神经营养因子受体同源物2通过上调proNGF、sortilin、p75NTR表达诱导脑出血后血肿周围脑组织细胞凋亡

目的探讨脑出血后不同时期血肿周围脑组织中神经营养因子受体同源物2(NRH2)、神经生长因子前体(pro NGF)、sortilin、神经营养因子受体p75(p75NTR)表达及与细胞凋亡的关系。方法收集临床脑出血后实施血肿清除术的周围组织标本,根据脑出血距离标本取出时间,分为6h以内(包括6h)、6h以上至24h(包括24h)、24h以上至72h(包括72h)、72h以上4组,同时取10例手术过程中血肿远隔部位掉落的组织块作为对照组,通过末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法(TUNEL)测定脑细胞的凋亡指数(AI),采用实时荧光定量PCR、Western blot法分别检测脑组织中NRH2、pro NGF、sortilin、p75NTR mRNA和蛋白表达,Western blot法检测脑组织中Bcl-2、Bax的表达。体外培养大鼠皮层星形胶质细胞,经NRH2 siRNA或scramble siRNA转染后,Western blot法检测pro NGF、sortilin、p75NTR蛋白表达。结果与对照组以及6h以内的脑出血组相比,脑出血后6h以上各组AI升高,以24h以上至72h内组为最高,但6h以内的脑出血组AI与对照组无区别。随着脑出血时间的延长,pro NGF、p75NTR mRNA和蛋白表达水平逐渐升高,24h以上至72h达到高峰,72h后仍处于较高水平。与对照组和6h以内的脑出血组比较,脑出血后6h以上至24h内(包括24h),脑组织NRH2、sortilin的mRNA与蛋白表达水平及Bax表达水平即增加,24h以上至72h内达高峰,72h后仍维持在较高水平。但与对照组比较,6h以内的脑出血组上述指标无显著性差异。与对照组相比,6h以内的脑出血组Bcl-2表达水平无明显变化,脑出血后6h以上的脑出血各组脑组织Bcl-2表达水平降低,以24h以上至72h内处于最低值。NRH2 siRNA组pro NGF、sortilin、p75NTR蛋白表达水平明显低于空白对照组、scramble siRNA组。结论 NRH2在脑出血后血肿周围脑组织中表达增加,通过促进pro NGF、sortilin、p75NTR表达增加Bax/Bcl-2比率,从而诱导脑细胞凋亡。

阿尔茨海默病小鼠脑中p75神经营养因子受体和老年斑的表达

目的探讨阿尔茨海默病(alzheimer’s disease,AD)中p75神经营养因子受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)表达和老年斑形成的时相关系及变化情况。方法取3、6、9月龄雄性B6C3-Tg(APPSwePSEN1dE9)85Dbo/J转基因小鼠及同窝雄性野生型小鼠脑组织,采用刚果红、免疫组化和荧光染色方法观察脑片中老年斑和变性p75NTR阳性神经纤维的表达以及共定位情况,并分别通过ELISA、Western blot方法检测脑匀浆中总β淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)和p75NTR蛋白水平。结果转基因小鼠3月龄时皮层、海马未见老年斑形成,6月龄时皮层和海马可见到少量老年斑形成,在9月龄时此处老年斑沉积明显增多。ELISA检测结果提示Aβ水平随小鼠月龄增加而增多。与同龄野生型小鼠相比,3月龄转基因小鼠皮层和海马可见p75NTR阳性神经纤维增多,且部分神经纤维末梢变性膨大;6月龄者皮层、海马p75NTR阳性神经纤维增多,出现部分呈不规则球形的变性神经末梢;9月龄者皮层、海马p75NTR变性神经末梢显著增多。野生型小鼠在各年龄段均未见变性的p75NTR阳性神经末梢。Western blot结果表明转基因和野生型小鼠脑内p75NTR水平均随着年龄增加而增加,且同月龄间相比前者高于后者(P<0.01)。共聚焦显微镜观察到p75NTR阳性的变性神经末梢位于老年斑中心部位,而不表达p75NTR的变性神经末梢位于老年斑外周。结论在转基因小鼠脑内Aβ能增加p75NTR的表达;p75NTR阳性神经纤维早于老年斑出现,且在老年斑形成后位置靠近老年斑中心,提示其促进了Aβ沉积的起始过程。

