青蒿鳖甲汤加减治疗癌性发热疗效及对NF-κB p65蛋白、IL-6、IL-10、TNF-α的影响

目的 探讨青蒿鳖甲汤加减治疗癌性发热疗效及对核因子κB p65(Nuclear factor-kappaBp65,NF-kappaB p65)蛋白、白细胞介素-10(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-6(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)的影响。方法 选取诊治的癌性发热患者100例,随机分为对照组与观察组,每组50例,对照组常规西药治疗,观察组采用青蒿鳖甲汤加减治疗,治疗时间7 d,观察退热效果、治疗前血清总NF-κB p65蛋白及活性NF-κB p65蛋白、IL-6、IL-10、TNF-α变化。结果 观察组体温开始下降时间、体温恢复正常时间短于对照组,每次退热持续时间长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前血清总NF-κB p65蛋白及活性NF-κB p65蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗均下降,且观察组下降幅度大于对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前血清IL-6、IL-10、TNF-α水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗均下降,且观察组下降幅度大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应发生率为18.00%(9/50)、对照组为14.00%(7/50),差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗疗效整体优于对照组(P<0.05),治疗总有效率为96.00%(48/50),高于对照组的80.00%(40/50)(P<0.05)。结论 青蒿鳖甲汤加减治疗癌性发热退热效果显著,能够缩短患者体温恢复正常的时间,改善NF-κB p65蛋白、IL-6、IL-10、TNF-α水平。

推拿按揉环跳穴对坐骨神经痛大鼠脊髓背角NF-κB p65蛋白的干预作用

目的:观察推拿按揉环跳穴对坐骨神经慢性压迫损伤(chronic constriction injury,CCI)模型大鼠的镇痛作用,探讨推拿对坐骨神经痛大鼠的镇痛机制。方法:选用32只体重180~220g SPF级别的SD雄性大鼠,随机分成空白组(不予以任何处理)、假手术组(只暴露不结扎坐骨神经)、模型组(结扎坐骨神经)和推拿组(结扎坐骨神经后予以手法干预)。通过结扎大鼠右侧坐骨神经制备CCI模型,于造模第3天开始对推拿组大鼠推拿按揉环跳穴干预,连续干预14 d,观察造模前及造模后第1、3、7、10、14、17天大鼠机械痛域(paw withdrawal threshold,PWT)、热痛阈(paw withdrawal latency,PWL);观察造模前、造模后第1和17天右侧坐骨神经功能指数(sciatic functional index,SFI)的变化;用苏木精伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色方法观察坐骨神经形态学的变化;并观察大鼠右侧脊髓背角NF-κB蛋白表达的差异。结果:在造模后,空白组和假手术组的PWT、PWL和SFI差异均无统计学意义(P>0.05),造模后模型组和推拿组的PWT、PWL和SFI显著下降(P<0.01)。在手法干预后,推拿组大鼠的痛阈值上升,在手法干预第8天(即造模第10天),推拿组较模型组PWT显著上升,差异有统计学差异(P<0.01);在手法干预第5天(即造模第7天),推拿组PWL较模型组显著上升,差异有统计学意义(P<0.01);推拿组大鼠痛阈值随着手法干预持续而继续上升。手法干预14天后,推拿组大鼠坐骨神经功能指数显著上升(P<0.01)。与空白组、假手术组比较,模型组大鼠坐骨神经有髓神经纤维排列紊乱,轴索、髓鞘密度不均匀;与模型组比较,推拿组大鼠神经纤维逐渐连续,轴索、髓鞘较模型组均匀。与空白组、假手术组比较,模型组大鼠右侧脊髓背角NF-κB蛋白表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,推拿组大鼠右侧脊髓背角NF-κB蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论:推拿按揉环跳穴能恢复神经纤维的排列;并通过降低脊髓背角的NF-κB p65蛋白表达来提高CCI模型的PWT、PWL和SFI,从而起到镇痛的作用,并改善大鼠步态。

