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P66Shc分子在肿瘤发生发展中的作用及机制研究进展
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作者 李娟(综述) 赵明慧(审阅) 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期196-200,共5页
P66Shc作为ShcA家族成员,具有家族特有的高度保守结构域,对细胞的增殖、分化和凋亡起重要的调控作用,因而在肿瘤发生发展中也起着关键性作用。在不同的肿瘤细胞中,p66Shc的表达表现出两面性:既可促进肿瘤生长和转移,也可以抑制肿瘤发展... P66Shc作为ShcA家族成员,具有家族特有的高度保守结构域,对细胞的增殖、分化和凋亡起重要的调控作用,因而在肿瘤发生发展中也起着关键性作用。在不同的肿瘤细胞中,p66Shc的表达表现出两面性:既可促进肿瘤生长和转移,也可以抑制肿瘤发展。异常水平表达的p66Shc通常与肿瘤细胞过度增殖、高转移风险和不良预后相关。P66Shc还可通过激活氧化应激通路来调节肿瘤细胞的代谢状态,参与协调肿瘤细胞凋亡、自噬和失巢凋亡等不同死亡方式。探究p66Shc在肿瘤发生发展中的作用及机制,可为肿瘤临床治疗中有效靶点的寻找带来更多新的突破。 展开更多
关键词 P66SHC 活性氧 细胞凋亡 失巢凋亡 肿瘤
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衔接蛋白p66Shc在心肌缺血再灌注损伤中的作用研究进展
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作者 王沛 剡冬冬 +1 位作者 彭瑜 张钲 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期456-460,共5页
缺血性心脏病是全世界死亡率较高的疾病之一,长期危害着人类的健康,其首选治疗策略再灌注可导致心肌缺血恶化及加速损伤,即心肌缺血再灌注损伤(MIRI),严重影响临床疗效及患者预后。目前MIRI的预防和治疗仍是临床尚未解决的难题。大量研... 缺血性心脏病是全世界死亡率较高的疾病之一,长期危害着人类的健康,其首选治疗策略再灌注可导致心肌缺血恶化及加速损伤,即心肌缺血再灌注损伤(MIRI),严重影响临床疗效及患者预后。目前MIRI的预防和治疗仍是临床尚未解决的难题。大量研究表明,衔接蛋白p66Shc在包括MIRI对内的多种疾病的发生发展具有重要的调控作用。本文针对衔接蛋白p66Shc在MIRI氧化应激、炎症反应和血管内皮功能障碍中的调节作用机制,以及以p66Shc为靶点的相关治疗策略进行综述,以期为MIRI的预防和治疗提供进一步的参考。 展开更多
关键词 缺血性心脏病 心肌缺血再灌注损伤 P66SHC 氧化应激
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慢肾康宁方对慢性肾衰大鼠肾组织氧化应激状态及Caspase-3,JNK,p66Shc蛋白表达影响 被引量:9
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作者 何铃 朱诗平 +1 位作者 金鑫 聂玲辉 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期559-564,共6页
目的:观察中药慢肾康宁方对腺嘌呤诱发的慢性肾衰大鼠肾脏氧化应激状态及p66Shc,Caspase-3和JNK蛋白的影响。方法:60只wistar大鼠随机分成正常组,模型组,氯沙坦组,中药慢肾康宁方低、中、高质量分数组,除正常组给予生理盐水灌胃外,其余... 目的:观察中药慢肾康宁方对腺嘌呤诱发的慢性肾衰大鼠肾脏氧化应激状态及p66Shc,Caspase-3和JNK蛋白的影响。方法:60只wistar大鼠随机分成正常组,模型组,氯沙坦组,中药慢肾康宁方低、中、高质量分数组,除正常组给予生理盐水灌胃外,其余各组使用腺嘌呤灌胃复制慢性肾衰大鼠模型,时间是21d。检测模型建立成功后,正常组和模型组给予生理盐水灌胃,其余各组对应给予等量药物进行治疗,疗程为28d。实验结束后,检测各组大鼠血清尿肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)的含量,采用化学比色法测定肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量,提取肾组织蛋白,通过Western blotting进行p66Shc,Caspase-3和JNK蛋白的检测。结果:造模成功后,模型组Scr及BUN水平明显升高,显著高于正常组(P<0.01),SOD水平降低,MDA活性升高,与正常组相比差异具有统计学意义(P<0.05),肾脏组织内Caspase-3,JNK,p66Shc及其磷酸化位点p66Shc-ser36表达量明显上升(P<0.05)。