基于流行病学调查的H1N1流感疫苗免疫应答评价研究

本文通过比较单价pH1N1疫苗接种者、pH1N1流感感染病例、流感患者密切接触者、健康对照人群的病毒特异性体液和细胞免疫水平,对pH1N1流感疫苗的免疫保护性效果进行了评价。采集4组人群外周血,检测血清中的pH1N1流感病毒特异性IgG抗体水平、抗体中和能力,以及PBMC经特异性病毒抗原刺激后分泌IFN-γ的能力。发现pH1N1流感病例组中抗血凝素特异性IgG抗体水平显著高于疫苗接种组、健康对照组和密切接触组,而疫苗接种组则高于密切接触组,但与健康对照组无统计学差异;病例组和密切接触组的血凝抑制水平和分泌IFN-γ的PBMC数量均高于疫苗接种组和健康对照组。同时,特异性IgG与血凝抑制水平呈正相关,分泌IFN-γ的PBMC数量也与血凝抑制水平呈正相关。本研究认为,pH1N1流感病毒感染诱发的特异性细胞免疫和体液免疫应答水平及抗体中和能力均高于疫苗接种者。相对于健康人群,疫苗接种组在诱导产生病毒特异性IgG方面虽然没有比健康人群表现出特别强的优势,但其较高的特异性IgG与血凝抑制水平,表明疫苗接种仍然不失为一种有效的产生保护性抗体的重要手段,但是和病毒感染后的免疫应答反应相比,其不能诱导产生有效的细胞免疫应答。通过新型疫苗佐剂的选择使用等措施促进疫苗接种后体液和细胞免疫共同保护作用的产生值得进一步深入研究。

H1N1流感病毒M1蛋白表位筛选及其在禽流感病毒交叉免疫中的作用机制

流感病毒,如2009甲型H1N1流感病毒(2009 pH1N1)以及发生跨种传播的H7N9禽流感病毒(H7N9)等的流行严重威胁了人类健康并造成了重大社会经济损失.自2009年以来, 2009 pH1N1作为季节性流感病毒的流行使得健康人群存在一定的T细胞免疫本底水平.本研究对2009 pH1N1和H7N9的主要T细胞免疫原M1蛋白存在的4个突变区段,利用ELISPOT试验确定了2009 p H1N1在这4个区段来源的T细胞表位多肽H1-M42 (LMEWLKTR), H1-M102(KLKREITFHGAK), H1-M202s (AMEVANQTR)和H1-M244 (MGVQMQRFK).同时,发现健康人群对H7N9来源的相应多肽预存有一定水平T细胞免疫,但低于对2009 pH1N1本身多肽的免疫水平.多肽与HLA分子的复性实验表明, H1-M102和H1-M244能够与HLA-A*1101稳定结合;而H1-M42和H1-M202s虽然能够结合HLA-A*3303,但H7N9相应的表位与这些分子的结合力相对较弱.结果表明,在健康人群中存在有限的针对H7N9的预存T细胞免疫,而H7N9在新鉴定表位多肽中的氨基酸突变对于免疫逃逸具有一定的贡献.对流感病毒交叉免疫的研究能够为了解禽流感病毒逃逸T细胞免疫机制以及通用流感疫苗的研发提供重要参考.