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人转化生长因子β1基因在pET表达系统中的表达
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作者 龙建银 刘莉 王会信 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 1998年第3期180-183,共4页
目的:研究人转化生长因子β1(TGFβ1)成熟肽基因在大肠杆菌中的表达。方法:利用pET-3b载体,分别从宿主、培养基、诱导时间及转录终止子的距离等方面对TGFβ1的表达进行了优化。结果:TGFβ1在大肠杆菌中获得一... 目的:研究人转化生长因子β1(TGFβ1)成熟肽基因在大肠杆菌中的表达。方法:利用pET-3b载体,分别从宿主、培养基、诱导时间及转录终止子的距离等方面对TGFβ1的表达进行了优化。结果:TGFβ1在大肠杆菌中获得一定程度的表达,并存在于包涵体中。结论:利用pET表达系统,可使TGFβ1基因在大肠杆菌胞内获得表达。 展开更多
关键词 转化生长因子Β 基因表达 pet表达系统 大肠杆菌
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禽流感病毒M_(2e)基因与鸡IgG Fc基因在大肠杆菌中的融合表达和纯化 被引量:1
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作者 蔡家利 余华 +4 位作者 胡仁建 于丽 刘海军 李静远 叶芬 《重庆理工大学学报(自然科学)》 CAS 2010年第1期38-41,共4页
将含禽流感病毒M2蛋白膜外区(M2e)且偶联了鸡IgG Fc片段的重组质粒pET32a(+)的大肠杆菌,用终浓度为0.5 mmol/LIPTG在37℃下诱导表达,获得了包涵体表达的目的蛋白。Western-blotting试验表明,M2e能与兔抗禽流感H5阳性血清发生反应,且在4... 将含禽流感病毒M2蛋白膜外区(M2e)且偶联了鸡IgG Fc片段的重组质粒pET32a(+)的大肠杆菌,用终浓度为0.5 mmol/LIPTG在37℃下诱导表达,获得了包涵体表达的目的蛋白。Western-blotting试验表明,M2e能与兔抗禽流感H5阳性血清发生反应,且在47kD处出现一条特异性条带,具有良好的免疫学活性.表达产物通过His-Ni2+柱亲和层析后,得到了较好的纯化效果。本实验为进一步研究M2蛋白的生物学活性、检测方法及通用疫苗的开发奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 M2e蛋白 pet32a(+)原核表达系统 纯化
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HβD-3在大肠杆菌中的融合表达与纯化 被引量:1
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作者 朱钧萍 李改瑞 +2 位作者 杜启科 郭中敏 陆家海 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期68-74,共7页
抗菌肽是生物体内合成的一种具有抗菌活性的多肽类物质,对多种病原体乃至耐药性菌株具有明显的杀伤作用,是固有免疫及适应性免疫的重要参与物质。HβD-3是人体内一类内源性多肽,与其它β-防御素相比,耐高盐,具有灭活多种耐药性菌株的能... 抗菌肽是生物体内合成的一种具有抗菌活性的多肽类物质,对多种病原体乃至耐药性菌株具有明显的杀伤作用,是固有免疫及适应性免疫的重要参与物质。HβD-3是人体内一类内源性多肽,与其它β-防御素相比,耐高盐,具有灭活多种耐药性菌株的能力。针对如何高效表达和快速纯化这个问题,研究选用pET-EI质粒载体在E.coli BLR(DE3)表达原始序列HβD-3及密码子优化序列HβD-3i。经密码子改造后的重组抗菌肽HβD-3i的表达量是原始序列HβD-3表达量的约12倍之多。对融合表达产物进行"ITC法"纯化蛋白,纯化后的HβD-3i具有与天然HβD-3相似的生物学活性,对金黄色葡萄球菌的活性强于伤寒沙门菌。表明利用pET-EI原核表达系统表达HβD-3是可行的,且因该纯化方法经济简便,为实现HβD-3大规模生产奠定基础。 展开更多
关键词 HβD-3 HβD-3i pet—EI表达系统
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