经药物治疗后,中药低中高剂量组及氯沙坦组Scr和BUN均明显降低(P<0.01),SOD活性升高,中药高剂量组和氯沙坦组升高明显(P<0.05),其余治疗组具有升高趋势,MDA含量明显降低,氯沙坦组和中药高剂量降低趋势明显(P<0.05),其余各组存在降低趋势,Caspase-3,JNK,p66Shc及磷酸化蛋白p66Shc-ser36表达量较模型组相比均呈现出下降趋势(P<0.05)。结论:中药慢肾康宁方高剂量治疗组能够降低慢性肾衰大鼠血清Scr,BUN水平,改善肾间质纤维化程度,作用的机制可能与提高SOD水平,降低MDA表达,改善肾脏氧化应激状态及降低Caspase-3,p66Shc和JNK蛋白表达水平相关。 展开更多
关键词 慢肾康宁方 慢性肾衰 氧化应激 CASPASE-3 P66SHC JNK
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山茱萸纳米水提液对衰老小鼠脑组织p66^(shc)表达的影响 被引量:3
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作者 王明富 欧芹 +2 位作者 朱贵明 王昭 冷莉莉 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1249-1250,共2页
目的探讨山茱萸制剂对自然衰老小鼠脑组织的磷酸化酪氨酸信号适配蛋白(66kilodalton isoform of shcgene products,p66shc)表达的影响。方法人工饲养自然衰老小鼠11~12月龄36只、青年鼠8只,分6组:青年对照组、衰老对照组和给药组,给药... 目的探讨山茱萸制剂对自然衰老小鼠脑组织的磷酸化酪氨酸信号适配蛋白(66kilodalton isoform of shcgene products,p66shc)表达的影响。方法人工饲养自然衰老小鼠11~12月龄36只、青年鼠8只,分6组:青年对照组、衰老对照组和给药组,给药组又分为山茱萸纳米水提液和醇提液的大剂量、小剂量组;各组给药30d,然后断头取小鼠肝组织做超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)检测,RT-PCR法测定小鼠脑组织p66shc的表达。结果山茱萸纳米水提和醇提液给药组SOD活性与衰老对照组相比显著升高(P<0.01),而MDA含量和脑p66shc的表达显著降低(P<0.01);山茱萸纳米制剂水提液小剂量、大剂量组和醇提液比较上述作用均更显著(P<0.01)。结论山茱萸能够明显降低衰老小鼠脑p66shc活性亚基的表达,从而影响p66shc活性起到延缓衰老的作用。山茱萸纳米水提取液小剂量组的作用优于山茱萸纳米醇提液各组。 展开更多
关键词 山茱萸 p66shc活性 衰老小鼠 脑组织 纳米水提取液
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结肠癌中雌激素受体和衔接蛋白p66Shc的表达和意义 被引量:3
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作者 张莉 田月 +3 位作者 李鹏 吴咏冬 张澍田 林明丰 《胃肠病学》 2012年第9期527-530,共4页
背景:雌激素和雌激素受体(ER)在结肠癌的发生、发展中起重要作用,然而ER在其中的具体作用机制尚不完全清楚。在甾类激素敏感性肿瘤细胞中,甾类激素可显著上调衔接蛋白p66Shc表达并刺激细胞增殖。目的:探讨ER和p66Shc在结肠癌中的表达特... 背景:雌激素和雌激素受体(ER)在结肠癌的发生、发展中起重要作用,然而ER在其中的具体作用机制尚不完全清楚。在甾类激素敏感性肿瘤细胞中,甾类激素可显著上调衔接蛋白p66Shc表达并刺激细胞增殖。目的:探讨ER和p66Shc在结肠癌中的表达特点及其临床意义。方法:以免疫组化方法检测65例石蜡包埋结肠癌组织及其癌旁非癌组织中的ER和p66Shc蛋白表达,分析p66Shc蛋白表达与结肠癌临床病理特征的相关性。结果:ER和p66Shc蛋白表达分别定位于细胞核和细胞质,结肠癌组织中的ER和p66Shc蛋白表达阳性率显著高于癌旁非癌组织(ER:47.7%对0%,P<0.01;p66Shc:49.2%对0%,P<0.01),且两者呈正相关(r=0.43,P<0.05)。p66Shc蛋白表达与结肠癌患者的性别、年龄以及原发肿瘤部位、肿瘤大小、大体类型、浸润深度、淋巴结转移、AJCC分期均无相关性,而与肿瘤组织学分级相关(高分化:22.2%,中分化:47.7%,低分化:75.0%,P=0.046)。结论:结肠癌可能是一种雌激素敏感性肿瘤。雌激素及其受体可能与p66Shc共同参与了结肠癌的发生、发展。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 受体 雌激素 P66SHC 免疫组织化学