马尾受压后腰骶部脊髓中P75神经营养因子受体的表达及其与神经元凋亡的关系

目的:观察大鼠马尾受压后腰骶部脊髓中P75神经营养因子受体(P75 neurotrophic receptor,P75NTR)的表达,探讨P75NTR与前角神经元凋亡的关系。方法:48只雌性成年SD大鼠,随机分为正常组(n=6)、对照组(n=6)和实验组(n=36),正常组不作任何处理,对照组行假手术,实验组在L4平面置入半圆柱体硅胶棒,占椎管截面积约75%～80%,造成马尾急性受压。实验组分别于造模后1d、3d、5d、7d、14d、28d时取L4压迫节段近端脊髓组织(L2水平脊髓),正常组和对照组在第7天时处死取相应部位脊髓组织,切片后进行P75NTR免疫组织化学染色,观察P75NTR的表达;末端转移酶标记技术(TUNEL法)检测脊髓前角运动神经元凋亡情况。用SPSS13.0统计软件进行组间t检验和相关性分析。结果:正常组和对照组脊髓前角有少量P75NTR表达;实验组造模后1d脊髓前角即有P75NTR表达,7d达到峰值,14d、28d表达呈减少趋势,实验组除1d时外其余各时间点与正常组和对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。正常组和对照组脊髓组织中可见少量神经元凋亡,实验组造模后1d脊髓前角神经元凋亡数量明显增多,7d达到峰值,14d、28d凋亡呈减少趋势,实验组各个时间点与正常组和对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。神经元凋亡率与P75NTR表达存在平行变化关系。结论:马尾受压后脊髓前角运动神经元表达P75NTR,其表达量与神经元凋亡率呈正相关。

神经营养因子受体p75NTR在乳腺癌耐药细胞中的表达及其与多药耐药的相关性

目的:探讨神经营养因子受体p75NTR在乳腺癌耐药细胞中的表达及其与多药耐药的相关性。方法:Western blot检测多种乳腺癌细胞系中p75NTR蛋白表达;基因重组构建p75NTR的正义及反义载体并检测转染p75NTR及p75NTR-si RNA后乳腺癌耐药细胞系MDA-MB-231/ADR中p75NTR蛋白表达;CCK-8法检测MDA-MB-231/ADR对各种化疗药物的敏感性及转染p75NTR及p75NTR-si RNA后对耐药的影响。结果:p75NTR在乳腺癌耐药细胞系中的表达高于亲本细胞;p75NTR过表达载体上调MDA-MB-231/ADR中p75NTR的表达;过表达p75NTR可增强MDA-MB-231/ADR对ADM、GEM和OXA的耐药性。结论:p75NTR在乳腺癌耐药细胞系中的表达高于其亲本细胞,过表达p75NTR能够降低多药耐药细胞对化疗药物的敏感性而促进其多药耐药性。

神经营养因子受体p75在人食管鳞癌细胞中的表达研究

目的研究神经营养因子受体p75（p75^NTR）在人食管鳞癌细胞中的表达。方法应用免疫组织化学法检测100例人食管鳞癌样本中p75^NTR的表达情况，分析其与患者年龄、性别、肿瘤直径、淋巴转移、病理分化程度、3年存活率的关系。结果100例患者中p75^NTR阳性率为69．0％（69／100），在食管鳞癌组织中p75^NTR阳性和阴性表达患者年龄、性别、肿瘤直径、病理分化程度，差异有统计学意义[（61±7）岁比（56±8）岁，阳性表达率男性79．7％（47／59）比女性53．7％（22／45）、阴性表达男性占比38．7％（12／31）比女性占比61．3％（19／31），（4．6±1．1）cm比（3．2±1.4）cm，病理分化程度：高分化44．9％（31／69）比9．7％（3／31）、中分化50．7％（35／69）比71．0％（22／31）、低分化4．3％（3／69）比19．4％（6／31），P〈0．05]，淋巴转移差异无统计学意义（P〉0．05）。结论p75^NTR在食管鳞癌患者中表达程度不同，高表达患者病理分化差，3年存活率低；p75^NTR在食管鳞癌发病过程中可能起重要的作用，其表达对判断入食管鳞癌临床预后有指导作用。