核转录因子κBp65蛋白及其抑制蛋白IκBα表达与食管鳞癌浸润转移的关系

目的:探讨核转录因子κB(NF-κB)p65蛋白及其抑制蛋白IκBα表达与食管鳞癌浸润转移的关系。方法:用免疫组化SP法检测了61例食管鳞癌中NF-κBp65、IκBα蛋白的表达。结果:p65、IκBα蛋白的胞浆表达与食管鳞癌的组织学分级、浸润深度和淋巴结转移无关,但p65蛋白的胞核表达与食管鳞癌的组织学分级、浸润深度和淋巴结转移均呈正相关(P值均<0.01),IκBα蛋白的胞核表达与食管鳞癌的淋巴结转移有关(P<0.05)。在食管鳞癌中IκBα蛋白的胞浆和胞核阳性率均高于p65蛋白,但差异均无统计学意义,也无相关关系。结论:NF-κBp65蛋白的胞核表达与食管鳞癌的分级、浸润和淋巴结转移有关,IκBα蛋白的胞核表达与食管鳞癌的淋巴结转移有关。

依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织NF-κB p65蛋白表达的影响

目的探讨依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织NF-κB p65蛋白表达的影响。方法 108只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、脑出血组和依达拉奉治疗组,其中脑出血组和依达拉奉治疗组又分为3 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d、7 d 8个亚组,每组6只。采用大鼠尾动脉自体不凝血50μL注入尾状核区建立脑出血模型。依达拉奉治疗组于模型制作成功后2 h开始腹腔内注射3 mg/kg依达拉奉,1次/d。免疫组化法检测NF-κB p65蛋白表达变化。结果与脑出血组相比,依达拉奉治疗组于出血后6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d、7 d血肿周围组织NF-κB p65蛋白表达均减少(P<0.05或P<0.01)。结论依达拉奉对脑出血后血肿周围脑组织损伤有保护作用,可能与其抑制NF-κB p65蛋白表达有关。

吡咯烷二硫代氨基甲酸对脂多糖致急性肺损伤大鼠NF-κBP65蛋白表达的影响

目的探讨核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸(PDTC)对脂多糖(LPS)所致急性肺损伤(ALI)大鼠NF-κB P65蛋白表达的影响。方法雄性大鼠54只,随机分三组。对照组(N组)6只,腹腔注射生理盐水3 ml/kg。ALI组(L组)24只,腹腔注射LPS 3 mg/kg。PDTC干预组(P+L组)24只,先腹腔注射PDTC 120 mg/kg,0.5 h后再腹腔注射LPS 3 mg/kg。后两组分别于腹腔注射LPS后1、2、4、8 h作为观测时间点。观察肺组织胞质及胞核中NF-κB P65蛋白表达强度的变化。结果 ALI组各时相肺组织胞质中P65蛋白的表达强度较对照组显著降低(P<0.01),而胞核中P65蛋白表达强度较对照组显著升高(P<0.01),但PDTC干预组P65蛋白与ALT组比较,肺组织胞质中P65蛋白的表达强度较ALT组升高(P<0.05),而胞核中P65蛋白表达强度较ALT组降低(P<0.05)。结论 LPS引起肺组织NF-κB P65蛋白由胞质向胞核转移而活化,NF-κB参与炎症的调控,在ALI中发挥重要作用。而PDTC可抑制炎性介质的表达和释放,可有效地减轻LPS所致大鼠ALI。

白芍总苷对NAFLD大鼠肝脏NF-kB/p65蛋白表达及羟脯氨酸含量的影响

目的:观察白芍总苷(TGP)对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝NAFLD大鼠肝组织核转录因子-κB(NF-κB)和羟脯氨酸(Hyp)及血清血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(AL T)、还原型谷胱甘肽(GSH)和白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)水平的影响.方法:.结果:TGP200mg·kg-1组能明显降低NAFLD模型组大鼠血清ALT和AST水平和提高GSH含量(P<0.01)、能明显抑制肝组织中k的阳性表达及Hyp的生成(P<0.01)、使血清IL-1β、TNF-α和IL-6水平明显降低(P<0.01)、使肝脏的病理学改变明显减轻.TGP100mg·kg-1对上述指标无明显改变.结论:TGP能明显改善NAFLD大鼠的肝功能及病理性变化,其机制可能是通过下调NF-κB/p65的表达、降低血清IL-1β、TNF-α和IL-6水平、抑制肝脏Hyp的产生,从而对NAFLD大鼠发挥治疗作用.