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急性心肌梗死患者外周血单个核细胞P66Shc mRNA的表达及其与氧化应激的关系 被引量:3
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作者 陈亮 徐标 +2 位作者 黄为 钟静 李声娜 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期159-162,共4页
目的探讨急性心肌梗死患者外周血单个核细胞P66Shc mRNA的表达及其与氧化应激的关系。方法选择经冠状动脉造影检查及治疗的患者67例,根据临床表现和冠状动脉造影结果分成健康对照组23例,稳定型心绞痛组23例,急性心肌梗死组21例。通过检... 目的探讨急性心肌梗死患者外周血单个核细胞P66Shc mRNA的表达及其与氧化应激的关系。方法选择经冠状动脉造影检查及治疗的患者67例,根据临床表现和冠状动脉造影结果分成健康对照组23例,稳定型心绞痛组23例,急性心肌梗死组21例。通过检测血中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,对机体氧化应激状态进行全面分析,在此基础上运用RT-qPCR比较三组外周血单个核细胞中P66Shc mRNA的表达,并对P66Shc mRNA的表达与MDA及SOD进行相关性分析。结果急性心肌梗死组MDA明显高于稳定型心绞痛组和健康对照组(P<0.05),而SOD明显低于稳定型心绞痛组和健康对照组(P<0.01);急性心肌梗死组P66Shc mRNA的表达明显高于稳定型心绞痛组及健康对照组(P<0.01),而在稳定型心绞痛组与健康对照组之间无明显差别(P>0.05),且P66Shc mRNA的表达量与MDA水平呈正相关(r=0.49,P=0.024),与SOD水平相关性不明显。结论急性心肌梗死时P66Shc mRNA表达增高,P66Shc可能介导了斑块由稳定到不稳定性转化的机制。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 P66SHC 氧化应激
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p66Shc在绵羊卵母细胞中的表达及其与胞质氧化还原稳态的关系 被引量:2
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作者 张通 栗瑞兰 +4 位作者 范晓梅 刘春洁 海日汗 霍敏 张家新 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2183-2192,共10页
[目的]研究p66Shc在绵羊卵母细胞中的表达特征及其与卵母细胞胞质氧化还原稳态的关系,为揭示p66Shc参与调控卵母细胞胞质氧化还原稳态分子机制提供理论依据。[方法]试验所用卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes, COCs)来源于... [目的]研究p66Shc在绵羊卵母细胞中的表达特征及其与卵母细胞胞质氧化还原稳态的关系,为揭示p66Shc参与调控卵母细胞胞质氧化还原稳态分子机制提供理论依据。[方法]试验所用卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes, COCs)来源于屠宰场的绵羊卵巢。分别收集成熟前优质和劣质、常规成熟24 h及成熟30 h老化的卵母细胞,采用实时荧光定量PCR对成熟前后不同质量绵羊卵母细胞中p66Shc mRNA的表达量进行分析,利用细胞免疫荧光结合MitoTracker Red探针对p66Shc蛋白和线粒体进行共定位,同时利用荧光探针DCFH-DA和卵母细胞自发荧光分别对成熟前后不同质量卵母细胞内ROS水平和氧化还原稳态进行检测。此外,采用外源H2O2诱导的氧化应激处理成熟前优质卵母细胞,并对p66Shc蛋白的表达及定位进行了检测分析。[结果]实时荧光定量PCR结果显示,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞中p66Shc mRNA表达量分别显著(P<0.05)高于成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞。然而优质卵母细胞成熟前后p66Shc mRNA表达量没有显著差异(P>0.05)。共定位结果表明,p66蛋白主要分布在线粒体分布活跃的区域。