HBV融合抗原真核表达载体pIRES-neo-HBAg的构建及表达

目的构建HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg,并验证其在293T细胞中的表达。方法以含有HBV融合抗原的质粒pVAX1-HBV为模板,PCR扩增该融合基因。PCR产物经纯化后,将其克隆至载体pMD18-T中,构建pMD18-T-HBV质粒,经酶切和测序鉴定后,将其定向克隆入真核表达载体pIRES-neo,获得真核表达质粒pIRES-neo-HBAg。将该重组表达质粒瞬时转染人293T细胞,采用Western blot法、流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术验证HBV融合抗原的表达。结果成功构建了HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg,Western blot法、流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术结果显示融合抗原能够在293T细胞中表达。结论成功构建了HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg。