当归黄芪超滤物通过调控ROS/GSH/GPx4轴抑制铁死亡改善放射性大鼠心肌纤维化

目的探讨ROS/GSH/GPx4轴介导的心肌铁死亡在放射性心肌纤维化中的作用机制及当归黄芪超滤物的干预作用。方法50只大鼠随机分为5组。除空白组外,其余各组大鼠均接受X射线单次局部胸部照射建立放射性心肌纤维化模型。辐射后,当归黄芪超滤物各组大鼠分别灌胃给药30 d后,用小动物超声评价心功能;比色法检测SOD、GSH、MDA及Fe^(2+)活性;免疫荧光检测ROS表达;HE、Masson染色观察病理变化及纤维化;透射电镜观察心肌超微结构;Western blot检测铁死亡及纤维化蛋白表达。结果与空白组比较,模型组LVEF和LVFS值降低;Fe^(2+)、MDA、ROS水平上升,SOD、GSH水平下降;HE及Masson显示有炎性细胞聚集及胶原纤维沉积;透射电镜显示受损线粒体数量增多、排列紊乱,形态不规则、变小、嵴紊乱;Western blot显示α-SMA、Collagen I、NOX1蛋白表达升高,GPx4、FTH1蛋白表达降低;与模型组比较,当归黄芪超滤物组大鼠心功能改善,ROS、抗氧化指标恢复,Fe^(2+)水平降低;线粒体结构及纤维化程度减轻;α-SMA、Collagen I、NOX1蛋白表达下降,GPx4、FTH1蛋白表达上升。结论当归黄芪超滤物对放射性心肌纤维化具有抑制作用,其机制可能是通过调控ROS/GSH/GPx4轴抑制心肌铁死亡发挥作用。

运动训练对人体血清中ROS、GSH、GSH-PX影响的研究

为了探讨有氧运动训练和无氧运动训练对人体在不同功能状态下活性氧 (ROS)生成及其清除体系中还原型谷胱甘肽 (GSH)含量和谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -PX)活性的影响 ,分别对 12名从事有氧运动训练和 12名从事无氧运动训练的高水平运动员及其 12名普通大学生进行了相关指标测试 ,结果发现∶安静状态时 ,有氧训练组的GSH含量明显低于无氧训练组和对照组 (P <0 .0 5 ) ,ROS、GSH -PX活性无组间差异 (P >0 .0 5 ) ;定量负荷后 3项指标均无组间明显差异 (P >0 .0 5 ) ;力竭性运动后 ,有氧训练组GSH含量又明显低于无氧训练组和对照组 (P <0 .0 5 ) ,而GSH -PX活性则显著高于无氧训练组和对照组 (P <0 .0 5 ) .无氧训练组与对照组间于三种不同状态下无组间明显差异 (P >0 .0 5 ) .由此表明 ,运动训练对机体ROS代谢水平无明显影响 ,有氧训练能有效降低血清中GSH含量 ,提高机体力竭性运动后血清中GSH -PX的活性 。

ROS、SOD、GSH在糖尿病血管病变中的研究近况

ROS、SOD、GSH与糖尿病血管病变关系密切。该文主要从ROS、SOD、GSH的生物功能,三者与糖尿病血管病变的关系等方面阐述ROS、SOD、GSH在糖尿病血管病变的发生和发展中起着重要作用,探讨中药对糖尿病血管病变ROS、SOD、GSH的影响。为加强中药治疗DM作用机制的系统研究和开发药物提供了新的思路。

植物体内Ca^(2+),pH,ROS活体荧光探针成像研究进展

细胞内信号分子Ca2+与活性氧(ROS)以及细胞pH,是参与细胞多种生理和发育过程调节的关键因子。这些信号分子或细胞化学势之所以在如此众多方面起作用,是因为它们在生物体内从细胞到器官水平上、从数秒到数小时一直是在时空动态变化着的。恰到好处的是,荧光素感受器可以稳定地对细胞内Ca2+,pH与活性氧(ROS)活体原位实时定量。可视化的荧光细胞探针可分为两类:(a)直接染色;(b)基于绿色荧光蛋由基因编码的感受器。绿色荧光蛋白探针可在亚细胞水平上对目标蛋白准确定位,为得到细胞信号高分辨图提供可能。