细胞免疫荧光结果显示,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞中p66Shc蛋白表达量也分别显著(P<0.05)高于成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞。与成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞相比,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞表现出线粒体分布紊乱和活性下降、ROS水平升高以及氧化还原稳态的失衡。此外,与未添加外源H2O2的对照组相比,外源H2O2处理成熟前优质卵母细胞诱导的氧化应激显著(P<0.05)上调p66Shc蛋白的表达并促使p66Shc由胞质向细胞核定位。[结论]p66Shc基因在劣质和老化的绵羊卵母细胞中呈现高水平的表达,H2O2诱导的氧化应激显著上调p66Shc蛋白的表达并影响其亚细胞定位。总之,绵羊卵母细胞中p66Shc表达上调影响了胞质的氧化还原稳态。 展开更多
关键词 绵羊卵母细胞 P66SHC 线粒体 ROS 氧化还原稳态
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鼠尾草酸对庆大霉素诱导急性肾损伤的保护作用 被引量:5
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作者 曹静 何苗 +1 位作者 罗颂 刘辉 《西北药学杂志》 CAS 2021年第1期61-65,共5页
目的研究鼠尾草酸对庆大霉素(GM)诱导急性肾损伤的作用及其可能的机制。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组以及鼠尾草酸低、中、高剂量组。鼠尾草酸给药组和阳性对照组分别用不同剂量的鼠尾草酸或肾衰宁灌胃7 d,同时合并G... 目的研究鼠尾草酸对庆大霉素(GM)诱导急性肾损伤的作用及其可能的机制。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组以及鼠尾草酸低、中、高剂量组。鼠尾草酸给药组和阳性对照组分别用不同剂量的鼠尾草酸或肾衰宁灌胃7 d,同时合并GM腹腔给药,模型组单独使用GM处理7 d。检测血清中肌酐(SCr)和血尿素氮(BUN)的水平;HE染色检测肾脏组织的病理改变情况;免疫组化检测各组大鼠肾脏组织中肾损伤分子-1(KIM-1)的表达;检测各组大鼠肾组织中丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)的含量,诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和超氧化物歧化酶(SOD)的酶活力;酶联免疫吸附测定法检测肾脏组织中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;Western Blot法测定肾脏组织中p66shc和p-p66shc的蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血清SCr和BUN水平上升,MDA、H2O2含量和iNOS酶活力明显上升,SOD酶活力下降;与模型组比较,鼠尾草酸中、高剂量组可降低这些改变。与对照组相比,肾脏组织中MCP-1、TNF-α、KIM-1以及p-p66shc含量明显上升;与模型组比较,鼠尾草酸中、高剂量可降低GM诱导肾脏组织中MCP-1、TNF-α、KIM-1以及p-p66shc的含量。结论鼠尾草酸能显著降低GM诱导的急性肾损伤,其机制与抑制p66shc介导的氧化应激有关。 展开更多
关键词 鼠尾草酸 急性肾损伤 P66SHC 庆大霉素
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氧化应激下的p66^(Shc)调控作用 被引量:4
9
作者 顾闻 陈川 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期870-873,共4页
氧化应激产生的过量活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)可通过分子毒性作用或相关信号通路影响相关病理生理学过程.p66Shc是Shc蛋白家族的重要成员之一.氧化应激下p66Shc能被蛋白激酶Cβ(protein kinase Cβ,PKCβ)、Jun氨基末端激... 氧化应激产生的过量活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)可通过分子毒性作用或相关信号通路影响相关病理生理学过程.p66Shc是Shc蛋白家族的重要成员之一.氧化应激下p66Shc能被蛋白激酶Cβ(protein kinase Cβ,PKCβ)、Jun氨基末端激酶(Jun N-terminal kinase,JNK)和p53等激活,促进线粒体产生ROS.本文将对氧化应激下p66Shc的作用以及调控其作用的信号转导机制做一综述. 展开更多
