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HBV融合抗原真核表达载体pIRES-neo-HBAg的构建及表达
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作者 王琳 王宇 +4 位作者 吴昊 朱晓明 于继云 蒋建利 阎瑾琦 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期469-472,共4页
目的构建HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg,并验证其在293T细胞中的表达。方法以含有HBV融合抗原的质粒pVAX1-HBV为模板,PCR扩增该融合基因。PCR产物经纯化后,将其克隆至载体pMD18-T中,构建pMD18-T-HBV质粒,经酶切和测序鉴定后,... 目的构建HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg,并验证其在293T细胞中的表达。方法以含有HBV融合抗原的质粒pVAX1-HBV为模板,PCR扩增该融合基因。PCR产物经纯化后,将其克隆至载体pMD18-T中,构建pMD18-T-HBV质粒,经酶切和测序鉴定后,将其定向克隆入真核表达载体pIRES-neo,获得真核表达质粒pIRES-neo-HBAg。将该重组表达质粒瞬时转染人293T细胞,采用Western blot法、流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术验证HBV融合抗原的表达。结果成功构建了HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg,Western blot法、流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术结果显示融合抗原能够在293T细胞中表达。结论成功构建了HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 HBV融合抗原 真核表达 pires-neo 293T细胞
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