肝纤维化形成过程中血清ROS和GSH的水平变化

目的研究肝纤维化形成过程中血清活性氧簇(ROS)和还原性谷胱甘肽(GSH)的水平变化及其相互关系,探讨其在肝纤维化形成中的意义。方法 34只健康雄性SD大鼠随机分两组:对照组6只和模型组28只。模型组给予皮下注射40%CCl4油剂,对照组给予相同剂量的油剂皮下注射,注射CCl4后的第2,4,6,8周各杀死模型组大鼠6只,对照组在8周时杀死6只大鼠,留取血清及肝组织待测。收集正常健康对照组及乙肝肝硬化组血清标本各20例,采用比色法分别测定各组血清中ROS及GSH的浓度。结果模型组2,4,6,8周大鼠的ROS水平均较对照组大鼠升高(P <0. 05);模型组2,4,6,8周大鼠的GSH水平与对照组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。肝硬化患者血清ROS浓度明显高于正常组(P <0. 05),而血清GSH浓度与正常组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论肝纤维化形成过程中ROS、GSH的表达水平升高,提示可能参与了肝纤维化的发生。

血清肿瘤标志物联合ROS、SOD、MDA、GSH-Px在消化道恶性肿瘤中的检测意义分析

目的:探讨血清肿瘤标志物联合ROS、SOD、MDA、GSH-Px在消化道恶性肿瘤中的检测意义。方法:将2009年9月-2011年12月于笔者所在医院进行治疗的86例消化道恶性肿瘤患者设为观察组,选取同期的86例消化道良性疾病患者为对照组,将两组患者的血清CA199、CA242、CEA、SCC水平及ROS、SOD、MDA、GSH-Px水平进行比较。结果:观察组的SOD及GSH-Px水平均低于对照组,血清CA199、CA242、CEA、SCC、ROS及MDA水平均高于对照组,且不同分期恶性肿瘤患者均呈现较大幅度的变化,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:血清肿瘤标志物联合ROS、SOD、MDA、GSH-Px在消化道恶性肿瘤中的检测价值较高,对于了解疾病的分期等也有积极的作用。

ROS/pH双重响应的β-咔啉类探针H8DP的构建及肿瘤荧光成像研究

目的:设计、合成活性氧(ROS)/pH双重响应的β-咔啉类小分子荧光探针H8DP,为肿瘤早期诊断提供新的思路。方法:初始原料L-色氨酸和3,4,5-三甲氧基苯甲醛经过环合、氧化、酰肼化、叠氮重排等多步反应得到H8N,再与对硝基苯基氯甲酸酯反应生成活性酯,最后与4-羟甲基苯硼酸频哪醇酯反应得到目标化合物H8DP。采用紫外和荧光光谱研究H8DP的ROS/pH响应性,并从细胞和动物水平评价其肿瘤选择性荧光成像。结果:H8DP在低pH和高ROS水平下产生显著荧光,并能在Hela细胞和小鼠肿瘤组织中选择性成像,实现对肿瘤组织“开-关”模式荧光成像。结论:构建的H8DP具有ROS/pH双重响应性,能在肿瘤组织中选择性荧光成像,为肿瘤早期诊断提供新的思路。