关键词 P66SHC 氧化应激 蛋白激酶Cβ(PKCβ) Jun氨基末端激酶
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慢病毒载体靶向介导p66shc基因沉默 被引量:1
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作者 张婵 董文斌 +5 位作者 赵帅 李清平 康兰 雷小平 郭琳 翟雪松 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第1期73-75,83,共4页
目的构建p66shc基因重组慢病毒表达载体,并将之转染至293T细胞,通过RNA干扰致使p66shc基因沉默,为进一步研究p66shc基因功能奠定基础。方法筛选3个RNA靶点,命名为p66shc-shc1、p66shc-shc2、p66shc-shc3,与双酶切后的pLenR-绿色荧光蛋白... 目的构建p66shc基因重组慢病毒表达载体,并将之转染至293T细胞,通过RNA干扰致使p66shc基因沉默,为进一步研究p66shc基因功能奠定基础。方法筛选3个RNA靶点,命名为p66shc-shc1、p66shc-shc2、p66shc-shc3,与双酶切后的pLenR-绿色荧光蛋白(GPH)(含有GFP表达)连接,转化入感受态的DH5α细胞,挑取阳性克隆测序正确后,与pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G一起转染293T细胞,于倒置荧光显微镜下检测GFP的表达,证实病毒包装成功。使用荧光定量PCR及Western blot技术检测p66shc在基因及蛋白水平的表达,选取有效沉默p66shc基因的p66shc-shc1靶点,为后续试验做准备。结果成功构建表达p66shc的shRNA慢病毒载体并转染至真核生物细胞内,通过荧光定量PCR及Western blot技术检测其通过RNA干扰导致细胞内p66shc基因沉默。结论靶向表达p66shc的shRNA慢病毒载体,转染入真核生物细胞内可通过RNA干扰在分子及蛋白水平导致p66shc基因沉默。 展开更多
关键词 慢病毒属 RNA干扰 P66SHC
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衔接蛋白p66Shc在糖尿病及其并发症中的作用 被引量:3
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作者 聂静 孙林 刘伏友 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2009年第3期250-253,共4页
p66Shc是调控氧化应激和生命周期的关键蛋白。在氧化应激信号的刺激下,p66Shc在线粒体内氧化细胞色素C产生大量活性氧,造成细胞的氧化损伤。最新的研究表明,p66Shc可能在衰老及衰老相关的疾病如糖尿病中扮演关键的角色。本文简要综述p66... p66Shc是调控氧化应激和生命周期的关键蛋白。在氧化应激信号的刺激下,p66Shc在线粒体内氧化细胞色素C产生大量活性氧,造成细胞的氧化损伤。最新的研究表明,p66Shc可能在衰老及衰老相关的疾病如糖尿病中扮演关键的角色。本文简要综述p66Shc的结构、功能、相关的信号通路及其在糖尿病领域的最新研究进展。 展开更多
关键词 P66SHC 氧化应激 活性氧 糖尿病
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膀胱癌中衔接蛋白p66Shc的表达及临床意义 被引量:2
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作者 王西川 樊春华 冉建华 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期674-678,共5页
目的观察p66Shc蛋白在膀胱癌中的表达,分析其表达与膀胱癌临床分期、病理类型、转移等的关系,以及p66Shc影响膀胱癌细胞增殖、凋亡的分子机制。方法 应用免疫组化法和Western blot技术检测32例膀胱癌中p66Shc蛋白的表达,分析p66Shc蛋白... 目的观察p66Shc蛋白在膀胱癌中的表达,分析其表达与膀胱癌临床分期、病理类型、转移等的关系,以及p66Shc影响膀胱癌细胞增殖、凋亡的分子机制。方法 应用免疫组化法和Western blot技术检测32例膀胱癌中p66Shc蛋白的表达,分析p66Shc蛋白表达和临床病理特征的关系。Western blot技术检测T24细胞中PKCβ和p66Shc蛋白及其磷酸化水平,以及p53、Bax和BCL-2蛋白水平。结果 膀胱癌组织中p66Shc阳性率为65.6%(21/32),其在T3+T4期膀胱癌中的表达显著高于T1+T2期膀胱癌( P <0.05);p66Shc表达与患者年龄、性别、分化程度无关( P >0.05)。LY333531下调T24细胞中PKCβ和p66Shc蛋白及其磷酸化水平,以及下调p53、Bax和上调BCL-2的蛋白水平。结论 p66Shc蛋白在膀胱癌中的表达与膀胱癌临床分期相关,随着pTNM分期增加而表达增多。p66Shc磷酸化促进肿瘤细胞的增殖和凋亡。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 P66SHC 免疫组织化学