骨组织工程研究中P75神经营养因子受体的作用及应用价值

背景:P75神经营养因子受体属于低亲和力神经营养因子受体,它不仅在神经生长、发育和维持功能完整性等方面具有重要作用,而且与骨组织修复、增强干细胞特性等方面也密切相关。目的:对目前P75神经营养因子受体在骨组织修复及再生中的研究进展以及价值进行综述。方法:计算机检索中国生物医学文献数据库、CNKI数据库、PubMed数据库以及Elsevier数据库的相关文献,检索词为"骨修复,骨再生,P75,P75NTR,bone repair,bone regenerate,tooth development,facialnerve,stemcell"。查阅1987年9月至2018年4月期间收录的P75神经营养因子受体在骨组织再生修复方面的相关文章,最终纳入47篇文献进行结果分析。结果与结论:(1)研究报道P75神经营养因子受体能促进牙齿的发育和面神经的修复,促进骨组织的矿化和缩短骨愈合的时间,还能通过调节干细胞的特性来间接促进骨愈合;(2)也有研究者认为P75神经营养因子受体诱导的细胞凋亡可能会阻碍骨折的愈合,甚至导致骨折不愈合;(3)对于P75神经营养因子受体在骨组织修复方面所表现出双重作用的通路机制,未来还需要更深入的研究;(4)目前关于P75神经营养因子受体在骨组织修复的研究还仅仅局限于基础研究,临床应用的报道还很少。

p75神经营养因子受体在神经退行性疾病中的作用

近年来,研究发现神经营养因子受体p75NTR在包括阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)、帕金森病(Parkinson′s disease,PD)、亨廷顿病(Huntington′s disease,HD)、肌萎缩性侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)、多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)等神经退行性疾病的发生发展中起到关键调控作用。该文综述近年来p75NTR通过引起神经元凋亡,轴突变性等造成认知和记忆功能障碍的研究进展,探讨p75NTR作为潜在治疗靶点在神经退行性疾病治疗中的应用前景。

大鼠脑出血后不同时期神经营养因子受体p75、神经生长因子前体、酪氨酸激酶A的表达及其与细胞凋亡的相关性

目的研究脑出血后血肿周围组织中神经营养因子受体p75(p75NTR)、神经生长因子前体(proNGF)、酪氨酸激酶A(TrkA)的表达及细胞凋亡率,进一步探讨其在脑出血后的细胞凋亡中所发挥的作用。方法制作大鼠脑出血模型,于术后6h、24h、72h、10d处死各组大鼠获取所需脑组织标本,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫组化SP法检测p75NTR、TrkA、proNGF的蛋白表达水平,实时荧光定量PCR检测p75NTR、TrkA的基因表达水平。结果脑出血后p75NTR、proNGF表达水平及p75NTR/TrkA值与对照组比较显著升高(P<0.01),且动态变化规律与脑细胞凋亡率相似;72h后TrkA的动态变化规律与细胞凋亡率相反。结论脑出血后proNGF与p75NTR的结合可能参与介导脑细胞凋亡,p75NTR/TrkA值增高时,proNGF及p75NTR以介导细胞凋亡为主;TrkA在脑出血后72h内神经营养作用被抑制,72h后可能发挥神经营养作用。