贝那普利对肝纤维化大鼠ROS、GSH浓度及Nrf2表达的影响

目的研究贝那普利对肝纤维化大鼠活性氧簇(ROS)、还原性谷胱甘肽(GSH)及核因子E2相关因子2(Nrf2)的影响,探究其对肝脏的保护作用及可能机制。方法将22只健康雄性SD大鼠随机分为3组:对照组6只、模型组8只、治疗组8只。模型组及治疗组均给予皮下注射40%CCl 4油剂,对照组予以相同剂量的油剂皮下注射,2次/周;治疗组从实验开始给予贝那普利灌胃,直至实验结束,余两组均予以同剂量生理盐水。比色法测定血清GSH及ROS的浓度,real-time PCR检测肝组织Nrf2 mRNA的表达量。结果与对照组相比,模型组ROS的浓度及Nrf2 mRNA的表达量均升高,差异有统计学意义(P<0.05),GSH的浓度有升高趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组相比,给予贝那普利治疗后,治疗组ROS的浓度降低(P<0.05),Nrf2 mRNA的表达量升高(P<0.05),GSH的浓度有升高趋势,差异无统计学意义(P>0.05)。结论贝那普利可能通过降低血清ROS的浓度、增加Nrf2的表达,减缓肝纤维化的进展以保护肝脏。

日粮中添加复合菌制剂对雏鸡盲肠大肠杆菌数、肠道pH值、血液SOD和GSH-px影响的研究

本文报道了日粮中添加复合菌制剂对鸡肠道微生态的调节作用，以及对血液ＳＯＤ和ＧＳＨ－ｐｘ活力的影响。２４只１日龄海兰褐色蛋鸡雄性雏鸡随机平均分成２组，即试验组（１２只）和对照组（１２只）。试验结果表明：（１）盲肠和回肠内容物的ｐＨ值，试验组（６．０２２±０．３７８４，５．１３５±０．３３５５）都极显著低于对照组（６．６６４±０．１９２６，６．０７９±０．３７２９）（Ｐ＜０．０１）。（２）每克盲肠内容物大肠杆菌数（ｌｇＮ），试验组（８．２２４±０．１９６９）与对照组（８．５３±０．３３１４）比较差异极显著（Ｐ＜０．０１）。（３）血液ＳＯＤ和ＧＳＨ－ｐｘ活性，试验组（９．６３±０．３７１８，７５１７．４±３６６．８５）与对照组（８．５６５±０．５７２４，７０６４．７±３５３．６９）比较差异极显著（Ｐ＜０．０１）。说明了复合菌制剂能有效地改善鸡肠道微生态环境，使盲肠大肠杆菌数和盲肠、回肠内容物ｐＨ值极显著降低。并且能极显著提高鸡血液ＳＯＤ和ＧＳＨ－ｐｘ活性。

pH、GSH双敏感型胶束的制备及其载药性能研究

以甲基丙烯酸二乙基氨基乙酯(DEAM)为单体,PEG-Br为引发剂,五甲基二乙烯基三胺(PMDETA)为配体,Cu Br为催化剂,含二硫键的交联剂(CL)为交联剂,通过原子转移自由基聚合(ATRP)反应合成具有pH-GSH敏感性的两亲性聚合物PEG-PDEAM-CL。以1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)为探针测其临界胶束浓度(CMC)为88.24μg/m L。采用透析法将阿霉素(Doxorubicin,DOX)载入聚合物胶束,并在不同pH(pH=2.2、5.0、7.4)环境条件及不同谷胱甘肽(GSH)浓度下(0、0.02、5mmol/L)进行体外释药实验。结果表明,载DOX胶束在酸性条件下及高浓度的GSH条件下释放速度较快,说明PEG-PDEAM-CL具有pH和GSH双重敏感性。

