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辣椒CaWRKY39基因克隆及其酵母单杂交pGADT7载体构建
1
作者
夏玉琪
郑贤涛
+1 位作者
武士波
刘雅婷
《山东农业科学》
北大核心
2024年第7期39-45,共7页
辣椒是我国重要的经济作物之一,但番茄斑萎病毒(TSWV)极易造成其巨大的生产损失,亟需有效的防治策略。前期研究发现,辣椒转录因子CaWRKY39在TSWV侵染下特异性高表达,推测其可能在辣椒抗TSWV中发挥重要作用。本研究从辣椒‘萧新19’叶片...
辣椒是我国重要的经济作物之一,但番茄斑萎病毒(TSWV)极易造成其巨大的生产损失,亟需有效的防治策略。前期研究发现,辣椒转录因子CaWRKY39在TSWV侵染下特异性高表达,推测其可能在辣椒抗TSWV中发挥重要作用。本研究从辣椒‘萧新19’叶片中克隆了CaWRKY39基因,并对其进行生物信息学分析,结果表明,CaWRKY39的CDS全长为1 035 bp,编码一个由344个氨基酸组成、相对分子量为38 570.53 Da、理论等电点为9.59的稳定疏水蛋白,该蛋白二级结构和三级结构主要由无规则卷曲构成,占比为60.76%。系统进化分析发现CaWRKY39蛋白与棉花GhWRKY39蛋白亲缘关系最近,表明两者功能可能具有相似性。为进一步验证CaWRKY39对相关抗性基因的靶向调控作用,采用RT-PCR技术扩增CaWRKY39基因CDS序列,利用NdeⅠ、EcoRⅠ双酶切,并通过无缝克隆的方法成功构建了酵母单杂交表达载体pGADT7-CaWRKY39。本研究结果可为深入研究CaWRKY39转录因子参与辣椒抗TSWV病毒的分子机理提供技术支持和参考。
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关键词
辣椒
CaWRKY39
生物信息学分析
酵母单杂交
pgadt7载体
构建
下载PDF
职称材料
甘蓝SRK的S域及SCR酵母表达载体的构建及其相互作用区段的研究
被引量:
1
2
作者
彭一波
朱利泉
+9 位作者
杨红
薛丽琰
罗兵
吴志刚
黄丹
杨昆
高启国
李成琼
任雪松
王小佳
《园艺学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期1479-1488,共10页
为了深入研究S位点受体激酶(SRK)和S位点富含半胱氨酸蛋白(SCR)甘蓝自交不亲和(self-incompatibility,SI)信号传导的雌雄决定因子的相互作用机制,以自交不亲和性高的结球甘蓝为材料,采用酵母双杂交体系,构建pGADT7-eSRKs和pGBKT7-...
为了深入研究S位点受体激酶(SRK)和S位点富含半胱氨酸蛋白(SCR)甘蓝自交不亲和(self-incompatibility,SI)信号传导的雌雄决定因子的相互作用机制,以自交不亲和性高的结球甘蓝为材料,采用酵母双杂交体系,构建pGADT7-eSRKs和pGBKT7-SCRs重组载体,并分别转化到Y187和Y2HGold酵母中,通过SD/-Ade-His-Trp-Leu平板上菌落的形成,PCR以及x-α-gal显色反应鉴定转化到酵母中的两个重组质粒相互作用。结果表明,SRK S域的SRK1及SRK4分别与SCR2相互作用,且初步显示其相互作用区域为SRK第1个外显子的第16~421bp的片段和SCR第1876~2068bp的片段。这既为SRK-SCR相互作用提供了具体证据,也为甘蓝自交不亲和性分子机理的深入研究提供了新内容。
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关键词
甘蓝
SRK
eSRKs基因
SCRs基因
pgadt7载体
pGBKT
7
载体
酵母双杂交体系
原文传递
题名
辣椒CaWRKY39基因克隆及其酵母单杂交pGADT7载体构建
1
作者
夏玉琪
郑贤涛
武士波
刘雅婷
机构
云南农业大学农学与生物技术学院
云南农业大学植物保护学院
云南农业大学烟草学院
出处
《山东农业科学》
北大核心
2024年第7期39-45,共7页
基金
国家自然科学基金项目(32260681)。
文摘
