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三核铜配合物[Cu_3L_2](ClO_4)_2(H_2L=1,3-双(2-羟基-1-苯基-亚甲基)-丙烷)的合成与对pBR322 DNA的切断作用 被引量:1
1
作者 沈鹤柏 杨永桃 +3 位作者 杨仕平 蒯丽衡 姜霁 陈红梅 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第12期2029-2032,共4页
利用席夫碱配体 [H2 L =1,3 双 (2 羟基 1 苯基 -亚甲基 ) -丙烷 ]与铜盐作用 ,得到了配合物 [Cu3 L2 ] (ClO4) 2 ,并用X射线单晶衍射测定了其晶体结构 .研究了该三核铜配合物与质粒pBR3 2 2DNA之间的相互作用 ,琼脂糖凝胶电泳实验... 利用席夫碱配体 [H2 L =1,3 双 (2 羟基 1 苯基 -亚甲基 ) -丙烷 ]与铜盐作用 ,得到了配合物 [Cu3 L2 ] (ClO4) 2 ,并用X射线单晶衍射测定了其晶体结构 .研究了该三核铜配合物与质粒pBR3 2 2DNA之间的相互作用 ,琼脂糖凝胶电泳实验结果表明该配合物能够将pBR3 2 2DNA从超螺旋构型切割成开环型和线型 .同时 ,紫外光谱实验可以推测 ,配合物在对pBR3 2 2DNA进行切断时 。 展开更多
关键词 三核铜配合物 [Cu3L2](ClO4)2 1 3-双(2-羟基-1-苯基-亚甲基)-丙烷 合成 pbr322dna 切断作用 琼脂糖凝胶电泳 脱氧核糖核酸
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基于原子力显微镜研究p53蛋白与PBR322 DNA的相互作用
2
作者 陈洋 王艳伟 杨光参 《山东科学》 CAS 2017年第4期106-111,123,共7页
肿瘤(癌症)是由于细胞在复制过程中,DNA损伤不能修复导致细胞凋亡或者细胞无限增殖而形成的。DNA在细胞中转录和翻译都会涉及蛋白与DNA的结合,肿瘤抑制蛋白也是参与这一过程的关键蛋白之一。然而,众多研究发现,肿瘤抑制蛋白p53具有识别... 肿瘤(癌症)是由于细胞在复制过程中,DNA损伤不能修复导致细胞凋亡或者细胞无限增殖而形成的。DNA在细胞中转录和翻译都会涉及蛋白与DNA的结合,肿瘤抑制蛋白也是参与这一过程的关键蛋白之一。然而,众多研究发现,肿瘤抑制蛋白p53具有识别和修复损伤DNA的效果,对于细胞的凋亡、基因的保护和避免癌症发生有着重要的意义。有研究表明,金属镁离子和锌离子可以增强p53蛋白的结构稳定性和p53-DNA的亲和力。因此,我们基于原子力显微镜(AFM),直观地呈现出p53蛋白与PBR322环状DNA相互作用的图像,同时发现p53蛋白可以使环状DNA自身形成聚集或者相交。但是,对于长度相当的5 000bp的线状DNA几乎没有这样的效果,而对于20 000bp DNA不会出现这样的现象。然而,在高浓度镁离子环境下,环状DNA会扭转成为麻花状,即形成超螺旋结构。这一现象,可为p53蛋白功能和作用机理研究提供指导,也为癌症治疗、癌症药物开发以及癌症检测方法提供启发。 展开更多
关键词 P53蛋白 金属镁离子 pbr322环状dna 相互作用 dna超螺旋
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一种新型的石墨烯量子点在光断裂DNA方面的应用
3
作者 栗瑞敏 赵小娟 +1 位作者 岑水斌 向华 《广东轻工职业技术学院学报》 2024年第5期6-11,18,共7页
研究发现及验证了一种新型的石墨烯量子点(GQDs),该量子点具有高效产生单线态氧的能力,并在光断裂DNA领域展现出显著的应用潜力。在可见光照射下,无论是在有氧条件还是厌氧条件下,这种GQDs都能有效地切割质粒pBR322 DNA。通过DNA凝胶电... 研究发现及验证了一种新型的石墨烯量子点(GQDs),该量子点具有高效产生单线态氧的能力,并在光断裂DNA领域展现出显著的应用潜力。在可见光照射下,无论是在有氧条件还是厌氧条件下,这种GQDs都能有效地切割质粒pBR322 DNA。通过DNA凝胶电泳方法,证实了GQDs在光照射下产生单线态氧的能力,并定量评估了其对DNA的切割效果。在有氧和厌氧条件下,GQDs均显示出优异的DNA切割活性,这一结果为深刻理解GQDs与DNA的相互作用机制提供了新的视角。 展开更多
关键词 石墨烯量子点 质粒pbr322 dna 光断裂dna 凝胶电泳方法
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超螺旋pBR322 DNA的STM研究 被引量:2
4
作者 张平城 王中怀 +1 位作者 白春礼 黄熙泰 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1993年第16期1532-1534,共3页
