同步辐射产生的Ck软X射线对质粒pBK-CMV DNA的辐射生物效应

目的 研究同步辐射产生的Ck软X射线 (Eck =0 2 8keV)对质粒pBK CMVDNA的辐照生物效应。方法 以6 0 Coγ射线为对照 ,把质粒pBK CMVDNA放在特别设计的样品室中 ,以含水的溶液状态均匀接受Ck软X射线辐射 ,然后将其转化入大肠杆菌XL1 Blue中 ,分别以突变率与存活率为指示 ,观察Ck软X射线对质粒pBK CMVDNA的辐射诱导突变作用及对其转化活性的影响。结果 Ck软X射线降低质粒pBK CMVDNA转化活性的能力约是6 0 Coγ射线的 4倍 (D37) ,对质粒pBK CMVDNA的诱变作用约是6 0 Coγ射线的 1 5～ 2倍。结论 与6 0 Coγ射线相比 。

人表皮细胞生长因子基因真核表达质粒的构建

目的：进行外源性基因真核表达的系统构建。方法：以肾组织ｍＲＮＡ为模板进行逆转录ＰＣＲ扩增人表皮细胞生长因子（ｈＥＧＦ）信号肽基因；将扩增的特异性ＤＮＡ条带克隆于ｐＢＫ－ＣＭＶ质粒中进行序列测定；再将已扩增的ｈＥＧＦ基因克隆于测序正确的ｐＢＫ－信号肽双链中，挑选白色菌落进行ＰＣＲ及酶切鉴定。结果：（１）测序结果表明经ＰＣＲ扩增的特异性ＤＮＡ条带的基因序列与ｈＥＧＦ信号肽基因一致；（２）经ＰＣＲ及酶切鉴定获得了序列正确的ｐＢＫ－信号肽－ＥＧＦ真核表达质粒。结论：本法可构建ｈＥＧＦ基因真核表达质粒。