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p66^(Shc)基因调控早期胚胎发育阻滞的研究进展 被引量:1
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作者 胡军和 阳仲斌 +5 位作者 李伟 金晨钟 曾智 吴娟 张雪娇 王艳 《安徽农业科学》 CAS 2015年第22期92-93,102,共3页
在胚胎早期发育过程中,存在易停留在某个阶段的现象,称之为发育阻滞,如小鼠胚胎的2-细胞阻滞等。从分子结构及功能、调控活性氧水平和作用网络方面,综述了p66Shc基因调控早期胚胎发育阻滞的研究进展,以期对该领域的研究提供借鉴。
关键词 p66^Shc 发育阻滞 活性氧水平 早期胚胎
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p66shc基因表达与老年糖尿病患者早期肾损伤的相关性 被引量:1
14
作者 石晶 曹喆 贾琳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期603-605,共3页
目的研究p66shc基因在老年糖尿病患者外周血单核细胞中的表达及其与早期肾损伤指标的关系。方法采用实时PCR技术检测74例老年糖尿病患者和48例健康老年人(对照组)外周血单核细胞中p66shc基因表达水平,结合临床资料分析p66shc与早期肾损... 目的研究p66shc基因在老年糖尿病患者外周血单核细胞中的表达及其与早期肾损伤指标的关系。方法采用实时PCR技术检测74例老年糖尿病患者和48例健康老年人(对照组)外周血单核细胞中p66shc基因表达水平,结合临床资料分析p66shc与早期肾损伤指标尿微量白蛋白(m Alb)、转铁蛋白(TRF)、免疫球蛋白(Ig G)、α1-微球蛋白(α1-MG)和N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)之间的相关性。结果 p66shc基因在老年糖尿病患者中的表达水平显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,老年糖尿病患者m Alb、TRF、Ig G、α1-MG、NAG均显著升高(均P<0.01),并均与p66shc基因的表达水平呈正相关。结论 p66shc与老年糖尿病患者早期肾损伤密切相关,可为老年糖尿病患者肾损伤的早期诊断提供新的依据。 展开更多
关键词 P66SHC 糖尿病 肾损伤
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siRNA干扰技术沉默p66SHC对结直肠癌细胞生物学特性的影响 被引量:1
15
作者 杨洲 刚海菊 +3 位作者 覃先蓬 贾贵清 王波 杨春 《临床和实验医学杂志》 2018年第13期1360-1363,共4页
目的探讨干扰p66shc基因表达对结直肠癌HCT116细胞增殖、迁移、迁移的影响。方法实验分为对照组(不做任何处理)、NC-siRNA组和p66SHC-siRNA组,NC-siRNA组、p66SHC-siRNA组通过Lipofectamine 2000将特异性siRNA转染入结直肠癌HCT116细胞... 目的探讨干扰p66shc基因表达对结直肠癌HCT116细胞增殖、迁移、迁移的影响。方法实验分为对照组(不做任何处理)、NC-siRNA组和p66SHC-siRNA组,NC-siRNA组、p66SHC-siRNA组通过Lipofectamine 2000将特异性siRNA转染入结直肠癌HCT116细胞中。荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western Blot)检测细胞中p66SHC的表达量;四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞的增殖能力;划痕实验和Transwell法观察细胞迁移、侵袭的变化;Western Blot检测细胞EMT相关蛋白钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、钙黏蛋白N(N-cadherin)的水平。结果采用siRNA干扰HCT116细胞中p66SHC蛋白的表达后,细胞的增殖能力显著下降(P<0.05),明显抑制细胞侵袭、迁移能力(P<0.05),E-cadherin蛋白的水平明显上调(P<0.05),Vimentin、N-cadherin蛋白的表达水平显著下调(P<0.05)。结论干扰p66SHC基因的表达能阻碍EMT的发生,从而降低结直肠癌细胞的增殖、侵袭以及迁移能力。 展开更多
