基于HIF-1α/VEGF通路探讨土家族麝针疗法“活血生新”干预缺血性脑卒中大鼠的作用机制

目的 探讨土家族麝针疗法对缺血性脑卒中大鼠运动功能的康复作用,分析缺氧诱导因子(HIF)-1α/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路在缺血性脑卒中发生、发展和转归中的作用机制。方法 采用改良线栓法复制缺血性脑中风大鼠模型。筛选Zea-longa评分为1~3分的大鼠,随机分为模型组、土家族麝针组、针刺组,另设立假手术组,每组15只,土家族麝针组以自制麝针刺激大鼠对侧头皮运动区肌层;针刺组以普通针灸同法治疗,持续治疗3个疗程。假手术组和模型组不做任何处理。在治疗前和每个疗程治疗结束后,每组随机选取6只大鼠进行平衡木实验检测其神经运动功能变化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中的VEGF和HIF-1α含量;Western印迹检测海马中VEGF受体(VEGFR)2与酪氨酸蛋白激酶家族成员(Src)蛋白的表达。结果 治疗前,与假手术组相比,模型组、土家族麝针组和针刺组运动功能明显降低,血浆中VEGF和HIF-1α含量明显增高(P<0.05);治疗3个疗程后,与模型组比较,麝针组和针刺组的运动功能明显提高,血浆中HIF-1α和VEGF含量明显升高,大鼠海马中VEGFR2相对表达量明显升高,Src蛋白相对表达量明显降低(P<0.05);与针刺组相比,麝针组神经运动功能恢复明显较好,血浆中VEGF和HIF-1α含量明显高于针刺组(P<0.05)。麝针组海马中VEGFR2相对表达明显升高,Src蛋白相对表达明显降低(P<0.05)。结论 土家族麝针疗法对缺血性脑卒中所致运动功能障碍的康复有明显促进作用,可能是通过调节HIF-1α/VEGF信号通路以“活血化瘀生新”而实现的。

食欲素-B对急性缺血性脑卒中大鼠睡眠促进及神经保护作用

目的探讨食欲素-B对急性缺血性脑卒中大鼠的睡眠促进及神经保护作用。方法建立急性缺血性脑卒中模型,将大鼠随机分为模型组、食欲素-B组和假手术组各36只。食欲素-B组在造模时向侧脑室内注射10μg食欲素-B溶液,假手术组和模型组注射等量磷酸盐缓冲液(PBS),连续给药3 d后处死大鼠。2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死体积,测量脑含水量、神经功能障碍评分,脑立体定位仪检测非快眼动睡眠(NREMS)潜伏期和快眼动睡眠(REMS)潜伏期评价睡眠质量,并检测氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO),Western印迹检测p65/缺氧诱导因子(HIF)-1α信号通路蛋白p65、HIF-1α的表达。结果假手术组无明显梗死灶,模型组和食欲素-B组大鼠梗死灶体积、脑组织含水量、神经功能评分均高于假手术组,食欲素-B组大鼠梗死灶体积、脑组织含水量、神经功能评分低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。与假手术组相比,模型组和食欲素-B组NREMS潜伏期延长,REMS潜伏期缩短,且食欲素-B组NREMS潜伏期短于模型组,REMS潜伏期长于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与假手术组相比,模型组和食欲素-B组SOD、GSH降低,MDA、NO升高,且食欲素-B组SOD、GSH高于模型组,MDA、NO低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与假手术组相比,模型组和食欲素-B组p65、HIF-1α蛋白表达升高,且食欲素-B组p65、HIF-1α蛋白低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论食欲素-B可以促进急性缺血性脑卒中大鼠睡眠,发挥神经保护作用,其作用机制可能与调节p65/HIF-1α信号通路相关。