CCI模型,于造模第3天开始对推拿组大鼠推拿按揉环跳穴干预,连续干预14 d,观察造模前及造模后第1、3、7、10、14、17天大鼠机械痛域(paw withdrawal threshold,PWT)、热痛阈(paw withdrawal latency,PWL);观察造模前、造模后第1和17天右侧坐骨神经功能指数(sciatic functional index,SFI)的变化;用苏木精伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色方法观察坐骨神经形态学的变化;并观察大鼠右侧脊髓背角NF-κB蛋白表达的差异。结果:在造模后,空白组和假手术组的PWT、PWL和SFI差异均无统计学意义(P>0.05),造模后模型组和推拿组的PWT、PWL和SFI显著下降(P<0.01)。在手法干预后,推拿组大鼠的痛阈值上升,在手法干预第8天(即造模第10天),推拿组较模型组PWT显著上升,差异有统计学差异(P<0.01);在手法干预第5天(即造模第7天),推拿组PWL较模型组显著上升,差异有统计学意义(P<0.01);推拿组大鼠痛阈值随着手法干预持续而继续上升。手法干预14天后,推拿组大鼠坐骨神经功能指数显著上升(P<0.01)。与空白组、假手术组比较,模型组大鼠坐骨神经有髓神经纤维排列紊乱,轴索、髓鞘密度不均匀;与模型组比较,推拿组大鼠神经纤维逐渐连续,轴索、髓鞘较模型组均匀。与空白组、假手术组比较,模型组大鼠右侧脊髓背角NF-κB蛋白表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,推拿组大鼠右侧脊髓背角NF-κB蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论:推拿按揉环跳穴能恢复神经纤维的排列;并通过降低脊髓背角的NF-κB p65蛋白表达来提高CCI模型的PWT、PWL和SFI,从而起到镇痛的作用,并改善大鼠步态。

基于NF-κB p65信号通路探讨金汁修复受损的小鼠肠黏膜上皮细胞的机制

目的观察金汁含药血清对脂多糖(LPS)诱导的小鼠肠黏膜上皮细胞自噬相关蛋白及NF-κB p65信号通路的影响,探讨其对肠黏膜上皮细胞的保护作用机制。方法选择雄性BALB/c小鼠制备空白血清和不同浓度(10%,15%,20%)的金汁含药血清。将LPS诱导的体外培养的小鼠肠黏膜上皮细胞随机分成空白组、模型组(LPS+空白血清)及金汁低含药血清组(LPS+10%金汁含药血清)、金汁中含药血清组(LPS+15%金汁含药血清)、金汁高含药血清组(LPS+20%金汁含药血清),各组干预24 h后,用透射电镜观察肠黏膜上皮细胞自噬情况,q-PCR法检测细胞中LC3A、LC3B mRNA表达情况,Western blot法检测细胞中LC3Ⅰ/LC3Ⅱ、p65、p-p65表达情况,ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果与空白组比较,模型组细胞内的双层膜结构明显减少,细胞中LC3A、LC3B mRNA相对表达量及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ均明显降低(P均<0.05),p65、p-p65相对表达量及IL-1β、IL-6、TNF-α含量均明显升高(P均<0.05)。与模型组比较,金汁高含药血清组自噬体明显增多;金汁高含药血清组LC3A mRNA相对表达量和金汁低、中、高含药血清组LC3B mRNA相对表达量及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ均明显升高(P均<0.05),金汁低、中、高含药血清组细胞中p65、p-p65相对表达量和金汁中、高含药血清组IL-1β、IL-6、TNF-α含量均明显降低(P均<0.05)。结论金汁含药血清可通过抑制NF-κB p65信号通路,促进肠黏膜上皮细胞自噬而修复受损的小鼠肠黏膜上皮细胞。