ROS指标在保健食品抗氧化功能检测中的应用及灵敏性比较

目的:将ROS指标应用于保健食品抗氧化功能检测中,并进行敏感性比较。方法:SPF级昆明种雄性小鼠,12月龄,按体重随机分为老龄组对照组、大豆异黄酮低、中、高剂量组(分别为0·08g/kgBW、0·17g/kgBW、0·50g/kgBW),每组10只动物。连续灌胃给予受试物42d后,断头处死动物,取肝脏。以胶原酶和胰蛋白酶联合酶解肝组织,制备肝组织单细胞悬液;以流式细胞术测定肝细胞ROS水平;同时制备肝组织匀浆,以分光光度法测定肝细胞MDA含量及SOD、GSH-Px活性。结果:流式仪直方图分析显示,随着受试物给予剂量的增加,各剂量组肝细胞ROS水平均明显降低(P<0·05);低、高剂量组肝细胞内MDA含量明显减少(P<0·05),中、高剂量组GSH-Px活性明显增加(P<0·05),高剂量组SOD活性亦明显增加(P<0·05);其余剂量组各指标差异无统计学意义(P>0·05)。结论:大豆异黄酮通过降低肝细胞自由基水平而起到抗氧化作用,以FCM检测肝细胞ROS水平可更好地对保健食品的抗氧化功能进行筛选与评价。

pH对RO/NF膜传质影响的研究进展

pH会改变RO/NF膜表面的荷电性质和孔径大小,还会通过影响溶质的存在形式来影响溶质与RO/NF膜的相互作用,所以pH会对RO/NF膜的膜材料及其水通量和截留率产生重要影响。由于这些影响的机理比较复杂,所以这一课题一直是国际上的研究热点,国内外对此已有许多报道。本文综述了pH对RO/NF膜传质影响的研究进展,并展望了pH对NF/RO膜传质影响的模型研究。

基于GSH/GPX4/ROS的铁稳态探讨宣白承气汤干预IV/SPN共感染致肺肠损伤的机制研究

目的通过建立流感病毒/肺炎链球菌(IV/SPN)共感染小鼠模型,基于GSH/GPX4/ROS信号通路介导的铁稳态探讨宣白承气汤的治疗作用及其药效机制。方法实验通过建立流感病毒和肺炎链球菌共感染小鼠模型,经给药治疗后,采用HE染色法观察肺肠组织病理变化;采用Western blotting法检测小鼠肺肠组织中细胞肿瘤抗原p53(Cellular tumor antigen p53,p53)、溶质载体家族7成员11(Recombinant Solute Carrier Family 7 Member 11,SLC7A11/xCT)、谷胱甘肽过氧化酶4(Recombinant Glutathione Peroxidase 4,GPX4)蛋白的表达水平;采用化学荧光法检测小鼠肺肠组织活性氧(reactive oxygen species,ROS)表达水平;采用微板法检测小鼠肺肠组织中谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量。结果与正常组比较,IV/SPN共感染模型小鼠肺肠组织出现严重病理损伤,小鼠肺肠组织SLC7A11、GPX4、GSH表达水平下降,p53、ROS表达水平升高。与模型组相比,宣白承气汤干预后小鼠的肺肠组织病理损伤有明显改善;明显上调小鼠肺肠组织SLC7A11、GPX4、GSH表达水平;下调肺肠组织中p53、ROS表达水平,且均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论宣白承气汤干预治疗IV/SPN共感染能够通过对GSH/GPX4/ROS轴的调控,有效抑制细胞铁死亡的发生,改善IV/SPN共感染引起的肺肠损伤。

脱水和复水金发藓酶清除ROS系统响应机制

以生存于变水环境中的金发藓为材料,通过快速脱水和复水的方式,探究金发藓在脱水胁迫时对于活性氧的响应机制,并进一步探究苔藓植物脱水耐性特性.结果显示:(1)随着脱水时间的增长,金发藓内积累大量的活性氧物质,脱水至120min时·O_2^-、H_2O_2和OH^-等都达到最高水平;(2)抗氧化剂SOD,CAT,APX,ASA,GSH等在脱水复水过程中均上升,复水后下降,但是GSH和ASA在120min复水后期仍未能恢复到对照水平;(3)金发藓在应对氧化胁迫过程中,通过启动ASA-GSH代谢循环途径以应对氧化胁迫.研究表明,金发藓对于脱水环境导致的氧化胁迫具有很强的应对能力,而且在复水后在极短的时间内能恢复生命活性,金发藓有效的抗氧化代谢机制使金发藓能长期生存于多变水环境中.

