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以pH敏感相分离高分子为载体的酶联荧光免疫分析法测定人IgG 被引量:10
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作者 林鹏 郑洪 +3 位作者 杨黄浩 杨薇 张长弓 许金钩 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第7期1198-1200,共3页
pH敏感高分子因其独特的pH敏感性质而在药物的控制释放[1,2]、分子分离[3]以及生物传感器[4]等方面得到应用. 应用于免疫分析时, 要求pH敏感高分子在溶液pH 7.4左右波动时做出响应, 过多偏离生理pH会对免疫反应生成的抗原-抗体复合物造... pH敏感高分子因其独特的pH敏感性质而在药物的控制释放[1,2]、分子分离[3]以及生物传感器[4]等方面得到应用. 应用于免疫分析时, 要求pH敏感高分子在溶液pH 7.4左右波动时做出响应, 过多偏离生理pH会对免疫反应生成的抗原-抗体复合物造成不同程度的破坏. 目前, pH敏感高分子并未在免疫分析中广泛应用, 这主要是由于高分子的相转变pH大多在4或10左右[5,6]. 我们[7]曾合成了37 ℃下相转变pH在5.6左右的pH敏感高分子, 并将其作为免疫反应载体, 建立了乙肝表面抗原的分析系统, 虽然其相转变pH比以往的高分子更接近于中性[5], 但并没有达到生理pH值7.4范围, 分离时仍可能对免疫复合物造成一定的损害. 展开更多
关键词 ph敏感相分离高分子 酶联荧光免疫分析 测定 人IGG 免疫复合物
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新型pH敏感相分离高分子的制备及其在免疫分析中的应用 被引量:4
2
作者 杨黄浩 朱庆枝 +3 位作者 李东辉 陈小兰 丁马太 许金钩 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第10期1498-1500,共3页
Poly( N isopropylacrylamide methylacrylic acid)[P(NIP co MAA)], a linear water soluble pH precipitating synthetic polymer, was used as a novel separating carrier for the reactants in immunoassay. The P(NIP co MAA) pre... Poly( N isopropylacrylamide methylacrylic acid)[P(NIP co MAA)], a linear water soluble pH precipitating synthetic polymer, was used as a novel separating carrier for the reactants in immunoassay. The P(NIP co MAA) precipitates out of water below a critical pH 5.6 at 37 ℃, and redissolved when the solution pH is above 6.1. This characteristic of the P(NIP co MAA) made it possible to carry out the immunochemical steps of the assay in true solution and then to quickly separate the resulting procucts from the reaction mixtures. The above approach was applied to an assay for the sandwich immunoassay of hepatitis B surface antigen(HBsAg). Sensitivity of this method was close to that of traditional ELISA using same reactants. However, the assay was much faster(assay time decreased from 100—120 min to 45 min). This method has been applied to the determination of the HBsAg levels in human blood serum with satisfactory results. This general technique may also be used for a wide variety of separation processes in addition to immunoassay, in which a specific component is to be isolated for analysis, recovery, or disposal. [WT5HZ] 展开更多
