微小RNA-451在小细胞性贫血及慢性感染贫血儿童血清中的表达及临床意义

目的 分析微小RNA-451(miR-451)在小细胞性贫血及慢性感染贫血儿童血清中的表达情况,探讨miR-451与红细胞相关参数的相关性及其对儿童贫血的诊断价值。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分别检测小细胞性贫血组(n=80)、慢性感染贫血组(n=80)、健康对照组(n=80)儿童血清miR-451表达水平;采用Pearson相关分析法探讨血清miR-451与红细胞相关参数[红细胞分布宽度(RDW)、红细胞(RBC)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、血红蛋白(Hb)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞体积(MCV)]的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-451对小细胞性贫血、慢性感染贫血、贫血严重程度的诊断价值;采用多因素Logistic回归分析探讨儿童发生小细胞性贫血、慢性感染贫血的影响因素。结果 小细胞性贫血组、慢性感染贫血组儿童血清miR-451表达水平低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-451与RDW呈负相关(r=-0.388,P<0.05),与Hb、RBC、MCHC、MCH、MCV分别呈正相关(r=0.402、0.393、0.391、0.360、0.323,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-451诊断小细胞性贫血、慢性感染贫血的曲线下面积分别为0.718、0.735,诊断价值高于红细胞相关参数RDW、Hb、RBC、MCHC、MCH、MCV,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,体质量指数、RDW、Hb、RBC、MCHC、MCH、MCV、miR-451均为儿童发生小细胞性贫血、慢性感染贫血的影响因素(P<0.05)。随着儿童贫血程度的加重,血清miR-451表达水平逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清miR-451水平对儿童贫血严重程度具有较高的诊断价值。结论 miR-451在小细胞性贫血、慢性感染贫血儿童血清中表达降低,且其表达水平与红细胞相关参数水平存在相关性,血清miR-451对小细胞性贫血、慢性感染贫血和贫血严重程度均具有较高的诊断价值。

微小核糖核酸-451a在人参养荣汤治疗鼻咽癌放射性黏膜损伤中的机制研究

目的:通过检测微小核糖核酸-451a(miR-451a)和富含半胱氨酸的分泌性酸性蛋白(SPARC)mRNA的表达,推断人参养荣汤治疗鼻咽癌(NPC)放射性黏膜损伤的疗效及作用机制。方法:选择2022年3月—2023年5月收治的鼻咽癌放射性口腔黏膜损伤患者30例作为观察组,选择同期健康者30例作为对照组。采用辨证论治拟人参养荣汤加减治疗,比较观察组治疗前后患者中医症候积分量表和口干程度、口咽疼痛程度、黏膜损伤程度。检测治疗前后患者血清miR-451a和SPARC mRNA表达水平。结果:人参养荣汤可以有效降低患者主症和次症严重程度、Ⅲ级和Ⅳ级口腔黏膜损伤程度、口咽疼痛程度以及口干程度,使患者血清中miR-451a表达下降,促进SPARC mRNA蛋白翻译增强(P<0.05)。治疗前后,miR-451a与中医症候积分均呈正相关(P<0.05)。结论:人参养荣汤对鼻咽癌放射性黏膜损伤具有一定的临床疗效,可降低miR-451a表达水平,升高SPARC mRNA表达水平;miR-451a抑制了SPARC mRNA的翻译,可为将来的中西医结合治疗提供理论依据。

microRNA-144/451在不同类型贫血性疾病中的表达

目的:研究micro RNA-144/451基因簇(miR-144/451)在不同类型贫血性疾病中的表达及临床相关性。方法:收集再生障碍性贫血(AA)、骨髓增生异常综合征(MDS)和弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)初诊贫血和化疗后贫血患者外周血,RT-q PCR法检测miR-144和miR-451的表达水平,采用Spearman相关性分析研究miR-144和miR-451表达与常规实验室指标的相关性。结果:与正常对照组相比,miR-144在AA和MDS患者外周血中表达均明显降低(均P<0.01),在DLBCL初诊不贫血、初诊贫血和化疗后贫血患者外周血中表达均无明显差异(P>0.05);miR-451在AA和MDS患者外周血中表达均明显降低(均P<0.01),在DLBCL各组患者外周血中表达明显升高(均P<0.05)。相关性分析结果显示,miR-144和miR-451的表达水平与AA患者红细胞分布宽度变异系数呈正相关性(r=0.629,r=0.574),与MDS和DLBCL组实验室检测指标均无明显相关性。结论:miR-144和miR-451在不同类型的贫血性疾病中表达水平不尽相同,有望成为临床贫血性疾病的辅助诊断以及鉴别诊断指标。