温度、盐度和pH对仿刺参体腔细胞活性氧产生的影响

无脊椎动物主要依靠天然免疫进行自身防御,而活性氧在保护宿主免受病原侵害方面发挥重要作用。本文研究了环境因子温度,盐度和pH对仿刺参体腔细胞吞噬过程中活性氧产生的影响。不同环境条件处理暂养7d的仿刺参,于不同时间点抽取体腔液,然后用鲁米诺化学发光法检测仿刺参体腔细胞体外吞噬酵母细胞时活性氧的产生。试验结果表明,与对照组相比(17℃),6℃和26℃水温中的仿刺参分别从第1d和第15d极大地增加了活性氧的产生。盐度25和盐度35两组仿刺参体腔细胞比对照组吞噬过程产生更多的活性氧,而盐度16和40两组第1d时活性氧的产生亦显著增强。较低pH同样极大增强了吞噬作用中活性氧的产生。研究结果表明,温度、盐度和pH均可影响仿刺参体腔细胞吞噬过程中活性氧的产生。该试验为进一步研究仿刺参在适应不同环境时的生理生化过程及无脊椎动物免疫机制奠定了基础。

靛玉红衍生物PH Ⅱ-7促进sTRAIL对乳腺癌细胞及其耐药株杀伤的机制研究

目的探讨靛玉红衍生物PHⅡ-7联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对乳腺癌细胞MCF-7及其耐药株MCF-7/ADR的增殖及调节TRAIL受体表达的相关机制。方法采用MTT法,分别检测PHⅡ-7、TRAIL及低浓度PHⅡ-7联合TRAIL处理MCF-7、MCF-7/ADR细胞的生长抑制率,同时以TRAIL敏感细胞MDA-MB-231为对照,证实上述乳腺癌细胞对TRAIL的敏感性;采用流式细胞术检测细胞凋亡和药物作用后活性氧的产生情况;real time PCR检测PHⅡ-7以及PHⅡ-7和活性氧抑制剂NAC联用后,乳腺癌细胞TRAIL功能性受体DR4、DR5的表达情况。结果 PHⅡ-7作用24 h后对MCF-7及MCF-7/ADR的IC50分别为(4.49±1.55)、(3.44±0.90)μmol·L-1,TRAIL可诱导MDA-MB-231细胞凋亡,而MCF-7、MCF-7/ADR对TRAIL极不敏感,各浓度组与MDA-MB-231相比差异具有统计学意义(P<0.05);低浓度PHⅡ-7联合TRAIL可有效促进TRAIL对MCF-7、MCF-7/ADR的杀伤并诱导凋亡,而两药单用对上述细胞的增殖抑制作用有限;此外,低浓度的PHⅡ-7还对人正常细胞PBMC的毒性很小,即使与TRAIL联用,在该浓度范围下也不会对正常组织细胞产生明显毒性;PHⅡ-7可有效诱导MCF-7及MCF-7/ADR细胞内活性氧的产生,同时上调TRAIL受体DR4、DR5的水平,并呈剂量依赖性。当PHⅡ-7与ROS抑制剂NAC联用时,可有效抑制PHⅡ-7对DR4、DR5的表达上调作用。结论低浓度的PHⅡ-7可有效增强乳腺癌细胞MCF-7、MCF-7/ADR对TRAIL治疗的敏感性,其机制可能是通过PHⅡ-7升高细胞内的活性氧水平进而上调TRAIL受体DR4、DR5表达而实现的。本研究为今后PHⅡ-7联合TRAIL治疗方案的临床应用奠定了基础。