肝损伤修复过程中p75神经营养因子受体的作用

p75神经营养因子受体(p75NTR)是肝星状细胞(HSC)表面表达的与神经生长因子(NGF)特异结合的受体,在肝脏损伤修复过程中发挥重要作用。在肝脏损伤修复过程中,p75NTR能提高肝组织肝细胞生长因子的表达,促进受损肝细胞的再生和肝组织结构的恢复;对于静息状态的HSC,p75NTR能促进HSC活化;在肝损伤晚期,随着再生肝细胞和活化HSC的增多,NGF分泌明显增加,NGF与p75NTR结合能促进活化的HSC凋亡和肝纤维化逆转。

Th1/Th2平衡对寒凝血瘀证原发性痛经大鼠神经生长因子及其受体的影响

目的 探究1型辅助性T细胞/2型辅助性T细胞(Type 1 helper T cells/type 2 helper T cells, Th1/Th2)平衡偏移对寒凝血瘀证原发性痛经(Primary dysmenorrhea, PD)大鼠子宫组织神经生长因子(Nerve growth factor, NGF)及其受体的影响,进一步揭示PD的发病机制。方法 将32只雌性大鼠,按随机数字表法分为空白组、模型组、Th1偏移组、Th2偏移组,每组各8只。建立寒凝血瘀证PD大鼠模型,在此模型基础上建立Th1偏移PD模型及Th2偏移PD模型。比较各组大鼠扭体反应,检测各组大鼠子宫组织中神经生长因子(Nerve growth factor, NGF)、酪氨酸激酶受体A(Tropomyosin-receptor kinase, TrkA)及p75营养因子受体(p75 neurotrophin receptor, p75NTR)蛋白含量及mRNA转录水平。结果 扭体潜伏时间:与模型组比较,Th1偏移组和Th2偏移组,差异无统计学意义(P>0.05);Th2偏移组较Th1偏移组缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。30 min内扭体次数:与模型组比较,Th1偏移组明显减少,差异有统计学意义(P<0.01),Th2偏移组明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠NGF、TrkA及p75NTR蛋白表达及mRNA水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,Th1偏移组NGF、TrkA蛋白表达及mRNA水平降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),p75NTR mRNA水平降低,差异有统计学意义(P<0.01);Th2偏移组NGF、TrkA及p75NTR蛋白表达及mRNA水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 Th1/Th2细胞平衡干预NGF及其受体表达可能是寒凝血瘀证PD的发病机制之一。

基于p75神经营养素受体提出PND治疗的新思路

围术期神经认知功能障碍(PND)被推荐用以定义围术期认知功能下降,包括术后谵妄(POD)和术后认知功能障碍(POCD)[1,2]。PND主要表现为对多个认知领域产生影响,如注意力、记忆、执行能力及信息处理速度等[3],主要特点是患者在麻醉和手术之后认知功能的长时间下降和衰退[4],严重降低了患者生活质量,延长术后住院时程,且具有较高的死亡率[5]。尽管PND受到越来越多的关注和重视,但其确切的病理机制尚不清楚。

乌头汤对DPN大鼠NGF受体TrkA、p75NTR表达的影响

[目的]通过观察乌头汤对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠胫神经神经生长因子(NGF)受体、酪氨酸蛋白激酶A(TrkA)和p75神经营养因子受体(p75NTR)表达及血清NGF含量的影响,探索该方改善DPN的可能机制。[方法]Wistar大鼠腹腔注射链尿佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,观察乌头汤对胫神经纤维组织TrkA、p75NTR及血清NGF的影响。[结果]干预前后模型组和乌头汤组均较空白组FBG显著升高(P<0.01),各组内FBG在干预前后无统计学差异(P>0.05);与模型组比较,乌头汤组血清NGF含量明显升高(P<0.05),神经组织p75NTR明显降低(P<0.05)。乌头汤组p75NTR免疫组化染色阳性表达程度较模型组明显降低。[结论]乌头汤改善DPN的作用可能与其能够调节神经纤维p75NTR含量和血清NGF含量有关。