辣椒是我国重要的经济作物之一,但番茄斑萎病毒(TSWV)极易造成其巨大的生产损失,亟需有效的防治策略。前期研究发现,辣椒转录因子CaWRKY39在TSWV侵染下特异性高表达,推测其可能在辣椒抗TSWV中发挥重要作用。本研究从辣椒‘萧新19’叶片中克隆了CaWRKY39基因,并对其进行生物信息学分析,结果表明,CaWRKY39的CDS全长为1 035 bp,编码一个由344个氨基酸组成、相对分子量为38 570.53 Da、理论等电点为9.59的稳定疏水蛋白,该蛋白二级结构和三级结构主要由无规则卷曲构成,占比为60.76%。系统进化分析发现CaWRKY39蛋白与棉花GhWRKY39蛋白亲缘关系最近,表明两者功能可能具有相似性。为进一步验证CaWRKY39对相关抗性基因的靶向调控作用,采用RT-PCR技术扩增CaWRKY39基因CDS序列,利用NdeⅠ、EcoRⅠ双酶切,并通过无缝克隆的方法成功构建了酵母单杂交表达载体pGADT7-CaWRKY39。本研究结果可为深入研究CaWRKY39转录因子参与辣椒抗TSWV病毒的分子机理提供技术支持和参考。
关键词
辣椒
CaWRKY39
生物信息学分析
酵母单杂交
pgadt7载体
构建
Keywords
Pepper(Capsicum annuum L.)
CaWRKY39
Bioinformatics analysis
Yeast-one-hybrid
pgadt
7
vector construction
分类号
S641.3 [农业科学—蔬菜学]
Q781 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
甘蓝SRK的S域及SCR酵母表达载体的构建及其相互作用区段的研究
被引量:
1
2
作者
彭一波
朱利泉
杨红
薛丽琰
罗兵
吴志刚
黄丹
杨昆
高启国
李成琼
任雪松
王小佳
机构
西南大学农学与生物科技学院
重庆市蔬菜学重点实验室
出处
《园艺学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第8期1479-1488,共10页
基金
国家自然科学基金项目(30971849)
高校基本科研业务专项基金项目(XDJKC109)
文摘
为了深入研究S位点受体激酶(SRK)和S位点富含半胱氨酸蛋白(SCR)甘蓝自交不亲和(self-incompatibility,SI)信号传导的雌雄决定因子的相互作用机制,以自交不亲和性高的结球甘蓝为材料,采用酵母双杂交体系,构建pGADT7-eSRKs和pGBKT7-SCRs重组载体,并分别转化到Y187和Y2HGold酵母中,通过SD/-Ade-His-Trp-Leu平板上菌落的形成,PCR以及x-α-gal显色反应鉴定转化到酵母中的两个重组质粒相互作用。结果表明,SRK S域的SRK1及SRK4分别与SCR2相互作用,且初步显示其相互作用区域为SRK第1个外显子的第16~421bp的片段和SCR第1876~2068bp的片段。这既为SRK-SCR相互作用提供了具体证据,也为甘蓝自交不亲和性分子机理的深入研究提供了新内容。
关键词
甘蓝
SRK
eSRKs基因
SCRs基因
pgadt7载体
pGBKT
7
载体
酵母双杂交体系
Keywords
Brassica oleracea
SRK
eSRKs gene
SCRs gene
pgadt
7
vector
pGBKT
7
vector
yeast two-hybrid system
分类号
S635 [农业科学—蔬菜学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
辣椒CaWRKY39基因克隆及其酵母单杂交pGADT7载体构建
夏玉琪
郑贤涛
武士波
刘雅婷
《山东农业科学》
北大核心
2024
0
下载PDF
职称材料
2
甘蓝SRK的S域及SCR酵母表达载体的构建及其相互作用区段的研究
彭一波
朱利泉
杨红
薛丽琰
罗兵
吴志刚
黄丹
杨昆
高启国
李成琼
任雪松
王小佳
《园艺学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
原文传递
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