关键词 结直肠癌 p66SHC基因 HCT116细胞 上皮细胞间充质化
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线粒体呼吸链与活性氧 被引量:40
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作者 刘树森 《生命科学》 CSCD 2008年第4期519-527,共9页
已知有氧真核生物细胞吸收的氧分子绝大部分都是在线粒体呼吸链末端细胞色素氧化酶上通过四步单电子还原生成水。但同时也有1%-2%的氧可在呼吸链中途接受单电子或双电子被部分还原生成超氧(O_2^-·)和过氧化氢(H_2O_2)作为呼吸作用... 已知有氧真核生物细胞吸收的氧分子绝大部分都是在线粒体呼吸链末端细胞色素氧化酶上通过四步单电子还原生成水。但同时也有1%-2%的氧可在呼吸链中途接受单电子或双电子被部分还原生成超氧(O_2^-·)和过氧化氢(H_2O_2)作为呼吸作用的正常代谢产物。此种来源于线粒体呼吸链的O_2^-·和H_2O_2不但在多种病理的氧化损伤中起关键作用,同样它们也是正常生理条件下对多种细胞过程具有基本调控意义的氧还信号。基于Chance实验室约自20世纪70到90年代的早期研究贡献以及20世纪90年代后其他各实验室的研究新进展,我们聚焦于下述四个相关问题的评述和讨论:(1)由于线粒体内膜面积及其含有的呼吸链复合体酶活力远远高出细胞中所有膜系数量和相关酶活力之总和,因而线粒体呼吸链产生的O_2^-·和H_2O_2构成生物体内最大数量ROS的恒定来源;(2)线粒体呼吸链复合体Ⅲ的Q循环中Q_0位点中半醌自由基(UQH·)已明确是O_2^-·的单电子来源;还原细胞色素C-P66^(SHC)是生成H_2O_2的双电子供体。虽然复合体Ⅰ也是产生线粒体基质内O_2^-·的主要来源,但由于其确切生成位点尚未明确,在in vivo条件下能否产生大量O_2^-·也尚有争议;(3)线粒体呼吸链产生O_2^-·后的分配和跨膜转移涉及其生理病理作用机制和作用靶点等复杂而重要的问题,直到目前尚未意见一致。"质子和O_2^-·循环双回路解偶联模型"整合了目前提出的几种假说的联系点,指出H^+和O_2^-·相互作用生成HO_2·及其跨膜很可能是这一复杂问题的中心环节,并与O_2^-·对"脂肪酸shuttling model"或O_2^-·对"UCPS激活"模型形成了内在的联系;(4)线粒体呼吸形成的ΔP(ΔΨ和ΔpH)能直接控制呼吸链的ROS生成,并以非线性(非欧姆)相关方式通过影响Q循环中的Q_0半醌的氧还态和寿命来调节O_2^-·生成的急速变化,这一发现目前已获多家实验室的证实,业已成为线粒体学界的广泛共识。这样,线粒体呼吸生成的ΔP,除了在ATP合成和离子跨膜转运的经典的生物能量转换中介功能之外,又具有了调控作为细胞氧还信号分子ROS的新功能。线粒体也已不再单纯是细胞的"动力站",业已成为联结线粒体动态结构和功能变化与调节不同细胞事件的多细胞信号级联反应的整合平台。 展开更多
关键词 线粒体呼吸链 Q循环Q0半醌自由基 ROS生成与△P呈非线性相关 △ψ和△pH对ROS的控制 ROS分配和跨膜 CYT C—p66^She氧还蛋白 质子驱动力新功能
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p66Shc的生物学效应及其在肾脏疾病中的作用 被引量:1
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作者 景宇 何娅妮 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期55-58,共4页
关键词 SHC P66SHC 氧化应激 凋亡
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p66^(Shc)基因敲除对小鼠缺血缺氧性脑损伤的保护作用 被引量:1
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作者 孔祥溢 关健 王任直 《协和医学杂志》 2017年第6期359-363,共5页