NGF与TrkA受体在儿童膀胱过度活动症中的研究进展

神经生长因子(NGF)因其在神经细胞的存活、生长以及分化过程中发挥重要作用而得到广泛研究。它分布于机体的各处,根据所结合受体发挥不同的病理生理作用。原肌球蛋白相关激酶A(TrkA)是其高亲和力受体,诸多研究表明NGF在与其结合后,根据其下游不同的信号转导通路而发挥不同作用。NGF与其结合后还对体内发生的其他信号转导通路有交叉影响作用。本文从不同的疾病症状对NGF与TrkA结合后的信号转导通路进行综述,从而探讨NGF/TrkA信号通路在儿童膀胱过度活动症的作用。

ProBDNF/p75^(NTR)在脓毒症患者外周血淋巴细胞中的表达变化及对淋巴细胞分化的影响

目的:脓毒症是宿主对感染的反应失调引起的危及生命的器官功能障碍。由于缺乏有效的治疗手段,脓毒症一直是临床治疗的难点和挑战。研究表明脑源性神经营养因子前体(pro-brain-derived neurotrophic factor,proBDNF)可通过结合其高亲和力受体p75神经营养因子受体(p75 neurotrophin receptor,p75^(NTR))激活下游信号通路,扰乱免疫炎症微环境,在脓毒症病程的进展中发挥重要作用。本研究主要探讨淋巴细胞来源的proBDNF/p75^(NTR)在脓毒症患者中的表达变化及其对淋巴细胞分化的影响。方法:收集健康志愿者(对照组,n=40)和初次入院的脓毒症患者(脓毒症组,n=40)外周血样本,进行血常规临床指标检测,采用流式细胞术检测淋巴细胞亚群及其proBDNF/p75^(NTR)的表达变化;体外分选对照组外周血淋巴细胞并采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激培养,流式细胞分析技术检测LPS刺激对淋巴细胞亚群proBDNF/p75^(NTR)的表达影响;随后采用p75^(NTR)的拮抗剂(p75^(ECD)-Fc)抑制p75^(NTR)观察对淋巴细胞分化的影响。结果:与对照组相比,脓毒症组患者入院时白细胞计数、中性粒细胞计数和中性粒细胞百分比均显著升高,淋巴细胞计数与淋巴细胞百分比均显著降低(均P<0.001),中性粒细胞与淋巴细胞比值、单核细胞与淋巴细胞比值均显著升高(均P<0.05)。与对照组相比,proBDNF在脓毒症组外周血中CD19^(+)B细胞的表达上调(P<0.05),而p75^(NTR)在CD19^(+)B细胞、CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞中的表达均上调(均P<0.05)。体外采用LPS刺激可诱导对照组外周血淋巴细胞的proBDNF/p75^(NTR)表达上调(均P<0.05),趋势与在脓毒症组外周淋巴细胞的表达变化基本一致。抑制p75^(NTR)可增加CD4^(+)T细胞和CD19^(+)B细胞的百分比,促进细胞因子IL-4和IL-10的表达,并降低IL-1β和IL-6的产生(均P<0.05)。结论:脓毒症患者入院时即处于以淋巴细胞数量减少为特征的免疫抑制阶段,同时伴有中性粒细胞占比增加。ProBDNF/p75^(NTR)在脓毒症患者外周血淋巴细胞表达增加,抑制p75^(NTR)可能通过调节淋巴细胞的分化,参与脓毒症进展。

狂犬病病毒受体P75^(NTR)原核表达的抗原性分析及多克隆抗体制备

【目的】分析狂犬病病毒(Rabies virus,RV)神经营养因子受体P75(P75NTR)原核表达的抗原性及制备出多克隆抗体,为进一步研究RV与P75NTR的相互作用机制奠定基础。【方法】采用RT-PCR从感染Flury株的NA细胞中克隆P75NTR基因,选取P75NTR基因的418~681 nt和831~1080 nt两个区域(共513 nt,编码171个氨基酸),与p ET-32a(+)重组构建原核表达载体,然后转化BL21(DE3)感受态细胞进行表达,再以纯化的P75NTR重组蛋白免疫昆明小鼠制备抗P75NTR抗体,并以Western blotting和间接免疫荧光试验(IFA)检测其抗原性。【结果】以原核表达载体p ET-P75-513转化BL21(DE3)感受态细胞,经0.2 mmol/L IPTG诱导6 h可获得较高表达量的P75NTR重组蛋白,且主要以可溶性蛋白形式进行表达,可用Ni-NTA树脂分离柱进行纯化。经Western blotting和IFA检测,发现制备获得的抗P75NTR抗体能与NA细胞表面自然的P75NTR及转染BHK-21细胞表达的P75NTR发生良好反应,且抗体效价高,可达1∶16000。【结论】原核表达的RV受体蛋白P75NTR抗原性强,免疫小鼠获得的多克隆抗体特异性高,反应性良好。