汉黄芩素通过调控miR-451/PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路改善低氧诱导的肺动脉高压

目的:评价汉黄芩素对低氧诱导的肺动脉高压(HPH)的保护作用及其相关分子机制。方法:在体内采用成年雄性野生型C57BL/6小鼠建立HPH模型,将小鼠随机分为3组:对照组(N)、低氧(H+Saline)组、低氧+汉黄芩素(H+w)组。造模3周后,使用压力传感器系统采集小鼠血流动力学指标;肺小动脉管壁直径/管总直径(WT/TT)、肺小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA)来评估肺动脉结构重塑;基于网络药理学方法筛选汉黄芩素作用于HPH潜在靶点及分子信号通路。在体外采用小鼠肺动脉平滑肌细胞(MPASMCs),将细胞分为5组:常氧(N)组、低氧(H+PBS)组、低氧+低剂量汉黄芩素(H+40μmol/L w)组、低氧+高剂量汉黄芩素(H+80μmol/L w)组、低氧+高剂量汉黄芩素+740Y-P(H+80μmol/L w+740Y-P)组。N组在常氧(5%CO_(2),21%O_(2),74%N2,37℃)环境中培养48 h,H+PBS、H+40μmol/L w、H+80μmol/L w、H+80μmol/L w+740Y-P组在低氧(5%CO_(2),3%O_(2),92%N2,37℃)环境中培养48 h。通过CCK-8、Ed U法检测评估细胞增殖能力,Transwell和伤口愈合/划痕实验用于检测评估细胞迁移能力,Western blot检测PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路的主要蛋白(P-PI3K、PI3K、P-AKT、AKT、RXRA、Bcl-2)的表达,并利用PI3K通路激活剂740Y-P进行功能回补实验;RT-q PCR检测汉黄芩素对miR-451表达水平的影响,Western blot检测汉黄芩素对PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2通路上游调控因子CAB39和MIF表达的影响。结果:与对照组相比,低氧组MPASMCs的增殖、迁移能力以及小鼠右心室压力(RVSP)显著增加(P<0.05),肺动脉结构发生显著重构,经汉黄芩素干预后MPASMCs的增殖、迁移能力以及小鼠RVSP显著下降(P<0.05),肺动脉结构重塑得到显著改善。与对照组相比,低氧组中PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路相关蛋白p-PI3K、p-AKT、RXRA、Bcl-2表达显著升高;与低氧组相比,汉黄芩素干预组中PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路相关的蛋白表达水平显著下调(P<0.05);功能回补实验证实在缺氧条件下,激活PI3K通路能够显著削弱汉黄芩素对MPASMCs增殖抑制效应。与对照组相比,低氧组中CAB39和MIF表达水平显著上升,miR-451表达水平显著减少(P<0.05);与低氧组相比,汉黄芩素干预组中CAB39和MIF表达水平显著下降,miR-451表达水平显著上升(P<0.05);miR-451 inhibitor干预能够部分逆转汉黄芩素对MPASMCs增殖和迁移能力的抑制效应(P<0.05)。结论:汉黄芩素可能通过上调mi R-451的表达靶向调控CAB39和MIF进而抑制PI3K/AKT/RXRA/Bcl-2信号通路,抑制低氧诱导的MPASMCs的增殖和迁移、改善HPH小鼠右心室压力和肺动脉结构重塑,最终缓解肺动脉高压。

