靶向克隆法构建pET15b-VP3原核表达载体

目的探索利用PCR产物靶向克隆法构建能够表达凋亡素的pET15b-VP3原核表达载体。方法以PGEX-6P-1/TAT-VP3质粒为模板,PCR扩增VP3基因的366bp片段,应用靶向克隆酶,将VP3基因插入到线性pET15b,得到重组表达载体pET15b-VP3,经过筛选,挑选出阳性克隆进行XhoⅠ和BamHⅠ双酶切,图谱分析和重组质粒核苷酸序列分析以鉴定所构建的原核表达载体。结果 PCR产物经过电泳鉴定可见366bp特征性的VP3片段,重组质粒经双酶切电泳获得了一个大小为366bp的VP3片段,重组质粒测序证实VP3cDNA编码区成功地插入了pET15b,且其序列与GeneBank中VP3cDNA序列完全一致。结论靶向克隆法可快速,高效地构建pET15b-VP3原核表达载体,为进一步研究VP3药用价值奠定了基础。

PET心肌血流量测定

介绍了以15O-H2O和13N-NH3作为显像剂,应用PET和示踪动力学原理进行无创性局部心肌血流量(RMBF)测定的方法,并对RMBF测定中的技术问题,如输入函数校正、部分容积校正和心肌血容积校正方法等进行了简述。

^(18)F-FDG PET/CT对乳腺癌术后复发转移的诊断价值

目的探讨18F-脱氧葡萄糖(fluorine-18fluorodeoxyglucose,18F-FDG)正电子发射体层摄影术(positron emission tomography/CT,PET/CT)在乳腺癌术后复发转移中的诊断价值及其与糖链抗原(carbohydrate antigen,CA)15-3的关系。方法乳腺癌术后疑诊复发转移患者48例,均行18 F-FDG PET/CT全身显像检查,与组织病理或临床随访结果进行对照,计算18F-FDG PET/CT诊断复发转移的特异性、敏感性;检测48例患者CA15-3水平,并依据检测结果分为增高组(CA15-3≥25μg/L)26例和正常组(CA15-3<25μg/L)22例,比较2组18 F-FDG PET/CT复发转移检出率。结果组织病理或临床随访证实复发转移34例;18F-FDG PET/CT发现阳性病灶35例(其中假阳性2例),未发现异常代谢增高灶13例(其中假阴性1例),诊断乳腺癌术后复发转移的敏感性为97.1%,特异性为85.7%,准确性为93.8%,阳性预测值为94.3%,阴性预测值为92.3%;增高组18F-FDG PET/CT复发转移检出率为76.9%,正常组为59.1%,2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 18F-FDG PET/CT在乳腺癌术后复发转移诊断中有重要价值,并适用于CA15-3水平正常者。

肾脏血管平滑肌脂肪瘤肺转移18F-FDG PET/CT显像一例

患者女,55岁.因无意中发现左上腹包块伴发热7d于2011年2月16日入院,无尿频、尿急、尿痛及肉眼血尿.查体：腹平软,左上腹可触及表面光滑肿块,质韧,无触痛,上界不清,内侧至腹直肌外侧缘,下界至肋缘下4横指,双肾区无明显叩击痛.实验室检查：血常规、尿常规及大便常规正常;血钾3.0 mmol/L;肝功能、肾功能、血气分析未见明显异常;肿瘤标记物CEA、NSE、AFP、PSA、CA15-3、CA125均（-）.胸腹部CT检查：腹膜后见巨大类圆形肿块影,病变最大截面约10 cm× 12 cm,内见多发脂肪密度影,增强后可见不均匀网格状强化,左肾实质部分受累（图1）;