扫描隧道显微镜(STM)是80年代初期新崛起的一种新型表面分析仪器,它具有达到原子级的空前分辩率,十几年来得到高度的重视并取得迅速的进展。近年来,人们已将其用来研究生物大分子的结构,尤其是将其用来揭示重要遗传物质——核酸的结构。... 扫描隧道显微镜(STM)是80年代初期新崛起的一种新型表面分析仪器,它具有达到原子级的空前分辩率,十几年来得到高度的重视并取得迅速的进展。近年来,人们已将其用来研究生物大分子的结构,尤其是将其用来揭示重要遗传物质——核酸的结构。1985年,Baro等开始了这方面的工作,目前STM用来研究脱氧核糖核酸(DNA)的结构已经有一系列的报道。其中,Driscoll等于1990年已获得原子尺度的DNA图像,本实验室白春礼等已成功地用STM观察到三链DNA的存在。但是,STM用来研究生物大分子的结构仍存在一些问题。如何获得易重复的、可靠的结果是尚待进一步探讨的问题。本文用STM成功地对质粒pBR322 DNA进行了成像。 展开更多
关键词 超螺旋 STM pbr322dna dna
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抗环血酸-Fe^(3+)羟自由基生成体系对质粒pBR322 DNA的损伤 被引量:2
5
作者 吕星 陈吉中 方允中 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 1992年第4期268-271,共4页
以抗坏血酸-Fe^(3+)作为自由基生成体系,结合琼脂糖电泳和激光密度扫描等方法,观察了自由基对质粒pBR322 DNA的损伤及过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的防护效能。结果表明,该体系生成的羟自由基可造成DNA的单链断裂而使pBR322的超螺旋构型... 以抗坏血酸-Fe^(3+)作为自由基生成体系,结合琼脂糖电泳和激光密度扫描等方法,观察了自由基对质粒pBR322 DNA的损伤及过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的防护效能。结果表明,该体系生成的羟自由基可造成DNA的单链断裂而使pBR322的超螺旋构型转变为开环构型;过氧化氢酶对羟自由基所致DNA损伤的抑制作用显著,而超氧化物歧化酶无明显抑制作用。 展开更多
关键词 质粒pbr322 dna 维生素C
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BglⅠ限制性核酸内切酶与环状pBR322-DNA专一性和非专一性相互作用的动力学及热力学 被引量:1
6
作者 孙连魁 阮宏 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第4期334-338,共5页
本文选择限制性核酸内切酶BglⅠ和pBR322-DNA为试验系统,用酶促反应的动力学和热力学方法来研究内切酶对环状DNA分子的专一性和非专一性结合及切割过程,求得了各限制位点的切割速度k及活化能E,各限制位点催化速度常数k_c,酶同限制位点... 本文选择限制性核酸内切酶BglⅠ和pBR322-DNA为试验系统,用酶促反应的动力学和热力学方法来研究内切酶对环状DNA分子的专一性和非专一性结合及切割过程,求得了各限制位点的切割速度k及活化能E,各限制位点催化速度常数k_c,酶同限制位点专一性结合的平衡常数k_S非专一性结合的平衡常数k_N及其热力学参数△H,△S。研究表明:不论底物的构型如何(线状还是环状),内切酶都以相似的动力学和热力过程对其进行结合与切割。 展开更多
关键词 BgII内切酶 pbr322dna 动力学
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磁场对质粒pBR322DNA的影响 被引量:7
7
作者 黄德盈 吴士筠 +4 位作者 王宗保 赵蔚 胡杰 陈锋 刘需要 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期457-463,共7页
讨论了经500mT、900mT、1200mT、1500mT恒磁场作用后的质粒pBR322DNA与Ⅱ型限制性内切酶EcoRⅠ、HindⅢ、BamHⅠSalⅠ、PstⅠ、PuvⅡ、TaqⅠ、BglⅠ、RsaⅠ、HinfⅠ... 讨论了经500mT、900mT、1200mT、1500mT恒磁场作用后的质粒pBR322DNA与Ⅱ型限制性内切酶EcoRⅠ、HindⅢ、BamHⅠSalⅠ、PstⅠ、PuvⅡ、TaqⅠ、BglⅠ、RsaⅠ、HinfⅠ、APaⅠ、KpnⅠ等的单酶解、双酶解及多酶解反应。从琼脂糖电泳分离酶解片段的结果,发现经磁场作用过的pBR322DNA在3361—631bp的区段内产生了一个被HinfⅠ识别的新序列GANTC,证明了磁场作用能引起DNA点突变。 展开更多