miR-144/451的体外红系发生示踪揭示LINC01569的潜在红系发生调控影响

目的用已构建的miR-144-GFP-H1人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)示踪细胞株,以GFP荧光信号报告miR-144表达描述红系发生的进展程度,探究在红系发生过程中lncRNA的潜在功能并初步验证其功能影响。方法利用已构建的miR-144/451-GFP-H1细胞株(下文简称144-H1)进行体外红细胞诱导培养。以CD71,GPA表面分子描述进入红系发生阶段的细胞亚群。以miR-144的GFP报告基因为关键区分,对GFP阳性(高红系发生倾向)和阴性细胞群(低红系发生倾向)分别进行转录组测序,获取差异性表达的lncRNA。选取具备验证价值的lncRNA条目进行初步功能验证。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术设计对应lncRNA的功能干扰方案并获取对应lncRNA功能敲除的144-H1细胞株。使用该敲除细胞株与非敲除的144-H1细胞株进行红细胞的平行诱导培养,寻找差异节点,初步验证其对在体外发育模型下对红系发生的影响效应。结果1)构建的144-H1细胞株能够在进入体外红细胞诱导阶段后表达GFP荧光蛋白,提示miR-144的启动。2)在CD71,GPA双阳群中,GFP阳性亚群和GFP阴性亚群存在显著的lncRNA表达差异。3)对多个lncRNA条目设计了能够有效干扰其功能的序列区段删除基因编辑方案。验证编辑成功。在敲除细胞株中,lncRNA的一部分序列被直接删除。4)在红细胞诱导培养的平行验证试验中,LINC01569的功能敲除株对比非敲除株表现出明显的流式亚群差异和细胞增殖能力差异:①敲除株的GFP荧光持续高表达;②敲除株CD71-GPA双阳群在红细胞成熟过中比例持续降低;③敲除株未观察到显著的血红蛋白表达,无明显红色;④敲除株细胞增殖能力远低于非敲除株(P<0.05)。结论成功利用144-H1细胞株对lncRNA在红系发育中的潜在功能进行了探究,可设计更精密的体外发育实验来提高lncRNA功能的抓取精度。在差异性表达的lncRNA条目中,LINC01569经初步验证,对红系发生过程存在调控作用。LINC01569的功能缺失严重影响红细胞的正常分化与增殖。LINC01569在红系发生过程中的具体调控机制有待进一步探索与研究。

miR-451a在肺结核患者血清中的表达水平及临床意义

目的 探讨活动性肺结核(ATB)患者血清微小RNA(miR)-451a、Toll样受体4(TLR4)表达水平与其预后的关系。方法 将350例肺结核患者根据诊断情况分为ATB组(162例)与非ATB组(NATB组,188例),另选180例健康体检者纳入对照组。ATB组依据预后分为预后良好组(120例)与预后不良组(42例)。检测血清miR-451a、TLR4 mRNA水平,分析ATB患者预后影响因素,Pearson法分析miR-451a与TLR4 mRNA相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-451a、TLR4 mRNA预测ATB患者预后的效能。结果 对照组、NATB组、ATB组血清miR-451a水平依次降低、TLR4 mRNA水平依次升高(均P<0.05)。ATB组血清miR-451a与TLR4 mRNA水平呈负相关(r=-0.519,P<0.05),血清miR-451a与C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-12(IL-12)呈负相关(r=-0.404、-0.377、-0.435、-0.391,P<0.05),血清TLR4 mRNA与CRP、ESR、IFN-γ、IL-12呈正相关(r=0.469、0.361、0.442、0.384,P<0.05)。预后不良组血清miR-451a水平低于预后良好组,血清TLR4 mRNA水平高于预后良好组(P<0.05)。回归分析显示,TLR4 mRNA、miR-451a是ATB患者预后影响因素(P=0.001、0.009)。血清miR-451a联合TLR4 mRNA预测ATB患者预后不良的ROC曲线下面积(AUC)为0.949,优于单独检测miR-451a、TLR4 mRNA的0.852、0.821(P<0.05)。结论 ATB患者血清miR-451a水平降低、TLR4 mRNA水平升高,与炎症反应及预后密切相关,miR-451联合TLR4 mRNA对预后预测价值较高。