贲门腺癌组织中RKIP表达变化及其与血清NF-κB p65蛋白、T淋巴细胞亚群的关系

目的观察Raf激酶抑制蛋白(RKIP)在贲门腺癌组织中的表达变化,进一步探讨贲门腺癌的发生、发展机制。方法收集160例贲门腺癌患者(腺癌组)的腺癌组织及其癌旁组织,应用免疫组织化学SP法检测RKIP表达;采用ELISA法和流术细胞术分别检测腺癌组和50例查体健康者(对照组)的血清NF-κB p65蛋白、T淋巴细胞亚群水平。采用Spearman秩和相关分析法分析指标间的关系。结果贲门腺癌及癌旁组织中RKIP表达阳性率分别为38.7%、52.5%(P<0.05),在有、无淋巴结转移者中的表达阳性率分别为24.4%、53.1%(P<0.05,t=4.34);腺癌组血清总NF-κB p65蛋白水平高于对照组(P<0.05),但RKIP表达阳性与阴性者水平无显著差异(P>0.05),有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者(P<0.05);腺癌组细胞免疫功能低于对照组,尤以RKIP表达阴性者为著(P<0.05)。结论 RKIP在贲门腺癌组织中表达降低并与肿瘤发生、发展、浸润转移有关,可能机制为抑制NF-κB活性及细胞免疫功能,使肿瘤细胞逃避机体的免疫监视。

吗啡对人中性粒细胞p65蛋白含量的影响

观察吗啡对中性粒细胞NF κB亚单位p6 5及其抑制蛋白I κBmRNA表达、p6 5蛋白含量的影响。分离提取 2 0例健康人外周血中性粒细胞 ,以RPMI16 4 0培养液悬浮细胞 ,将细胞按照每孔 1× 10 6个置入培养板。每份细胞分为正常对照组、TNF α组 (2 0 μg/L)、吗啡组 (5 0nmol/L)、芬太尼组 (10 0nmol/L)、丁丙诺啡组 (2nmol/L)、吗啡 5 0nmol/L+TNF α 2 0 μg/L组和芬太尼 10 0nmol/L +TNF α 2 0 μg/L 组、丁丙诺啡 2nmol/L +TNF α 2 0 μg/L组。置CO2 孵箱孵育3h后提取细胞总RNA ,采用RT PCR方法检测中性粒细胞NF κB亚单位p6 5及其抑制蛋白I κBmRNA表达 ;采用免疫蛋白印迹法 (Westernblot)测定p6 5蛋白含量。结果示TNF α组p6 5mRNA表达明显增强 ,约增加 31 3% (P <0 0 1) ,而I κBmRNA的表达减弱约 12 6 % (P <0 0 5 )。单纯吗啡组及吗啡 +TNF α组对p6 5mRNA的表达均显示出抑制作用 ,且吗啡对I κBmRNA的表达有增加趋势 (P <0 0 5 )。芬太尼组、丁丙诺啡组及加TNF α刺激后p6 5及I κBmRNA的表达均无影响 (P <0 0 5 ) ;Westernblot结果亦显示吗啡明显降低p6 5蛋白含量 (P <0 0 5 ) ,而芬太尼和丁丙诺啡则无效果。结果提示 ,吗啡具有抑制中性粒细胞NF

NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达分析

目的探讨NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达。方法选择贵州医科大学附属医院和赣南医学院第一附属医院2018年1月—2019年12月收治的50例皮肤鳞状细胞癌患者病理组织切片作为癌组织组,相对应癌旁组织50例进行对照。比较两组NF-κB p65蛋白的表达差异,并对NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌表达情况与患者性别、年龄、疾病临床分期和分化程度的关系进行分析。结果癌组织组的NF-κB p65蛋白表达阳性率高于癌旁组织组,差异有统计学意义(P<0.05)。患者不同性别、年龄情况下的NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅲ~Ⅳ期患者的NF-κB p65蛋白表达阳性率高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05)。低分化患者的NF-κB p65蛋白表达阳性率高于高中分化患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达高于癌旁组织,且皮肤鳞状细胞癌的分期越高,则NF-κB p65蛋白表达越高;皮肤鳞状细胞癌的分化程度越低,则NF-κB p65蛋白表达越高。而NF-κB p65蛋白表达和患者的年龄、性别之间没有明显的关系。

黄芩汤对溃疡性结肠炎大鼠的保护作用及其影响NF-κB p65蛋白和相关炎症因子表达的机制研究

目的:研究黄芩汤对DSS所致溃疡性结肠炎大鼠细胞因子、NF-κBp65蛋白表达的影响,探讨其作用效果及机制。方法:运用右旋葡聚糖硫酸钠(Sodium dextran sulfate,DSS)制备UC大鼠模型,大鼠随机分成正常对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶组和黄芩汤高、中、低剂量组。治疗7天后,取结肠组织,评估各组大鼠结肠长度、体重变化及组织损伤程度,采用ELISA法测定结肠组织中肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin6,IL-6)、白介素-1β(Interleukin1β,IL-1β)含量,运用Western blot法检测NF-κB p65蛋白表达情况。结果:模型组大鼠体重及结肠长度均明显低于正常组大鼠(P<0.01);血清中TNF-α、IL-6、IL-1β水平、结肠组织NF-κB p65蛋白表达量及组织损伤程度显著高于正常组(P<0.01)。与模型组大鼠相比,柳氮磺胺吡啶组大鼠上述指标均减轻,黄芩汤高、中剂量大鼠上述指标较模型组显著改善(P<0.01)。结论:黄芩汤能明显改善模型大鼠精神、体重、肠上皮损伤等,对溃疡性结肠炎的治疗作用可能是通过抑制NF-κB通路活化,进而下调促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β表达实现的。

核因子-κB P65蛋白在大肠癌组织中的表达及意义

目的探讨核因子-κB（NF-κB）P65蛋白在大肠癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法，检测64例大肠癌组织和11例大肠腺瘤组织、16例癌旁组织中NF-κB P65单克隆抗体的表达，分析其与NF-κB P65蛋白之间的关系。结果NF-κB P65蛋白在大肠癌和大肠腺瘤组织中的阳性表达率分别为54．7％、18．2％,16例癌旁组织中无1例阳性表达。大肠癌组与大肠腺瘤组阳性表达率比较有显著性差异（P〈0.05）。NF-κB P65蛋白在高、中、低分化大肠癌组织中的阳性表达率分别为33．3％、54．2％、61．3％，各组间比较无显著性差异（P〉0．05）。大肠癌有淋巴结转移组中NF-κB P65蛋白阳性表达率（73．1％）高于无淋巴结转移组（42．1％），二者比较有显著性差异（P〈0．05）。结论NF-κB P65蛋白在大肠癌组中的阳性表达显著高于大肠腺瘤组，有淋巴结转移组中阳性表达显著高于无淋巴结转移组，提示NF-κB P65蛋白在大肠癌的发生、发展及淋巴结转移中起重要作用。