关键词 磁场 生物效应 质粒 pbr322 dna点突变
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化学核酸酶的合成、表征及与pBR322DNA的作用
8
作者 张建刚 刘艳玲 +1 位作者 丁庆伟 张丽 《山西化工》 2005年第1期5-10,共6页
合成了三角架配体 L ,用红外光谱、核磁共振氢谱、X单晶衍射等手段对配体进行了鉴定。在此基础上 ,用高氯酸镁与其合成镁的金属络合物 ,通过核磁共振氢谱、红外光谱等手段对配合物的结构进行了表征。最后 ,通过电泳技术研究了此配合物与... 合成了三角架配体 L ,用红外光谱、核磁共振氢谱、X单晶衍射等手段对配体进行了鉴定。在此基础上 ,用高氯酸镁与其合成镁的金属络合物 ,通过核磁共振氢谱、红外光谱等手段对配合物的结构进行了表征。最后 ,通过电泳技术研究了此配合物与 p BR32 2 DNA的作用 ,并对机理进行了初步探讨。电泳结果表明 :配合物在生理条件下 (p H=7.0 ,37℃ )与 p BR32 2 DNA反应 2 h,能够断裂DNA ,有的甚至断裂成线性。本工作的意义在于 :配合物在生理条件下 ,能迅速水解 DNA,甚至出现了线性断裂产物。 展开更多
关键词 金属配合物 水解断裂 pbr322dna 化学核酸酶
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Atomic force microscopic study on topological structures of pBR322 DNA
9
作者 张平城 白春礼 +3 位作者 成英俊 方晔 王中怀 黄熙泰 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1996年第1期1-7,共7页
<正> Plasmid pBR322 DNA (0.5mg/mL) isolated from Escherichia coli HB101 was suspended in Tris-HCl-EDTA (1 mol/L - 0.1 mol/L, pH8.5); then a drop of the above solution was deposited on freshly cleaved mica substr... <正> Plasmid pBR322 DNA (0.5mg/mL) isolated from Escherichia coli HB101 was suspended in Tris-HCl-EDTA (1 mol/L - 0.1 mol/L, pH8.5); then a drop of the above solution was deposited on freshly cleaved mica substrate. After adsorption for about 1 min, the sample was stained with phosphotungstic acid. The residua] solution was removed with a piece of filter paper. Afterwards the sample was imaged with a home-made atomic force microscope (AFM) in air. The AFM images of pBR322 DNA with a molecular resolution have been obtained. These images show that pBR322 DNA exists in several different topological structures: (i) relaxed circular DNA with a different diameter; (ii) supercondensed DNA with different particle sizes; (iii) dimeric catenane connected by one relaxed circular molecule and another dose-compacted molecule which might be either supercoiled or intramolecular knotted form; (iv) oligomeric catenane with multiple irregular molecules in which DNA is interlocked into a complex oligomer; (v) possibly-existing 展开更多
关键词 pbr322 dna ATOMIC FORCE microscopy topological structure image.
