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奶牛溶菌酶在大肠杆菌中的分泌表达及抑菌活性研究
被引量:
3
1
作者
李云龙
张海涛
+1 位作者
高峰
顾开朗
《中国饲料》
北大核心
2018年第3期22-25,共4页
为了能在体外获得奶牛溶菌酶(LYZ)并研究其抑菌活性,试验采用人工设计并合成LYZ基因CDS序列,将其克隆至表达载体p ET32T并转化大肠杆菌TOP10,筛选阳性菌株,经IPTG诱导,初步纯化表达产物,并对其进行SDS-PAGE分析和抑菌性检测。重组质粒经...
为了能在体外获得奶牛溶菌酶(LYZ)并研究其抑菌活性,试验采用人工设计并合成LYZ基因CDS序列,将其克隆至表达载体p ET32T并转化大肠杆菌TOP10,筛选阳性菌株,经IPTG诱导,初步纯化表达产物,并对其进行SDS-PAGE分析和抑菌性检测。重组质粒经PCR、双酶切鉴定结果正确,表达产物经SDS-PAGE检测,分子量约为33 k D,与目标蛋白质一致,且对革兰氏阳性菌和阴性菌均有抑菌作用。本研究成功构建原核表达载体LYZp ET32T并获得了有抑菌活性的奶牛溶菌酶蛋白。
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关键词
LYZ
pet32t
TOP10
克隆
抑菌活性
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职称材料
奶牛溶菌酶基因的构建、表达及活性研究
被引量:
1
2
作者
李云龙
高峰
+1 位作者
张海涛
顾开朗
《家畜生态学报》
北大核心
2018年第9期18-21,26,共5页
为在体外获得奶牛溶菌酶(lysozyme,LYZ),人工设计并合成LYZ基因CDS序列,将其克隆至表达载体pET32T并转化大肠杆菌TOP10,筛选阳性菌株,经IPTG诱导,初步纯化表达产物,并对其进行SDS-PAGE分析。结果表明,重组质粒经PCR、双酶切及测序鉴定...
为在体外获得奶牛溶菌酶(lysozyme,LYZ),人工设计并合成LYZ基因CDS序列,将其克隆至表达载体pET32T并转化大肠杆菌TOP10,筛选阳性菌株,经IPTG诱导,初步纯化表达产物,并对其进行SDS-PAGE分析。结果表明,重组质粒经PCR、双酶切及测序鉴定结果正确,表达产物经SDS-PAGE检测,分子量约为33kd,与目标蛋白质一致,且主要以包涵体的形式存在。用比浊法测得的溶菌酶活力为2 139U/mL。研究结果成功构建原核表达载体LYZ-pET32T并表达得到奶牛溶菌酶蛋白,为后续研究与应用奠定了基础。
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关键词
LYZ
pet32t
TOP10
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职称材料
题名
奶牛溶菌酶在大肠杆菌中的分泌表达及抑菌活性研究
被引量:
3
1
作者
李云龙
张海涛
高峰
顾开朗
机构
徐州生物工程职业技术学院
出处
《中国饲料》
北大核心
2018年第3期22-25,共4页
基金
徐州市科技计划项目(KC15N0012)
文摘
为了能在体外获得奶牛溶菌酶(LYZ)并研究其抑菌活性,试验采用人工设计并合成LYZ基因CDS序列,将其克隆至表达载体p ET32T并转化大肠杆菌TOP10,筛选阳性菌株,经IPTG诱导,初步纯化表达产物,并对其进行SDS-PAGE分析和抑菌性检测。重组质粒经PCR、双酶切鉴定结果正确,表达产物经SDS-PAGE检测,分子量约为33 k D,与目标蛋白质一致,且对革兰氏阳性菌和阴性菌均有抑菌作用。本研究成功构建原核表达载体LYZp ET32T并获得了有抑菌活性的奶牛溶菌酶蛋白。
关键词
LYZ
pet32t
TOP10
克隆
抑菌活性
Keywords
LYZ
pet32t
TOP10
cloning
antibacterial activity
分类号
S816 [农业科学—饲料科学]
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职称材料
题名
奶牛溶菌酶基因的构建、表达及活性研究
被引量:
1
2
作者
李云龙
高峰
张海涛
顾开朗
机构
徐州生物工程职业技术学院
出处
《家畜生态学报》
北大核心
2018年第9期18-21,26,共5页
基金
徐州市科技计划项目(KC15N0012)
文摘
为在体外获得奶牛溶菌酶(lysozyme,LYZ),人工设计并合成LYZ基因CDS序列,将其克隆至表达载体pET32T并转化大肠杆菌TOP10,筛选阳性菌株,经IPTG诱导,初步纯化表达产物,并对其进行SDS-PAGE分析。结果表明,重组质粒经PCR、双酶切及测序鉴定结果正确,表达产物经SDS-PAGE检测,分子量约为33kd,与目标蛋白质一致,且主要以包涵体的形式存在。用比浊法测得的溶菌酶活力为2 139U/mL。研究结果成功构建原核表达载体LYZ-pET32T并表达得到奶牛溶菌酶蛋白,为后续研究与应用奠定了基础。
关键词
LYZ
pet32t
TOP10
Keywords
LYZ
pet32t
TOP10
分类号
S811.5 [农业科学—畜牧学]
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作者
出处
发文年
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1
奶牛溶菌酶在大肠杆菌中的分泌表达及抑菌活性研究
李云龙
张海涛
高峰
顾开朗
《中国饲料》
北大核心
2018
3
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职称材料
2
奶牛溶菌酶基因的构建、表达及活性研究
李云龙
高峰
张海涛
顾开朗
《家畜生态学报》
北大核心
2018
1
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职称材料
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