新型结核DNA疫苗p846的构建及免疫保护实验研究

目的：评价新型结核DNA疫苗p846诱导细胞免疫应答和抵抗结核杆菌卡介苗（BCG）攻击的能力。方法：通过基因克隆技术构建结核三抗原Rv3615c、Mtb10.4和Rv2660c融合的真核表达质粒p846。选择6~8周龄BALB/c小鼠,随机分成4组：p846疫苗组、pc DNA3.1组、PBS组及BCG组,以肌肉注射的方式分别于0、2、4、6周进行免疫,BCG组在0周皮下免疫1次。末次免疫2周后,分别用Brd U、ELISPOT和FCM法检测细胞免疫效应,4周后用结核菌BCG滴鼻方式进行攻击,6周后取肺组织进行病理切片评估。结果：与PBS组和空载体pc DNA3.1组相比,p846疫苗可有效促进结核特异性淋巴细胞的增殖并显著增加脾脏IFN-γ＋T细胞的数量,且肺组织炎症反应较较轻,其保护效果与BCG相当。结论：新型结核DNA疫苗p846免疫小鼠能引起强烈的细胞免疫应答,有效抵抗结核杆菌BCG的感染。