猪甲状腺过氧化物酶最适pH与底物浓度的关系

目的 研究部分纯化的pTPO的最适 pH及其对底物浓度的依赖性关系。 方法 用差速离心、胰酶增溶、盐析及三步柱层析法得到部分纯化的 pTPO。在不同 [H2 O2 ]和 [KI]条件下 ,采用碘氧化法测定 pTPO最适 pH。在不同 [H2 O2 ]条件下 ,采用愈创木酚氧化法测定 pTPO最适 pH。 结果 pTPO催化碘氧化的最适 pH对 [I-]和 [H2 O2 ]有依赖性。当 [I-]一定 ,随 [H2 O2 ]升高 ,最适 pH降低。当 [H2 O2 ]一定 ,随 [I-]升高 ,最适pH升高。而 pTPO催化愈创木酚氧化的最适 pH与 [H2 O2 ]无关。

粗毛栓菌漆酶的分离纯化及部分性质研究

将一株自筛的粗毛栓菌（Trametes gallic Fr）接种在含有麦草粉的培养基中可获得较高产量的漆酶,此酶可以吸附到DEAE-纤维素上而被直接从发酵液中分离出来.采用DEAE-纤维素柱层析,用含有0.1-0.9mol/L NaCl的磷酸缓冲液（pH4.5）进行梯度洗脱,可以获得较为纯化的漆酶,经研究,该菌株所产漆酶,以邻联甲苯胺为底物,最适pH值为4.0,最适反应温度40℃,Km为0.105 mmol/L.

普鲁兰酶N467G突变体的酶学性质分析

在淀粉制糖工业中,普鲁兰酶通常与糖化酶配合使用,其在酸性pH和较高温度下的催化活力是影响淀粉脱支效率的主要因素。该研究通过对长野芽胞杆菌(Bacillus naganoensis)普鲁兰酶蛋白质解折叠自由能的差值(ΔΔG)的计算预测和突变位点稳定性分析,选择突变位点并进行定点突变,获得突变体N467G。与野生型普鲁兰酶分子相比,突变体N467G的最适作用温度提高至60℃,最适作用pH降低至4.5;其在60℃条件下孵育2.5 h或在pH 3.5~5.5孵育1 h残留酶活力均保持在80%以上,稳定性明显提高。此突变体的获得为其后续高效表达与工业化应用奠定了重要基础。