猪肺炎支原体P65蛋白的单克隆抗体的制备（英文）

P65蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,与其他支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白。本实验应用原核表达的重组P65蛋白免疫小鼠,用Mhp全菌蛋白和P65蛋白筛选,制备了1株特异性单克隆抗体3G12。鉴定结果表明,该株单克隆抗体可与P65蛋白和Mhp全菌蛋白反应,采用间接ELISA法测得3G12细胞培养上清与P65蛋白反应抗体的效价为1∶12 800,与全菌蛋白反应抗体的效价为1∶3 200;3G12腹水与P65蛋白反应的抗体效价为1∶4 000 000以上,与168全菌蛋白反应的抗体效价为1∶20 000以上,细胞经长期体外培养和冻存后复苏能稳定分泌抗体。本研究成功获得到1株针对P65和Mhp全菌的单克隆抗体,为猪肺炎支原体致病机制和检测方法的进一步研究提供了基础。

肺纤维化大鼠肺组织P_(65)蛋白表达及中药的干预作用

目的探讨肺纤维化大鼠肺组织P65蛋白表达及中药国圣一号治疗肺纤维化的作用机制。方法48只Wistar大鼠随机分为4组,每组12只。对照组气管内滴注生理盐水,模型组、中药组、氢化可的松组气管内一次性灌注博来霉素诱导肺纤维化,当天开始给予不同药物治疗。观察动物14天、28天肺组织炎症反应,纤维化形成,P65蛋白表达情况和中药对肺纤维化的治疗作用。结果①模型组肺泡炎及肺纤维化程度明显重于对照组(P<0.01)、中药组及氢化可的松组(P<0.05),中药和氢化可的松治疗后肺泡炎及肺纤维化明显减轻。②模型组肺组织中14天、28天P65蛋白的表达明显高于其它3组(P<0.01),28天P65蛋白表达较14天显著升高(P<0.05)。中药组及氢化可的松组肺组织P65蛋白表达显著高于对照组(P<0.01)。结论肺纤维化时肺组织P65蛋白持续表达,中药国圣一号可抑制NFκB活化起治疗作用。

螺杆菌感染与NF—κB p65蛋白表达相关性在人食管癌发生中的意义

目的研究人食管癌是否存在螺杆菌感染及其与NF-κB p65蛋白的关系，从而探讨在人食管癌发生中的意义。方法随机收集食管癌标本40例和正常食管标本10例，采用聚合酶链反应（PCR）扩增螺杆菌16SrRNA，随机选4例测序及同源比较。阳性者再扩增幽门螺杆菌（H.pylari,Hp）的特异基因相对分子质量（Mr）26×10^3的种特异性抗原和相关功能基因（GagA，VacA）。并采用免疫组化法检测食管癌组织中NF-κB p65蛋白的表达情况。结果32．5％（13／40）的食管癌组织中发现有螺杆菌16SrRNA基因存在，正常人食管组织无一例阳性。4例测序及同源比较，食管癌组织中螺杆菌序列与H．pylori的16SrRNA序列有99％～100％同源性。阳性标本均扩增出脚特异基因M，26×10^3种特异性抗原，但仅2例扩增出G田弘基因，3例扩增出VacA基因。免疫组化法染色显示，16SrRNA阳性的食管癌组织中NF-κB p65蛋白表达率为100％（13／13），而16SrRNA阴性食管癌组织表达率仅占18．5％（5／27），二者差异有统计学意义（P〈0．01）。结论食管癌患者食管组织存在螺杆菌感染，该螺杆菌可能为脚。螺杆菌感染导致食管黏膜NF-κB p65蛋白表达的增加，可能在食管癌生成中作为信号传导机制之一。