目的探讨p66Shc基因敲除对小鼠缺血缺氧性脑损伤(hypoxic-ischemic brain injury,HIBI)的保护作用及可能的机理。方法将C57小鼠分为假手术组(野生型,sham operation,SO)、HIBI野生型组(hypoxic-ischemic wild type,HIWT)和HIBI-p66Shc... 目的探讨p66Shc基因敲除对小鼠缺血缺氧性脑损伤(hypoxic-ischemic brain injury,HIBI)的保护作用及可能的机理。方法将C57小鼠分为假手术组(野生型,sham operation,SO)、HIBI野生型组(hypoxic-ischemic wild type,HIWT)和HIBI-p66Shc基因敲除组(hypoxic-ischemic knock-out,HIKO),每组20只。采用右侧颈总动脉结扎-浸入低氧环境的方法制备小鼠HIBI模型。随后对各组小鼠神经功能障碍情况、HIBI损伤灶体积、血清神经元特异性烯醇化酶(neuronspecific enolase,NSE)水平和脑组织匀浆中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的水平进行测量和比对。结果 HIBI造模24 h后,HIKO组小鼠的神经功能缺损程度评分(1.87±0.30)低于HIWT组小鼠(2.49±0.26),HIKO组小鼠脑梗死灶体积[(22.66±4.20)mm3]小于HIWT组小鼠[(27.31±3.23)mm3],HIKO组小鼠血清NSE含量[(8.97±0.74)ng/ml]显著低于HIWT组小鼠[(11.26±0.68)ng/ml],HIKO组小鼠脑组织IL-1β含量[(1.72±0.30)ng/ml]显著低于HIWT组小鼠[(2.07±0.28)ng/ml],P均<0.05。结论 p66Shc基因敲除可通过降低小鼠HIBI发生后脑组织IL-1β的表达,起到脑保护作用。 展开更多
关键词 p66^Shc基因 缺血缺氧性脑损伤 氧化应激 炎性反应
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一种新型无线十字路口交通灯智能动态感应控制系统 被引量:8
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作者 马鸿文 陈松立 +1 位作者 陈治国 李剑 《微计算机应用》 2009年第4期62-66,共5页
叙述了一种新型无线十字路口交通灯智能动态感应控制系统的软硬件设计。主机通过无线模块通信得到各方向从机采集的公路车辆实时流量信息并计算出十字路口交通灯动态配时。该系统突破了传统固定配时模式,大大提高了十字路口车辆通行效率... 叙述了一种新型无线十字路口交通灯智能动态感应控制系统的软硬件设计。主机通过无线模块通信得到各方向从机采集的公路车辆实时流量信息并计算出十字路口交通灯动态配时。该系统突破了传统固定配时模式,大大提高了十字路口车辆通行效率,缓解了交通阻塞,具有实际应用前景。 展开更多
关键词 交通灯 单片机P89C66X 车辆检测 无线收发模块PTR2000
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HIV P66蛋白的表达、纯化及活性检测
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作者 马晶 郭秀婵 +2 位作者 张晓光 张晓梅 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期364-368,共5页
此研究的目的是体外表达HIV-1逆转录酶P66亚单位蛋白,并得到纯度较高且具有活性的重组蛋白。首先通过PCR方法从含HIV-1 HXB2标准株全基因的质粒中扩增出全长p66基因,插入表达载体pTWIN1,构建pTWIN-p66质粒。再将该质粒转化到表达菌BL21,... 此研究的目的是体外表达HIV-1逆转录酶P66亚单位蛋白,并得到纯度较高且具有活性的重组蛋白。首先通过PCR方法从含HIV-1 HXB2标准株全基因的质粒中扩增出全长p66基因,插入表达载体pTWIN1,构建pTWIN-p66质粒。再将该质粒转化到表达菌BL21,在IPTG诱导下表达P66蛋白。表达产物经几丁质柱一步纯化后得到P66蛋白纯品。纯化的P66蛋白分别催化B95-8细胞总RNA、RT试剂盒中对照RNA进行逆转录;同时以试剂盒中的M-MLV RT为对照进行相同的逆转录,PCR后电泳比较活性。结果显示我们构建的pTWIN-p66质粒在IPTG诱导下在原核细胞中P66亚单位蛋白表达量较高,经一步纯化后蛋白凝胶扫描纯度达88%,并具有较好的逆转录活性。与M-MLV RT体外活性比较,两者活性相当。该研究为进一步开发国产HIV确证诊断试剂及抗AIDS药物的研究打下了初步基础。 展开更多
关键词 慢病毒属 HIV-1 P66蛋白 原核表达 活性检测
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