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华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞DNA拓扑异构酶Ⅰ的影响 被引量:24
10
作者 陈华 孙宇 崔晓楠 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期197-201,共5页
背景与目的:华蟾素注射液是传统抗肿瘤中药制剂,目前药效机制尚不明确。本研究旨在探讨华蟾素注射液对DNA拓扑异构酶Ⅰ(topoisomerase Ⅰ,TOPOⅠ)的影响。方法:采用噻唑蓝还原法(MTT)观察华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞增殖的影响;采... 背景与目的:华蟾素注射液是传统抗肿瘤中药制剂,目前药效机制尚不明确。本研究旨在探讨华蟾素注射液对DNA拓扑异构酶Ⅰ(topoisomerase Ⅰ,TOPOⅠ)的影响。方法:采用噻唑蓝还原法(MTT)观察华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞增殖的影响;采用流式细胞术(FCM)检测对HepG-2细胞周期的影响;采用RT-PCR法检测对HepG-2细胞TOPOⅠmRNA表达的影响;采用TOPOⅠ介导的负超螺旋PBR322 DNA解旋反应检测华蟾素对TOPOⅠ酶活性的影响;采用负超螺旋PBR322 DNA检测华蟾素对DNA的直接抑制作用。结果:华蟾素注射液对HepG-2细胞增殖具有抑制作用,其抑制效应具有时间和剂量依赖性;并将HepG-2细胞阻滞于S期;RT-PCR检测表明,华蟾素注射液可下调TOPOⅠmRNA表达,表现浓度依赖效应;对TOPOⅠ介导的负超螺旋PBR322 DNA解旋反应有抑制作用;对负超螺旋PBR322 DNA没有直接抑制作用。结论:华蟾素注射液能够抑制HepG-2细胞增殖,影响DNA拓扑异构酶Ⅰ酶的mRNA表达及活性可能为机制之一。 展开更多
关键词 华蟾素 TOPOⅠ 肝癌 HEPG-2细胞 pbr322dna
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槲皮素抑制蛋白糖基化及DNA损伤 被引量:11
11
作者 陆敏 李晓明 +3 位作者 卢永翎 郑铁松 张丹 吕丽爽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第1期104-108,共5页
建立牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)-还原糖、牛血清白蛋白-甲基乙二醛/乙二醛(bovine serum albumin-methylglyoxal/glyoxal,BSA-MGO/GO)反应体系,研究槲皮素对反应体系中晚期糖基化终产物(advanced glycation endproducts,AG... 建立牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)-还原糖、牛血清白蛋白-甲基乙二醛/乙二醛(bovine serum albumin-methylglyoxal/glyoxal,BSA-MGO/GO)反应体系,研究槲皮素对反应体系中晚期糖基化终产物(advanced glycation endproducts,AGEs)的抑制作用。考察了槲皮素在不同阶段对BSA-核糖体系中AGEs形成的抑制作用。并对槲皮素抑制二羰基化合物对质粒pBR322DNA的损伤进行研究。结果表明:槲皮素具有抑制BSA-还原糖、BSA-GO、BSA-MGO体系中AGEs形成的作用,达到显著抑制效果的浓度分别为1、0.25、0.25 mmol/L。槲皮素对BSA-MGO体系中AGEs产生的抑制作用强于BSA-GO体系。在BSA-核糖体系中,反应初期随着反应时间的延长抑制作用不断增大,12 d后,抑制作用趋于平缓,维持在60%左右。槲皮素对二羰基化合物对DNA的损伤有抑制作用,且与浓度成一定相关性。 展开更多
关键词 牛血清白蛋白 槲皮素 晚期糖基化终产物 质粒pbr322dna
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Genefinder和EB在DNA电泳谱带定量分析中的比较 被引量:4
12
