γ-H2AX用于辐射生物剂量计研究的动物模型评价

目的 通过比较γ射线照射诱导大鼠和人淋巴细胞DNA双链断裂（DSBs）修复动力学的变化,评价大鼠用于γ-H2AX焦点辐射生物剂量计动物模型的可行性.方法 采用γ射线外照射Sprague-Dawley （SD）雄性大鼠和健康成人外周血淋巴细胞以及整体照射大鼠,分别于照射后不同时间采用免疫荧光技术检测DSBs分子标志物γ-H2AX焦点的变化,检测修复蛋白pATM（S1981）和pDNA-PKcs（T2609）焦点的形成,以及它们与γ-H2AX焦点的共定位情况.结果 0.5 Gyγ射线照射诱发大鼠和人淋巴细胞γ-H2AX焦点形成和消除动力学相一致,表现为受照后30 min,γ-H2AX焦点形成达到最大值（t大鼠=62.64,t人=28.52,P＜0.05）,6h内快速下降（t大鼠=45.96,t人=14.80,P ＜0.05）,至受照后24 h残留焦点数为最大值的3％ ～8％.γ射线照射后30 min,大鼠和人淋巴细胞pATM （S1981）和pDNA-PKcs（T2609）焦点形成数较未照射对照组显著增加（t大鼠=21.05、25.80,t人=11.07、29.52,P＜0.05）,分别与γ-H2AX焦点共定位比例亦显著升高（t大鼠=5.34、9.14,t人=18.32、51.28,P＜0.05）,占26％ ～ 32％.离体照射和整体照射诱导大鼠淋巴细胞γ-H2AX焦点形成数相一致,而且γ-H2AX焦点形成与照射剂量之间呈良好的线性关系.结论 大鼠为γ-H2AX用于辐射生物剂量计研究提供了很好的动物模型,ATM与DNA-PKcs共激活在辐射诱导大鼠和人淋巴细胞DSBs的修复中发挥重要的作用.