反渗透系统给水电导率与pH的系统影响

测试并分析了一、二级反渗透系统给水电导率及pH与系统透盐率和浓淡水pH之间的关系。测定了给水pH在6～8、给水电导率在400～1000μS/cm范围内的系统透盐率较低,且pH为7.5、电导率为500μS/cm的系统透盐率最低。此测试与分析为反渗透技术提供了重要的运行与设计依据。

参芪地黄汤通过GPX4信号通路调控糖尿病肾病小鼠铁死亡的机制研究

[目的]研究参芪地黄汤对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)模型小鼠的治疗效果及调控谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)信号通路对铁死亡的影响。[方法]通过链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)联合高脂饮食诱导建立DN小鼠模型,并灌胃不同剂量的参芪地黄汤。通过检测各组小鼠体质量、血糖、肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、24 h尿蛋白,肾石蜡切片苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色及过碘酸-雪夫(periodic acid-Schiff,PAS)染色评估参芪地黄汤对DN模型小鼠的治疗作用;通过检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)水平,评估参芪地黄汤对DN模型小鼠脂质过氧化水平的影响;通过检测总Fe水平以及转铁蛋白(transferin)、前列腺6跨膜上皮抗原3(six-transmembrane epithelial antigen of prostate 3,Steap3)蛋白水平评估参芪地黄汤对DN模型小鼠铁死亡的影响;通过检测还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(glutathione/oxidized glutathione,GSH/GSSG)水平以及溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、溶质载体家族3成员2(solute carrier family 3 member 2,SLC3A2)、GPX4、谷氨酸-半胱氨酸连接酶(glutamate cysteine ligase catalytic subunit,GCLC)、谷胱甘肽合成酶(glutathione synthetase,GSS)蛋白水平来评估参芪地黄汤对DN模型小鼠GPX4信号通路的影响。[结果]与模型组比较,参芪地黄汤干预可明显提升DN模型小鼠体质量(P<0.01);降低DN小鼠血糖、Cr、BUN及24 h尿蛋白水平(P<0.05,P<0.01);同时改善DN模型小鼠肾组织病理学变化;降低MDA、ROS、4-HNE水平(P<0.01);降低总Fe水平(P<0.05,P<0.01)以及transferin、Steap3蛋白水平(P<0.05);升高GSH/GSSG比例(P<0.01)以及SLC7A11(P<0.05)、SLC3A2、GPX4、GCLC、GSS蛋白水平(P<0.05,P<0.01)。[结论]参芪地黄汤对DN模型小鼠具有治疗作用,并且可以减轻脂质过氧化水平,其作用机制可能与通过调控GPX4信号通路抑制铁死亡有关。

应用MBR-RO工艺处理垃圾焚烧渗沥水的研究

试验考察MBR-RO工艺处理生活垃圾焚烧厂渗沥水的处理效果,在污泥有机负荷为0.35 kgCOD/(kgMLVSS·d)时,其COD和氨氮的去除率分别超过92%和81%,其最终产水可满足<污水综合排放标准>(GB 8978-1996)的二级标准.同时分析pH值和金属离子在MBR中的变化规律和影响,得出金属离子的三种迁移、转化途径.并由试验确定污泥产率系数为0.41,微生物自身氧化率为0.13,污泥龄为30 d.

大榭石化化学水处理工艺研究

针对大量工业水处理中试验出现脱盐率低及不稳定的问题,通过分析双级反渗透+EDI(填充式电渗析)水处理工艺的运行参数和研究最终应用效果,结果显示工业水的pH值是影响RO和EDI(填充式电渗析)设备脱盐率的关键影响因素。这是因为工业水中具有较高CO_(2)含量,在pH较值低时以气态CO_(2)形式存在,易透过反渗透膜和EDI膜,导致脱盐率较低,出水不合格。通过筛选药剂,调节RO、EDI进水的pH值,确定大工业水(高二氧化碳含量)的膜用复合pH调节剂投加量为600 mg/L,可以达到较高的脱盐率。