穴位埋线对血管性痴呆大鼠血液流变学和海马CA1区神经元p75NTR表达的影响

目的:观察穴位埋线(CIAA)对血管性痴呆(VD)大鼠血液流变学(BR)及海马CA1区p75神经营养因子受体(p75NTR)表达的影响,探讨CIAA对VD大鼠脑缺血性损伤的神经保护机制。方法:采用改良Pulsinelli′s四血管阻断法建立VD大鼠模型,随机数字表法分为VD模型组、CIAA组、尼莫地平组,并设置假手术组作为对照。CIAA组、尼莫地平组分别施行CIAA和尼莫地平治疗。血液流变快测仪检测BR相应指标,免疫组织化学法检测CA1区神经元p75NTR表达,观察并比较各组大鼠BR及p75NTR表达的变化。结果:与假手术组比较,VD模型组大鼠BR、海马CA1区神经元p75NTR表达明显升高(P<0.05或P<0.01)。与VD模型组比较,CIAA组、尼莫地平组BR指标降低、海马CA1区神经元p75NTR表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CIAA可降低痴呆大鼠BR、下调海马CA1区神经元p75NTR表达,这可能是其改善VD大鼠学习记忆的神经保护机制。

p75^(NTR)在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨神经营养因子受体p75NTR在乳腺癌中的表达及与临床病理、激素受体、分子分型之间是否存在相关性。方法:利用免疫组织化学法检测186例乳腺癌组织p75NTR、ER、PR、HER2、Ki-67的表达情况,分析p75NTR与临床病理参数间的相关性。结果:p75NTR在乳腺癌组织中阳性表达占11.3%(21/186),p75NTR的表达与组织分级、Ki-67蛋白水平正相关(P<0.05),与ER表达负相关(P<0.05),与肿瘤大小、是否绝经、淋巴结转移等无关(P>0.05),但在淋巴结转移分层分析中淋巴结转移<4枚与淋巴结≥4之间,p75NTR的表达与之相关(P<0.05);p75NTR表达与Luminal B型及三阴乳腺癌亚型显著相关。结论 :p75NTR可预测三阴乳腺癌及Luminal B亚型,较准确地进行分子分型,为指导临床分层治疗提供依据。

脊髓损伤大鼠触液神经元中p75NTR的表达

目的 :探讨大鼠触液神经元(cerebrospinal fluid-contacting neurons,CSF-CNs)p75神经营养因子受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)在脊髓损伤后的表达变化。方法 :成年雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠36只,按随机数字表法分为正常对照组(6只)、假手术组(6只)和脊髓损伤组(24只),脊髓损伤组采用Allen′s打击模型(10g×3cm)在大鼠脊髓T10段造成急性脊髓损伤,分别于损伤3d、1周、2周、4周后进行取材;对照组不做任何处理,假手术组只暴露脊髓,不击伤脊髓。对各组大鼠运动功能行BBB评分,各时间点取材行病理切片HE染色观察。取材前48h侧脑室注射霍乱毒素B亚单位与辣根过氧化物酶复合物(CB-HRP)特异性标记触液神经元。处死大鼠后,取损伤的脊髓节段10mm,用免疫荧光双标法检测触液神经元p75NTR的表达,ImagePro Plus计数目标神经元CB-HRP/p75双阳性细胞的数目。结果 :假手术组各时间点BBB评分均为21.0±0;脊髓损伤组在术后3d、1周、2周、4周各时间点BBB评分分别为3.20±0.81、10.73±1.02、12.48±1.86、13.29±1.93,两组各时间点差异均具有统计学意义(P<0.05)。HE染色可见正常对照组和假手术组脊髓组织结构完整,细胞形态正常;脊髓损伤组脊髓组织结构紊乱,神经元变性坏死,胶质细胞增生,胶质瘢痕和脊髓空洞形成。免疫荧光双标示正常对照组和假手术组可见少量CB-HRP/p75双阳性细胞,计数分别为5.16±0.55、4.31±0.61,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);脊髓损伤组伤后3d、1周、2周CB-HRP/p75双阳性细胞数分别为13.35±1.53、21.68±2.15、16.26±2.09,与正常对照组和假手术组比较差异均有统计学意义(P<0.05),伤后4周时,CB-HRP/p75双阳性细胞数为4.83±0.73,与正常对照组和假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 :p75NTR可在大鼠脊髓触液神经元中表达,且在脊髓损伤后表达增加,触液神经元可能通过p75NTR参与脊髓损伤的修复过程。