灭幽汤对HP相关性胃炎脾胃湿热证小鼠模型中NF-κB p65蛋白,IL-8的表达的影响

目的:建立幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,HP)相关性胃炎脾胃湿热证小鼠模型,探讨其与核因子(NF)-κB p65蛋白表达及下游的炎症因子白介素-8(IL-8)相关性,及灭幽汤的作用。方法:60只8周龄BALB/c小鼠,雌雄各半,按体重分层随机分为6组:正常组、模型组、灭幽汤组低、中、高剂量(6.2,12.4,24.8 g·kg-1)、胃三联组(280 mg·kg-1),对实验组小鼠进行HP相关性胃炎脾胃湿热证造模:适应性饲养3 d予高脂饲养,第11天放入湿热箱中,第16天接种HP,隔日灌胃1次,共3次,定植2周后以胶体金法检测血清HP抗体,第36天药物组予相应浓度药物灌胃,每天1次,连续14 d,其他组正常饲养,第53天处死所有小鼠。观察小鼠一般情况及进食量、饮水量、体重、肛温等变化,光镜下HE染色观察胃黏膜情况并进行积分,免疫组化法检测胃组织中NF-κB p65蛋白表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中IL-8。结果:与对照组比较,模型组小鼠胃窦部胃黏膜急慢性炎症积分,NF-κB p65蛋白,IL-8升高(P<0.05);与模型组比较,中、高剂量灭幽汤组及胃三联组的胃窦部胃黏膜急慢性炎症积分,NF-κB p65蛋白,IL-8降低(P<0.05),而低剂量灭幽汤组的变化无统计学差异。结论:HP相关性胃炎脾胃湿热证发生的机制可能与NF-κB p65蛋白过度表达及IL-8升高而引发炎症反应相关;灭幽汤可能通过抑制NF-κB p65蛋白表达及IL-8而发挥其抗炎作用。

NF-KB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨NF-KB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达及临床意义。方法选自我院于2015年1月至2018年1月期间皮肤鳞状细胞癌行手术切除的皮肤鳞状细胞癌组织标本53例作为研究对象(研究组);另选自我院于2015年1月至2018年1月正常皮肤组织30例作为对照组。采用免疫组化法检测NF-kB p65蛋白表达。比较两组NF-kB p65蛋白阳性表达情况,不同性别、不同年龄、不同临床分期及不同分化程度NF-kBp65蛋白阳性表达情况。结果研究组NF-kBp65蛋白阳性率高于对照组,且有统计学差异(P<0.05);不同性别和不同年龄皮肤鳞状细胞癌NF-kBp65阳性表达率比较无统计学差异(P>0.05);临床分期III^IV期皮肤鳞状细胞癌NF-kBp65阳性表达率高于I^II期,低分化皮肤鳞状细胞癌NF-kBp65阳性表达率高于高、中分化,具有统计学差异(P<0.05)。结论 NF-KBp65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中呈高表达,且随着病情加重表达越高,认为可作为判断病情程度和治疗的新靶点,值得临床借鉴。

丙泊酚对体外内毒素激活人中性粒细胞NF-κB亚单位p65蛋白的影响

目的观察丙泊酚对内毒素(LPS)激活后人体中性粒细胞(PMN)NF-κB p65的表达及对PMN凋亡的影响。方法采集20例健康志愿者外周静脉血,分离PMN后分为五组:C组,加入生理盐水作为对照;LPS组,加入LPS 100ng/L);P1组,LPS+丙泊酚2μg/ml;P2组,LPS+丙泊酚4μg/ml;P3组,LPS+丙泊酚8μg/ml。孵育2.5h后,提取RNA;用RT-PCR法检测p65mRNA,Western blot检测p65蛋白含量,流式细胞术检测PMN凋亡。结果 LPS 100ng/L可以显著激活PMN,使p65表达大量增加。实验剂量的丙泊酚均可不同程度抑制LPS激活后PMN p65的表达(P<0.05);2-8μg/ml浓度的丙泊酚可剂量依赖性增加LPS导致的PMN凋亡(P<0.05或P<0.01)。结论丙泊酚2-8μg/ml可抑制PMN p65的激活,促进LPS激活后的PMN凋亡。