作者 崔成德 王克林 +1 位作者 李涢 袁朝阳 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第2期452-453,共2页
[目的]比较Genefinder和EB对DNA电泳谱带定量分析的影响。[方法]用加入Genefinder或EB的琼脂糖凝胶进行PBR322DNA电泳,并用凝胶成像分析系统进行标准曲线相关性等分析。[结果]用Genefinder作染料,标准曲线相关性、样品含量百分误差、灵... [目的]比较Genefinder和EB对DNA电泳谱带定量分析的影响。[方法]用加入Genefinder或EB的琼脂糖凝胶进行PBR322DNA电泳,并用凝胶成像分析系统进行标准曲线相关性等分析。[结果]用Genefinder作染料,标准曲线相关性、样品含量百分误差、灵敏度等都比EB好。[结论]用Genefinder作染料不仅提高了定量分析的质量,而且安全、无污染,有利于保护环境。 展开更多
关键词 pbr322dna Genefinder EB 凝胶成像分析系统
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二(2-苯并咪唑亚甲基)胺合锰(Ⅱ)配合物水解切割DNA 被引量:5
13
作者 周庆华 杨频 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期960-964,共5页
本文合成并表征了二(2鄄苯并咪唑亚甲基)胺合锰髤配合物。我们利用凝胶电泳实验研究,发现该配合物在近生理条件下,能有效地切割双链pBR322DNA。通过采用在反应体系中加入自由基清除剂,无氧操作实验,脱水丙二醛产物分析,以及T4DNA连接酶... 本文合成并表征了二(2鄄苯并咪唑亚甲基)胺合锰髤配合物。我们利用凝胶电泳实验研究,发现该配合物在近生理条件下,能有效地切割双链pBR322DNA。通过采用在反应体系中加入自由基清除剂,无氧操作实验,脱水丙二醛产物分析,以及T4DNA连接酶连接实验等方法,确认该切割反应是通过水解途径进行的。进一步地,我们对切割反应进行了较详细的动力学研究,求出其催化速率常数Kcat为0.72±0.02h-1(pH=8,37℃)。 展开更多
关键词 二(2-苯并咪唑亚甲基)胺 锰(Ⅱ)配合物 水解 pbr322dna T4dna连接酶 自由基清除剂 催化速率常数 切割反应 动力学研究 实验研究 凝胶电泳 生理条件 反应体系 操作实验 产物分析 丙二醛
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原子力显微镜研究不同温度下质粒DNA结构变化 被引量:3
14
作者 汪新文 白春礼 +2 位作者 田芳 商广义 曹恩华 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期554-558,共5页
采用原子力显微镜(AFM)在无水乙醇中成象了pBR322质粒DNA。在不同温度范围加热云母表面的DNA溶液,并在相应温度下干燥使DNA充分展开地固定在云母基底上。AFM观察结果表明:在30~40℃,质粒DNA主要是超... 采用原子力显微镜(AFM)在无水乙醇中成象了pBR322质粒DNA。在不同温度范围加热云母表面的DNA溶液,并在相应温度下干燥使DNA充分展开地固定在云母基底上。AFM观察结果表明:在30~40℃,质粒DNA主要是超螺旋和环状分子;在40~50℃,环状分子开环形成线形分子; 在70~80℃,这些线形分子全部变性,解链形成无规线团。我们通过测定pBR322质粒DNA的熔融曲线,发现了两个突变点,对应于AFM所观察到的质粒DNA在加热过程中由环状变成线形、双螺旋解开成单链的两个结构变化过程。这是首次通过AFM直接观察到质粒DNA在不同温度下的结构变化。 展开更多
关键词 dna 质粒dna 原子力显微镜 结构 温度
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钌(Ⅱ)配合物光谱性质及对DNA光切割作用 被引量:1
15
作者 王海滔 刘剑洪 +2 位作者 张黔玲 胡婷婷 田生礼 《深圳大学学报(理工版)》 EI CAS 北大核心 2011年第1期47-53,共7页
