鞘内应用氯胺酮对吗啡耐受大鼠脊髓pCREB表达的影响

目的探讨鞘内注射氯胺酮对吗啡耐受大鼠脊髓pCREB表达的影响。方法24只雄性SD大鼠,随机均分成4组：C组（对照组）,鞘内注射0.9%生理盐水10μL;M组（吗啡组）,吗啡10μg;MK组（吗啡加氯胺酮组）,吗啡10μg加氯胺酮25μg;K组（氯胺酮组）,氯胺酮25μg。每日给药2次,连续8 d。用药前和用药后30 min通过甩尾实验观察各组热痛阈的变化。最后一次给药后次日处死动物,取L4～5脊髓,免疫组织化学染色,检测pCREB在大鼠脊髓背角的表达。结果随着用药天数增加,M组对吗啡逐渐耐受,到第7 d与C组比较无统计学差异（P〉0.05）。MK组最大镇痛效应百分比（MPE%）逐渐降低,但始终高于M组,尤其是用药后4～8 d（P〈0.01）。MK组与C组和K组在任何时点都有差异。M组脊髓背角pCREB蛋白表达明显高于其他组（P〈0.01）,MK组与C组比较升高不明显（P〉0.05）。结论氯胺酮有延缓吗啡耐受作用,机制与其抑制pCREB蛋白上调有关。

七氟醚-N2O麻醉对青年小鼠空间学习和记忆功能及pCREB和Egr1表达的影响

目的研究七氟醚-N2O麻醉后青年小鼠的空间学习和记忆能力以及海马磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(phosphorylated cyclic AMP response element-binding protein,pCREB)和早期生长反应因子1(early growth response factor 1,Egr1)的表达,并与老年小鼠进行比较。方法12只3月龄和12只18月龄小鼠随机分为对照组和实验组,每组各6只。48 h后进行为期6天的获得训练。获得训练结束后24 h进行空间探索实验,实验结束后15 min收集两组小鼠的海马组织,通过Western blot和实时定量PCR方法评估pCREB和Egr1的表达水平。结果未见麻醉损害青年小鼠的空间学习和记忆功能以及海马中pCREB和Egr1的表达水平,麻醉组与对照组比较差异均无统计学意义;而老年小鼠Sev+N2O组在麻醉后第4、5、6天逃逸潜伏期显著长于对照组(P<0.05),两组小鼠游泳速度差异无统计学意义;在空间探索实验中,Sev+N2O组目标象限路程百分比和时间百分比显著低于对照组(P<0.01);海马中pCREB和Egr1的表达水平均较对照组显著下降(P<0.05)。结论七氟醚-N2O麻醉对青年小鼠的空间学习记忆能力没有损害,也不影响海马中pCREB和Egr1的表达,但会对老年小鼠造成损害。

阻断VTA内M5受体抑制大鼠海洛因行为敏化的表达

目的：探讨M5毒蕈碱受体亚型对海洛陶诱导的大鼠行为敏化的影响，以及海洛因敏化后大脑杏仁核和海马中pCREB蛋白表达的变化。方法：SD成年雄性大鼠皮下注射海洛因（0．25mg／kg）或者等量生理盐水，每天一次，测定大鼠自主活动（LA），连续8d，随后戒断10d。在第18天大脑腹侧被盖区（VTA）中分别微注射0．5μl（2μg Oligos）M5受体反义、有义脱氧寡核苷酸、或转染液。处理后24h所有大鼠皮下注射0.25mg／kg海洛因进行激发实验，最后一次LA测定后．各组动物用免疫组化法测定大鼠pCREB蛋白表达。结果：海洛因处理组大鼠与盐水对照组相比，第19天大鼠1h内LA显著增加（P〈0．05），表明0．25mg／kg剂量海洛因已稳定建立了海洛因敏化大鼠模型。