SOCS1拮抗物pJAK2多肽可增强树突状细胞的抗肿瘤作用

目的:探讨细胞因子信号转导抑制因子-1(suppressors of cytokine signaling1,SOCS1)拮抗物pJAK2多肽(氨基酸序列号为1001-1013)参与树突状细胞(dendritic cells,DCs)的体外诱导培养后对DCs抗肿瘤作用的影响。方法:采集健康人外周血,离心获得单个核细胞,用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony stimulating factor,rhGM-CSF)及重组人白细胞介素-4(recombinant human interleukin-4,rhIL-4)诱导DCs,第5天分为4组:单纯DCs培养(对照)组、抗原负载(Lysate-DCs)组、多肽修饰(pJAK2-DCs)组和抗原与多肽共培养(Lysate+pJAK2-DCs)组,第6天各组加入肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)促成熟。倒置显微镜下观察DCs形态;FCM法检测DCs表型;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)细胞毒实验检测各组细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)对胃癌细胞BGC-823的靶向杀伤作用;ELISA法检测白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)和γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的水平。结果:与未加入诱导剂组相比,各组均成功诱导出成熟DCs,均高表达CD80、CD83、CD86和人类白细胞DR抗原(human leukocyte antigen DR,HLA-DR),但以Lysate+pJAK2-DCs组的表达水平最高。在10:1～30:1的效靶比范围内,CTL杀伤作用与效靶比呈正相关。当效靶比为30:1时,对照组的CTL杀伤率达(19.77±2.34)%,低于其他3组(P<0.01),而Lysate+pJAK2-DCs组较Lysate-DCs组及pJAK2-DCs组都高(P<0.05)。Lysate+pJAK2-DCs组培养上清液中IL-12及IFN-γ的分泌水平明显高于对照组(P<0.01)。结论:SOCS1拮抗物pJAK2多肽(1001-1013)可增强DCs对胃癌细胞的抗原递呈及特异性抗肿瘤作用。

生长激素对胰腺癌细胞pJAK2表达的影响

目的 观察生长激素（GH）作用前后胰腺癌细胞中GH-磷酸化Janus激酶2（pJAK2）信号转导通路的特征,探讨GH对胰腺癌细胞作用的分子机制.方法 不同浓度的GH（50、100 μg/L）作用于胰腺癌细胞（SW-1990、Cap-1、ASPC）,计数培养24、48、72h后的细胞数;收集SW-1990注射于裸鼠背部皮下,成瘤后随机分为注射GH的实验组（GH组,共21只,每日4 mg/kg共2周,1、2、24 h取材,每组7只）及注入盐水的对照组（NS组,7只）,注射期间隔日测量瘤体积.Western blot方法观察GH作用后不同时间（体外,GH 50μg/L：5、10、15、30、45min、1、2 h;体内：1、2、24 h）胰腺癌细胞pJAK2表达变化.结果 GH可刺激SW-1990、Cap-1、ASPC增殖但在体内不促进肿瘤牛长：pJAK2在7株胰腺细胞（SW-1990、Cap-1、Colo、Mia、Aspc、P3、Panc-1）均有不同程度的表达;与细胞毒T淋巴细胞（CTL）比较,GH刺激后pJAK2表达显著增强（5、10、15 min尤为明显）,但1、2 h有减弱趋势;GH应用于裸鼠后各时间点（1、2、24 h）pJAK2在移植瘤中的表达差异无统计学意义.结论 GH能促进胰腺癌细胞SW-1990、Cap-1、ASPC增殖,但在体内不刺激肿瘤生长;GH可显著增强pJAK2在SW-1990中的表达,而在体内这种变化不明显.

rt-PA静脉溶栓联合舒血宁治疗对急性缺血性脑卒中患者两面神激酶2/信号转导及转录活化因子3信号通路的影响

目的探讨重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓联合舒血宁治疗急性缺血性脑卒中临床疗效以及对患者两面神激酶2/信号转导及转录活化因子3信号通路的影响。方法将100例急性缺血性脑卒中患者按随机数字表法分为实验组与对照组,每组50例,均予以调脂、控制血糖、血压、维持水电解质平衡、预防并发症等综合治疗,同时予以重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓治疗,实验组在此基础上联合舒血宁治疗,观察14d。治疗后比较两组中医疗效;治疗前后采用美国国立卫生研究院卒中量表评定神经功能缺损程度,同时检测血液流变学指标(纤维蛋白原含量、红细胞聚集指数、红细胞比积、血浆黏度)、疾病相关因子(血管性血友病因子、血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶-9、白细胞介素-8)及pJAK2、pSTAT3蛋白表达,结果经治疗14d后实验组与对照组比较:(1)总有效率(96.0%)显著高于对照组(74.0%)(P<0.01);(2)美国国立卫生研究院卒中量表评分显著低于对照组(P<0.01);(3)血液流变学指标纤维蛋白原含量、红细胞聚集指数、红细胞比积、血浆黏度水平显著低于对照组(P<0.01);(4)疾病相关因子血管性血友病因子、基质金属蛋白酶-9、白细胞介素-8水平显著低于对照组(P<0.01),血管内皮生长因子水平显著高于对照组(P<0.01);(5)pJAK2、pSTAT3蛋白表达显著低于对照组(P<0.01)。结论重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓联合舒血宁治疗急性缺血性脑卒中患者具有协同增效作用.能显著提高临床疗效,减轻炎症反应,改善神经功能及内皮功能,降低pJAK2、pSTAT3蛋白表达。