关键词 ph敏感相分离高分子 免疫分析 乙肝表面抗原
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pH敏感相分离高分子的免疫分析应用研究 被引量:5
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作者 周平 邓延倬 曾云鹗 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第2期198-200,共3页
合成了溶解性受pH值影响的高分子化合物聚甲基丙烯酸甲酯-丙烯酸-顺丁烯二酸酐(MAM)及聚甲基丙烯酸-丙烯酰胺-N-羟基琥珀酰亚胺丙烯酸酯(MAN),分别与抗体进行了共价连接,将其用作免疫分析载体,利用其溶解性可调节... 合成了溶解性受pH值影响的高分子化合物聚甲基丙烯酸甲酯-丙烯酸-顺丁烯二酸酐(MAM)及聚甲基丙烯酸-丙烯酰胺-N-羟基琥珀酰亚胺丙烯酸酯(MAN),分别与抗体进行了共价连接,将其用作免疫分析载体,利用其溶解性可调节特征,建立了新的免疫分析方法.以聚甲基丙烯酸-丙烯酰胺-N-羟基琥珀酰亚胺丙烯酸酯为载体,对血清中乙肝表面抗原进行了检测,阴阳性检出结果与常规ELISA方法相符. 展开更多
关键词 溶解性 免疫分析 ph敏感分离 乙肝表面抗原
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新型pH敏感高分子相分离荧光免疫分析法测定兔血清中IgG 被引量:1
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作者 林鹏 郑洪 许金钩 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1158-1160,共3页
通过将N-异丙基丙烯酰胺(NIP)、甲基丙烯酸丁酯(BMA)和甲基丙烯酸(MAA)共聚得到了一种新型的pH敏感高分子,其相转变pH (pHtr) 在37℃下为6.0;当溶液pH>6.0时,高分子溶解;pH<6.0时,高分子很快从溶液中沉淀出来.在竞争型免疫测定中... 通过将N-异丙基丙烯酰胺(NIP)、甲基丙烯酸丁酯(BMA)和甲基丙烯酸(MAA)共聚得到了一种新型的pH敏感高分子,其相转变pH (pHtr) 在37℃下为6.0;当溶液pH>6.0时,高分子溶解;pH<6.0时,高分子很快从溶液中沉淀出来.在竞争型免疫测定中,偶联在高分子上的兔免疫球蛋白G(IgG)和标准兔IgG在溶液中竞争性地与有限量的异硫氰酸荧光素标记抗体反应,根据pHtr以下免疫复合物沉淀的特性进行分离,建立了均相免疫反应、异相分离的兔IgG新型测定方法,线性范围为100~1000 μg/L;检出限为10 μg/L.方法灵敏、快速且操作简便,由于pHtr较之以前合成的敏感高分子更接近于中性,分离时可降低对抗原-抗体免疫复合物造成的损坏.用于兔血清中兔IgG的测量,结果令人满意. 展开更多
关键词 ph敏感高分子 分离 荧光免疫分析法 测定 兔血清 IGG 免疫球蛋白G
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温度敏感高分子和pH敏感高分子在相分离免疫分析中的比较
5
作者 林鹏 冯建军 +1 位作者 谢芳靖 陈芸 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第A01期174-174,共1页
相分离免疫分析是一种高分子免疫分析模式。本研究合成了温度敏感高分子和pH敏感高分子,并以二种高分子为载体,进行了相分离免疫分析嗜水气单胞菌外膜蛋白(OMP)的比较研究。
关键词 免疫分析 ph敏感 温度敏感 高分子 分离 嗜水气单胞菌 外膜蛋白
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以荧光高分子为相分离载体和指示物的免疫分析新方法
6
作者 龚福春 唐志娇 +2 位作者 林尤宜 曹忠 谭淑珍 《化学传感器》 CAS 2011年第1期35-41,共7页
以6-甲氧基-β-(5-乙烯基-2-奎宁环基)-4-喹啉甲醇(奎尼丁,Qd)为单体合成了一种pH敏感荧光高分子聚N-异丙基丙烯酰胺(NIP)-奎尼丁-N,N,-二甲基氨丙基甲基丙烯酰胺(DMAPM)[P(NIP-DMAPM-Qd)]。采用共聚法将布氏杆菌抗原(BrAg)与P(NIP-DMAP... 以6-甲氧基-β-(5-乙烯基-2-奎宁环基)-4-喹啉甲醇(奎尼丁,Qd)为单体合成了一种pH敏感荧光高分子聚N-异丙基丙烯酰胺(NIP)-奎尼丁-N,N,-二甲基氨丙基甲基丙烯酰胺(DMAPM)[P(NIP-DMAPM-Qd)]。采用共聚法将布氏杆菌抗原(BrAg)与P(NIP-DMAPM-Qd)连接,制备了P(NIP-DMAPM-Qd)-BrAg连接物。加入待测布氏杆菌抗体(BrAb),免疫反应后,调节至pH7.6,使高分子相变,从而将体系中的免疫反应复合物P(NIP-DMAPM-Qd-BrAg)-BrAb和未反应连接物P(NIP-DMAPM-Qd)-BrAg与非特异性组分以及未反应的待测BrAb分离.利用蛋白A对抗体的亲和性,捕获P(NIP-DMAPM-Qd-BrAg)-BrAb,从而将其与P(NIP-DMAPM-Qd-BrAg)分开,通过测定P(NIP-DMAPM-Qd-BrAg)-BrAb的荧光来定量BrAb。该方法通过高分子相变分离和蛋白A捕获双重分离作用,基本消除了非特异性组分以及未反应的特异性免疫成分等的干扰;以高分子自身荧光为检测信号源,无须另外的标记物,大大提高了免疫分析的灵敏度和简便性。以布氏杆菌抗体(BrAb)为检测对象,测得线性范围为0~168ng/L,抗体检出限为1.2ng/L,结果令人满意。 展开更多
关键词 ph敏感荧光高分子 分离免疫分析 布氏杆菌抗体
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可控相转变温度热敏高分子的制备及其在免疫分析中的应用 被引量:8
7
作者 林鹏 郑洪 +3 位作者 张长弓 杨黄浩 李东辉 许金钩 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第1期1-4,共4页
合成了一种新型的快速响应热敏高分子聚N 异丙基丙烯酰胺 丙烯酰胺 [P(NIP co AA) ],通过改变丙烯酰胺的含量可以改变高分子的临界溶解温度 (LCST) ,使之用于不同用途。其中 ,将相转变温度 (Ttr)在37℃的热敏高分子用于免疫分析的载体 ... 合成了一种新型的快速响应热敏高分子聚N 异丙基丙烯酰胺 丙烯酰胺 [P(NIP co AA) ],通过改变丙烯酰胺的含量可以改变高分子的临界溶解温度 (LCST) ,使之用于不同用途。其中 ,将相转变温度 (Ttr)在37℃的热敏高分子用于免疫分析的载体 ,建立了夹心型荧光免疫分析兔IgG的新方法。与聚N 异丙基丙烯酰胺 (PNIP)作载体相比 ,两者灵敏度相当 ,但由于相转变温度的提高 ,使得免疫反应的温度更接近于生物体的生理环境 ,并使免疫反应速率得到提高。该方法线性范围为 0~ 10 0 0 μg L ;检出限为 10 μg L。用于兔血清中兔IgG的测量 。 展开更多
关键词 热敏高分子 制备 应用 温度敏感高聚物 热敏分离 荧光免疫分析 聚N-异丙基丙烯酰胺-丙烯酰胺 兔IGG
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pH敏感相分离的固定化酶的制备和性质 被引量:6
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作者 贺枫 卓仁禧 +1 位作者 刘立建 徐勉懿 《武汉大学学报(自然科学版)》 CSCD 1997年第4期463-466,共4页
报道了一种新的制备溶解性可调节的固定化酶的方法.先将木瓜蛋白酶与N-羟基琥珀酰亚胺丙烯酸酯(NAS)反应,再利用自由基溶液聚合反应,制备了pH敏感相分离的固定化木瓜蛋白酶.考察了固定化过程中的pH值、反应时间及给酶量... 报道了一种新的制备溶解性可调节的固定化酶的方法.先将木瓜蛋白酶与N-羟基琥珀酰亚胺丙烯酸酯(NAS)反应,再利用自由基溶液聚合反应,制备了pH敏感相分离的固定化木瓜蛋白酶.考察了固定化过程中的pH值、反应时间及给酶量对固定化木瓜蛋白酶活力的影响,同时还测定了单体配比对固定化酶临界pH值的影响.这些固定化酶均具有较敏感相分离的特性,兼有溶液酶和固相酶两者的优点. 展开更多
关键词 ph敏感 分离 固定化酶 溶解性 沉淀
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两种环境敏感高分子在相分离免疫分析中的比较研究 被引量:2
9
作者 林鹏 冯建军 +4 位作者 王艺磊 谢芳靖 王为刚 陈芸 黄利强 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第23期2703-2708,共6页
进行了两种环境敏感高分子在相分离免疫分析嗜水气单胞菌外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)中的比较研究.首先合成温度敏感高分子聚N-异丙基丙烯酰胺和pH敏感高分子聚(N-异丙基丙烯酰胺-甲基丙烯酸),分别以N-羟基琥珀酰亚胺丙烯酸酯... 进行了两种环境敏感高分子在相分离免疫分析嗜水气单胞菌外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)中的比较研究.首先合成温度敏感高分子聚N-异丙基丙烯酰胺和pH敏感高分子聚(N-异丙基丙烯酰胺-甲基丙烯酸),分别以N-羟基琥珀酰亚胺丙烯酸酯(NAS)和碳二亚胺(EDCI)作为偶联剂与抗OMP抗体(Ab)偶联形成抗体复合物(Ab-polymer),在竞争型免疫测定中,OMP标准溶液与异硫氰酸荧光素标记OMP在均相条件下竞争性地与Ab-polymer反应,调节外界环境分离出高分子免疫复合物沉淀,重新溶解后荧光法定量,两种体系的OMP浓度均在400~3000ng/mL范围内与荧光强度呈良好线性关系,检出限分别为84.7和39.6ng/mL.pH敏感高分子相比于温度敏感高分子具有以下优点:可以在37℃的生理温度进行免疫反应,进一步提高了免疫反应的速度和效率;可利用高分子本身的活性基团进行Ab的固定,固定化效率、固定Ab的免疫反应活性较之NAS偶联法得到了提高;有更高的检测灵敏度.因此,pH敏感高分子更适合于作为相分离免疫分析的载体. 展开更多
关键词 免疫分析 分离 环境敏感高分子 比较研究 外膜蛋白
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相分离免疫分析的研究进展
10
作者 林鹏 王淑红 王艺磊 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1839-1846,共8页
相分离免疫分析通过开展快速的均相反应和简单的异相分离而兼具了均相免疫与异相免疫的优点,方法易于实现自动化。本文介绍了相分离免疫分析的基本原理,对相分离免疫分析载体、固定化方式、标记物、应用及发展方向进行了评述。引用文献6... 相分离免疫分析通过开展快速的均相反应和简单的异相分离而兼具了均相免疫与异相免疫的优点,方法易于实现自动化。本文介绍了相分离免疫分析的基本原理,对相分离免疫分析载体、固定化方式、标记物、应用及发展方向进行了评述。引用文献60篇。 展开更多
关键词 免疫分析 分离 环境敏感 温度敏感 ph敏感 评述
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以萘酰亚胺衍生物基荧光高分子为载体和指示剂的相分离免疫分析方法 被引量:2
11
作者 龚福春 唐连飞 +3 位作者 郑兴良 曹忠 谭淑珍 谭亚非 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第2期162-166,共5页
以4-甲氧基-N-(2-N',N'-二甲基氨基乙基-N'-烯丙基)萘二甲酰亚胺氯化铵(DMNAA)为荧光单体,合成了一种pH敏感荧光高分子聚N-异丙基丙烯酰胺-4-甲氧基-N-(2-N',N'-二甲基氨基乙基-N'-烯丙基)萘二甲酰亚胺氯化铵-N... 以4-甲氧基-N-(2-N',N'-二甲基氨基乙基-N'-烯丙基)萘二甲酰亚胺氯化铵(DMNAA)为荧光单体,合成了一种pH敏感荧光高分子聚N-异丙基丙烯酰胺-4-甲氧基-N-(2-N',N'-二甲基氨基乙基-N'-烯丙基)萘二甲酰亚胺氯化铵-N,N-二甲基氨丙基甲基丙烯酰胺[P(NIP-DMAPM-DMNAA)].采用共聚法将日本血吸虫抗原(SjAg)固定在P(NIP-DMAPM-DMNAA)上,制备P(NIP-DMAPM-DMNAA)-SjAg连接物,与日本血吸虫抗体(待测,SjAb)发生免疫反应后,调节pH值,使荧光高分子相变分离高分子-免疫组分连接物,最后,利用蛋白A对抗体的亲和性捕获P(NIP-DMAPM-DMNAA)-SjAg-SjAb,通过测定高分子自身的荧光信号来定量SjAb.该新型高分子具有良好的荧光特性,对pH响应快速,37℃下相转变pH值为7.2,分离免疫复合物时造成的损害低.与传统相分离免疫分析比较,新方法通过高分子相变分离和蛋白A捕获双重分离作用,消除了非特异性组分和未反应的特异性免疫成分等的干扰;利用高分子自身的荧光信号检测,无须另外的标记物,大大提高了免疫分析的简便性.以日本血吸虫抗体为分析对象,测得线性范围为1~1500ng/mL,抗体检出限为1.3ng/mL,相对标准偏差为3.6%(n=10),结果令人满意. 展开更多
关键词 ph敏感荧光高分子 高分子标记 分离免疫分析 日本血吸虫
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pH响应的嵌段共聚有机膜的计算机模拟
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作者 王楚 王莉 +1 位作者 霍进豪 周健 《高分子学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2018年第4期515-523,共9页
采用耗散粒子动力学模拟了PS-PAA-PEO三嵌段共聚物在非溶剂诱导下自组装形成通道孔结构高分子膜的过程.探讨了聚合物浓度对多孔膜结构的影响,得到了制备通道孔高分子膜的合适浓度范围.在不同pH值下,聚合物膜孔具有开关效应,并计算了相... 采用耗散粒子动力学模拟了PS-PAA-PEO三嵌段共聚物在非溶剂诱导下自组装形成通道孔结构高分子膜的过程.探讨了聚合物浓度对多孔膜结构的影响,得到了制备通道孔高分子膜的合适浓度范围.在不同pH值下,聚合物膜孔具有开关效应,并计算了相应的孔径.研究结果表明:当溶液的pH值由酸性转为中性时,通道孔从打开状态切换为关闭状态,达到了理想的智能开关效果.另外,在不同pH下的通道膜对不同尺寸的纳米粒子有选择性透过作用.结果发现孔径越小,可截留越小尺寸的纳米颗粒. 展开更多
关键词 耗散粒子动力学 高分子 非溶剂诱导分离 ph响应性 分子开关
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