proBDNF-p75NTR通路抑制C6细胞增殖

目的 pro BDNF和成熟BDNF分别通过p75NTR受体和Trk B受体介导相反的生物学作用。微环境变化时,pro BDNF-p75信号通路和成熟BDNF-Trk B通路不平衡可能对细胞生长和增殖产生不同影响。本研究拟探讨不同培养条件下,C6细胞表达pro BDNF及其受体p75NTR的变化,对C6细胞生长和增殖的作用。方法用细胞免疫荧光双标和Western blot方法,检测在含不同浓度血清培养液中培养的C6细胞pro BDNF及其受体p75NTR表达。分别用特异性的pro BDNF抗体阻断内源性pro BDNF,用p75NTR-ECD-Fc阻断p75NTR,用MTT法和Brdu法分别测定内源性pro BDNF及其受体p75NTR对C6细胞生长和增殖的作用。结果 pro BDNF和p75NTR在无血清培养的C6细胞中共表达明显上调,加入pro BDNF抗体(10μg/ml)处理细胞后,C6细胞的生长和增殖明显增加。p75NTR的作用取决于其在不同环境下结合的配体。结论 pro BDNF-p75NTR通路起到平衡成熟BDNF-Trk B通路的作用,一定环境下,二者平衡打破,可能对细胞生长或增殖产生不同影响。

钼对食管癌细胞ECA-109化疗增敏及食管癌干细胞p75NTR的抑制

背景:食管癌化疗过程中很容易出现耐受性,无法达到令人满意的治疗效果,通过使用适当的敏感剂可以有效抑制肿瘤细胞以及肿瘤干细胞的增殖。目的:探讨钼对食管癌细胞ECA-109化疗敏感性的影响及对食管癌干细胞p75NTR的抑制作用。方法:取对数期食管癌细胞ECA-109随机分为空白组、单纯顺铂组、单纯加钼组、顺铂加钼组,后3组采用不同的质量浓度进行实验。利用MTT法检测各组食管癌细胞ECA-109生长增殖情况,流式细胞仪检测各组食管癌干细胞p75NTR比例。结果与结论:不同质量浓度顺铂对食管癌细胞ECA-109增殖有一定的抑制作用,且对食管癌干细胞具有较强的杀伤作用,随着给药质量浓度和时间的增加均呈增强趋势;单纯钼对食管癌细胞ECA-109的增殖抑制作用和对食管癌干细胞的杀伤作用均不明显;顺铂和钼联用对食管癌细胞ECA-109的抑制作用和对食管癌干细胞的杀伤作用增强,与单纯同质量浓度顺铂组及空白对照组比较差异有显著性意义(P<0.05),且呈一定的浓度、时间依赖性。结果表明,钼可以提高顺铂的化疗敏感性,促进顺铂对食管癌细胞ECA-109以及食管癌干细胞p75NTR抑制作用的增强,可以作为一种重要的化疗增敏剂。