用紫外吸收光谱、荧光光谱和荧光淬灭技术,研究钌(Ⅱ)多吡啶配合物[Ru(bpy)2(MDBIP)]2+(bpy为2,2′-联吡啶;MDBIP为3,5-二溴基-咪唑并[4,5-f][1,10]邻菲咯啉)与小牛胸腺DNA的作用.用琼脂糖凝胶电泳法研究配合物对pBR322质粒DNA的光切割... 用紫外吸收光谱、荧光光谱和荧光淬灭技术,研究钌(Ⅱ)多吡啶配合物[Ru(bpy)2(MDBIP)]2+(bpy为2,2′-联吡啶;MDBIP为3,5-二溴基-咪唑并[4,5-f][1,10]邻菲咯啉)与小牛胸腺DNA的作用.用琼脂糖凝胶电泳法研究配合物对pBR322质粒DNA的光切割作用.结果表明,[Ru(bpy)2(MDBIP)]2+与小牛胸腺DNA可能是以一种弱的部分插入的方式相结合,对pBR322质粒DNA有较好的光切割作用. 展开更多
关键词 生物无机化学 脱氧核糖核酸 多吡啶钌配合物 小牛胸腺dna pbr322质粒dna 光切割
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维康醇对DNA拓扑异构酶活性的影响 被引量:1
16
作者 历文 尹晓慧 +5 位作者 段丽丽 陈杰鹏 周雪莹 朱晓琳 牛哲峰 张美侠 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期889-891,共3页
目的探讨维康醇对DNA拓扑异构酶活性的影响。方法以质粒pBR322超螺旋DNA为底物,采用凝胶电泳分别检测维康醇对拓扑异构醇Ⅰ(TopoⅠ)和拓扑异构醇Ⅱ(TopoⅡ)介导的pBR322 DNA解旋反应的影响。结果维康醇对TopoⅠ介导的pBR322解旋反应无... 目的探讨维康醇对DNA拓扑异构酶活性的影响。方法以质粒pBR322超螺旋DNA为底物,采用凝胶电泳分别检测维康醇对拓扑异构醇Ⅰ(TopoⅠ)和拓扑异构醇Ⅱ(TopoⅡ)介导的pBR322 DNA解旋反应的影响。结果维康醇对TopoⅠ介导的pBR322解旋反应无明显的抑制作用,而对TopoⅡ的活性有明显的抑制作用。结论维康醇的直接作用靶点可能是DNATopoⅡ,该药可能成为新的TopoⅡ抑制剂。 展开更多
关键词 维康醇 dna拓扑异构酶 pbr322dna
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全反式维甲酸合钇(Ⅲ)配合物对DNA的切割和键合作用(英文) 被引量:1
17
作者 宋玉民 宋小利 +4 位作者 栾尼娜 杨培菊 芦小林 王流芳 刘颖梅 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1661-1666,共6页
以紫外光谱、荧光光谱、粘度法和凝胶电泳方法研究了全反式维甲酸合钇!配合物与DNA的作用。结果表明,该配合物能在生理条件下比配体和金属离子更有效地切割质粒DNA,体系离子强度和pH值的变化对配合物的切割活性有较大影响,自由基捕捉剂... 以紫外光谱、荧光光谱、粘度法和凝胶电泳方法研究了全反式维甲酸合钇!配合物与DNA的作用。结果表明,该配合物能在生理条件下比配体和金属离子更有效地切割质粒DNA,体系离子强度和pH值的变化对配合物的切割活性有较大影响,自由基捕捉剂的加入不影响配合物的切割活性。该配合物对DNA的切割可能通过水解机理进行。该配合物可使DNA的粘度增加,使EB-DNA体系的荧光强度和DNA溶液的紫外吸收强度降低。据此推断,该配合物主要以嵌入方式与DNA作用。 展开更多
关键词 全反式维甲酸合钇(Ⅲ) 切割反应 质粒dna(pbr322-dna) 小牛胸腺dna
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姜黄素诱导质粒DNA氧化损伤的体外实验 被引量:1
18
作者 孙宇立 仲伟鉴 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2006年第1期31-33,共3页
[目的]以姜黄素-Cu^2+-质粒pBR322DNA离体反应体系,探讨姜黄素对DNA的损伤作用及其机制。[方法]在不同浓度Cu^2+(0-200μmol/L)或抗氧化剂条件下,姜黄素与质粒pBR322DNA于37℃反应0—4h。经琼脂糖凝胶电泳后,扫描采集电泳图像... [目的]以姜黄素-Cu^2+-质粒pBR322DNA离体反应体系,探讨姜黄素对DNA的损伤作用及其机制。[方法]在不同浓度Cu^2+(0-200μmol/L)或抗氧化剂条件下,姜黄素与质粒pBR322DNA于37℃反应0—4h。经琼脂糖凝胶电泳后,扫描采集电泳图像,测定质粒DNA各种构型的光密度值,计算超螺旋型DNA所占的百分比(SC%)。[结果]①单独的姜黄素或Cu^2+作用不引起DNA损伤;在[Cu^2+]〉100μmol/L时,姜黄素诱发DNA剂量依赖性损伤;②姜黄素(200μmol/L)+Cu^2+(200μmol/L)对DNA的损伤呈现时间依赖性增强反应;③抗氧化剂——叠氮化钠(NaN3)、硫脲(TU)、过氧化氢酶(CAT)能明显抑制姜黄素和Cu^2+造成的DNA损伤;Cu^+的特异络合剂BCS(hathocupminedisulfnnic acid)也能抑制损伤作用。[结论]姜黄素在一定浓度Cu^2+存在下。可引起DNA的氧化损伤,并具有剂量-反应关系和时间-效应关系。 展开更多
