宣肺调肠方对脓毒症大鼠肠道损伤的修复作用及机制研究

【目的】探讨宣肺调肠方对脓毒症大鼠肠道损伤的修复作用及机制。【方法】将36只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,宣肺调肠方高、中、低剂量组,宣白承气汤组,每组6只。治疗组于造模前连续3 d对应灌胃给药,正常组、模型组给予以等体积蒸馏水灌胃。采用尾静脉注射内毒素(LPS)法复制脓毒症大鼠模型。于造模后3 h,测定血清白细胞介素6(IL-6)含量,丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,苏木素-伊红(HE)染色法观察回肠组织形态学变化,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测回肠组织磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p AMPK)、AMPK蛋白表达。【结果】与正常组比较,模型组大鼠血清IL-6含量、MDA活性明显升高,SOD活性、p AMPK蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,宣肺调肠方高、中、低剂量组血清IL-6含量、MDA活性明显降低,SOD活性、pAMPK蛋白表达水平明显升高,且呈剂量依赖性。模型组回肠组织肠绒毛明显水肿,伴充血、坏死,有炎症细胞浸润,各治疗组明显好转。【结论】宣肺调肠方可修复脓毒症肠功能损伤,其机制可能与抑制炎症反应、抗氧化应激、激活p AMPK通路有关。

有氧耐力运动对增龄大鼠肝细胞氧化应激和炎性因子及其AMPKα/Beclin1通路的影响

目的:采用有氧耐力运动干预增龄大鼠,旨在了解和解析实施有氧耐力运动对大鼠肝脏增龄性老化适应性机制。方法:以SPF级健康雄性3月龄(青年,n=20)、13月龄(中年,n=24)和23月龄(老年,n=24)大鼠,各年龄随机分为青年静息组(Y-SED)、青年运动组(Y-EX)、中年静息组(M-SED)、中年运动组(M-EX)、老年静息组(O-SED)和老年运动组(O-EX)。3组静息组静息,3组运动组实施10周递增负荷规律的中等强度有氧运动。采用HE染色观察大鼠肝细胞形态,采用IHC检测SOD、MDA、IL-1β、IL-10、Beclin1和AMPK/pAMPK等通路相关蛋白。结果:SOD、MDA、IL-1β、IL-10和Beclin1阳性物质都主要集中在肝中央静脉或者肝窦静脉的周围肝细胞。实施有氧耐力运动后,与青年、中年和老年3个年龄的静息组相比,MDA表达在Y-EX组显著下降(Ρ<0. 05),在M-EX组下降(Ρ> 0. 05),在O-EX组显著上升(Ρ<0. 01)。而运动组的大鼠肝细胞SOD表达水平显著上调(Ρ<0. 05),即Y-EX组上调15. 63%,M-EX组上调24. 92%,O-EX组上调23. 98%。实施有氧耐力运动后,Y-EX组的IL-1β和IL-10表达水平均下调,其中IL-1β下调超过50%(Ρ<0. 01),IL-10表达水平稍下调(Ρ> 0. 05);M-EX组的IL-1β和IL-10表达水平均上调(Ρ>0. 05);O-EX组的IL-1β和IL-10表达水平均显著上调(分别为Ρ<0. 05,Ρ<0. 01)。3个年龄的运动组大鼠肝细胞AMPKα1表达水平均出现下调,Y-EX组、M-EX组和O-EX组的AMPKα1表达水平分别下调53. 13%(Ρ<0. 01)、47. 78%(Ρ<0. 01)和1. 88%(Ρ>0. 05),而Y-EX组pAMPKα1表达水平稍下调,M-EX组和O-EX组的pAMPKα1均上调,运动促使各年龄pAMPKα1/AMPKα1比值显著升高。3个年龄的运动组大鼠肝细胞Beclin1表达水平均显著上调,其中Y-EX和M-EX组上调(Ρ<0. 01),O-EX组也上调(Ρ<0. 05)。结论:有氧耐力运动刺激氧化应激和炎性反应保持一种平衡稳定关系,表明有氧耐力运动维护肝组织的正常运转和功能稳态是一种抗逆锻炼机制,即通过氧化应激和炎性反应刺激激活pAMPK/AMPK通路的活性,调控细胞自噬Beclin1,启动适当的细胞自噬,有利于肝组织的正常运转和功能稳态。