戊型肝炎病毒开放读码框3蛋白抑制肿瘤坏死因子-α介导肝细胞p65的核转移

目的:研究Ⅰ型和Ⅳ型戊型肝炎病毒(HEV)开放读码框3蛋白(ORF3)对肝细胞系L02核因子-kap-pa B(Nuclear Factor kappa B,NF-κB)通路的影响。方法:分别用未转染质粒、转染Ⅰ型和Ⅳ型ORF3真核表达质粒及空载质粒的L02细胞,48小时后加入TNF(肿瘤坏死因子)-α刺激,采用免疫荧光观察细胞内p65的核转运,并用western blot检测p65蛋白的表达。结果:未转染质粒的L02细胞加入TNF-α刺激后,p65由胞浆转入胞核;转染空载的L02细胞加入TNF-α刺激后,与未转染的L02相似,p65由胞浆转入胞核;表达Ⅰ型和Ⅳ型ORF3蛋白的细胞,加入TNF-α刺激后,p65未见明显核转移。结论:Ⅰ型和Ⅳ型ORF3蛋白可抑制TNF-α介导的p65核转移。

SIP蛋白调节p65核转位的作用机制

核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)参与转录调控许多与细胞生长、凋亡、肿瘤形成和转移、胚胎发育及炎症反应相关的基因.它的二聚体与抑制蛋白结合,如抑制蛋白κB(IκBα,β或γ),而被滞留在细胞质中处于失活状态.然而NF-κB是否还有其它的抑制因子目前还不清楚.本研究结果表明,SIP(steroid receptor coactivator,SRC,SRC-interacting protein)是NF-κB家族的一个新抑制因子,它通过PEST结构域与NF-κB家族的p65蛋白相互作用.当细胞处于静息状态时,SIP将p65蛋白隔离于细胞质中;当有刺激因子TNFα或IL-1作用时,SIP与p65解离继而使p65进入细胞核启动下游靶基因转录激活.该研究为进一步认识NF-κB介导基因转录调控机制和相关疾病的发生发展提供了重要的理论依据.

青蒿琥酯对耐地塞米松的多发性骨髓瘤细胞株增殖及NF-κB p65、P-gp表达影响

目的探讨青蒿琥酯对耐地塞米松人多发性骨髓瘤(MM)细胞株MM.1R增殖的影响,并探讨其可能作用机制。方法取对数生长期MM.1S、对塞米松敏感的MM细胞株MM.1R,各分为空白对照组、地塞米松组、青蒿琥酯组、地塞米松+青蒿琥酯组,分别加入等量培养液、20 ng/m L的地塞米松、25μg/m L的青蒿琥酯、20 ng/m L的地塞米松+25μg/m L的青蒿琥酯,观测各组细胞增殖情况,计算细胞增殖抑制率。取MM.1R细胞加入终浓度为25μg/m L的青蒿琥酯,分别于给药前、给药24 h、给药48 h检测细胞核转录因子κB(NF-κB)p65蛋白、P糖蛋白(P-gp)蛋白的表达。结果给药24 h时,MM.1S细胞地塞米松组、青蒿琥酯组、地塞米松+青蒿琥酯组的细胞增殖抑制率分别为20.41%±2.75%、29.07%±2.71%、68.92%±4.12%,组间两两比较,P均<0.05;给药24 h,MM.1R细胞地塞米松组、青蒿琥酯组、地塞米松+青蒿琥酯组的细胞增殖抑制率分别对为4.13%±3.10%、27.43%±2.67%、60.14±3.24%,组间两两比较,P均<0.05;青蒿琥酯给药前、给药24 h、给药48 h,MM.1R细胞NF-κB p65蛋白的相对表达量分别为0.89±0.21、0.42±0.13、0.23±0.08;P-gp蛋白的相对表达量分别为0.86±0.19、0.43±0.13、0.25±0.09,随干预时间增加,MM.1R细胞NF-κB p65、P-gp蛋白的相对表达量均降低(P均<0.05)。结论青蒿琥酯可抑制MM.1S以及MM.1R细胞的增殖,与地塞米松联用有协同效应。青蒿琥酯抑制MM.1R细胞增殖的机制可能为下调NF-κB p65、P-gp蛋白的表达。