关键词 姜黄素 质粒pbr322dna 活性氧 氧化损伤 体外实验
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Mechanism of cleaving DNA through hydrolysis of a novel complex of Mg containing dien ligand 被引量:2
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作者 Pin YANG Ai Xin SONG Xiao Yi FAN (Institute of Molecular Science, Shanxi University, Taiyuan 030006) 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2000年第1期35-36,共2页
A series of metal complexes were designed and synthesized and a novel binuclear magnesium complex has been selected, namely [Mg-2(dien)Cl(OH2)(2)]Cl-2 . H2O (dien=diethylene-triamine), which can cleave the plasmid pBR... A series of metal complexes were designed and synthesized and a novel binuclear magnesium complex has been selected, namely [Mg-2(dien)Cl(OH2)(2)]Cl-2 . H2O (dien=diethylene-triamine), which can cleave the plasmid pBR322 DNA effectively in close to physiological condition without adding any external materials. Through biological and chemical methods, especially the comparative experiments, we find the interaction between the complex and DNA belongs to hydrolytic mechanism. 展开更多
关键词 pbr322 dna metal complexes dien ligand BDNPP
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质粒DNA提取的简便方法 被引量:2
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作者 陈绍兴 李沁 +3 位作者 董艳 杨权芬 陈娅 钱丽芳 《天津农业科学》 CAS 2009年第5期4-5,共2页
以质粒pBR322为对象,在经典的质粒提取方法的基础上进行了一些改进,将酚氯仿异戊醇抽提和氯仿异戊醇抽提省去。比较了简便方法和经典方法提取质粒的效果,结果显示:两种方法均能够提取出质粒DNA,RNA的量并没有比经典方法提出来的多;简便... 以质粒pBR322为对象,在经典的质粒提取方法的基础上进行了一些改进,将酚氯仿异戊醇抽提和氯仿异戊醇抽提省去。比较了简便方法和经典方法提取质粒的效果,结果显示:两种方法均能够提取出质粒DNA,RNA的量并没有比经典方法提出来的多;简便方法抽取的质粒,蛋白含量稍稍多于后者;简便方法节省了大约一半的提取时间及大量的药品,并且减少了有害的化学物质对人体的危害,是一种经济实用的方法,完全可以满足一般实验需要。 展开更多
关键词 质粒dna 提取 方法 pbr322
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