高血压合并焦虑病人血清微RNA-451a、胰岛素样生长因子-1受体表达水平与焦虑程度的关系

目的探讨高血压合并焦虑病人血清微RNA-451a(miR-451a)、胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)表达水平与焦虑程度的关系。方法选取2020年2月至2022年1月在汉中市中心医院进行治疗的高血压病人160例,根据临床诊断和汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评估将病人分为高血压组60例、高血压合并轻度焦虑情绪组48例、高血压合并中度焦虑情绪组32例和高血压合并重度焦虑情绪组20例,收集整理所有病例的临床基础资料。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-451a表达水平、ELISA法检测血清IGF1R表达水平;比较分析高血压病人和高血压合并焦虑情绪病人的临床病理特征;采用Pearson法分析HAMA评分与血清miR-451a、IGF1R表达水平的相关性;采用logistic回归分析高血压合并焦虑的影响因素。结果高血压组、轻度焦虑、中度焦虑和重度焦虑组病人血清miR-451a水平依次降低(0.88±0.30,0.59±0.14,0.48±0.11,0.38±0.09),IGF1R水平依次升高[(2.14±0.60)μg/L,(2.66±0.62)μg/L,(3.08±0.66)μg/L,(3.51±0.74)μg/L];血清miR-451a水平与HAMA评分呈负相关(r=−0.50,P<0.05),血清IGF1R水平与HAMA评分呈正相关(r=0.43,P<0.05);高血压合并焦虑组收缩压[(142.26±18.51)mmHg,(135.29±17.84)mmHg]、舒张压[(84.25±11.30)mmHg,(78.23±10.25)mmHg]、C-反应蛋白[(4.47±0.96)mg/L,(4.16±0.91)mg/L]、IL-6水平[(36.95±6.31)μg/L,(27.48±5.49)μg/L]显著高于高血压组,IL-10水平[(12.34±3.26)ng/L,(16.24±3.91)ng/L]显著低于高血压组(P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示,收缩压[OR 95%CI=1.33(1.06,1.67)]、舒张压[OR 95%CI=1.20(1.00,1.45)]、IL-6[OR 95%CI=1.89(1.22,2.93)]、IL-10[OR 95%CI=0.38(0.17,2.93)]、miR-451a[OR 95%CI=0.01(0.00,0.47)]、IGF1R[OR 95%CI=7.62(1.21,48.03)]水平为高血压合并焦虑的影响因素(P<0.05)。结论高血压合并焦虑病人血清中miR-451a低表达,IGF1R高表达,且与病人焦虑程度密切相关。

miR-451靶向SZRD1对骨肉瘤细胞迁移和侵袭的影响

目的 探究miR-451对骨肉瘤细胞迁移和侵袭的影响及作用机制。方法 采用GEO2R在线工具差异分析GSE28425数据集,明确miR-451在骨肉瘤细胞中的变化情况。RT-qPCR检测miR-451和SZRD1在人成骨细胞系和人骨肉瘤细胞系中的mRNA表达量。Targetscan 8.0数据库预测和双荧光素酶报告基因实验验证miR-451和SZRD1的结合情况。Western blot实验检测不同转染的143B细胞和MG-63细胞中SZRD1蛋白的表达含量。CCK8实验检测miR-451和SZRD1对143B细胞和MG-63细胞增殖的影响。划痕试验和Transwell侵袭实验检测miR-451和SZRD1对143B细胞和MG-63细胞迁移和侵袭能力的影响。采用R软件包对骨肉瘤患者的SZRD1表达量和预后情况进行分析,并绘制KM生存曲线。结果 与hFOB1.19细胞相比,miR-451在143B、MG-63和SAOS2细胞中的相对表达量明显降低(P<0.01),SZRD1在各骨肉瘤细胞中的相对表达量均明显增加(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实SZRD1是miR-451的下游调控基因。与mimics NC组相比,miR-451 mimics组和miR+pcDNASZRD1组中骨肉瘤细胞的增殖能力无明显变化(P>0.05)。与mimics NC组相比,miR-451 mimics组骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力明显降低(P<0.01),而miR+pcDNA-SZRD1组能够逆转miR-451对骨肉瘤迁移侵袭的抑制作用(P<0.01)。骨肉瘤患者的总体生存期、无进展生存期和疾病特异性生存期均与SZRD1的表达成负相关(P<0.01)。结论 miR-451靶向调控SZRD1抑制骨肉瘤细胞的迁移和侵袭,但对增殖无明显影响,并且SZRD1高表达与骨肉瘤患者较差的预后相关。

MicroRNA-451 from Human Umbilical Cord-Derived Mesenchymal Stem Cell Exosomes Inhibits Alveolar Macrophage Autophagy via Tuberous Sclerosis Complex 1/Mammalian Target of Rapamycin Pathway to Attenuate Burn-Induced Acute Lung Injury in Rats

Objective Our previous studies established that microRNA(miR)-451 from human umbilical cord mesenchymal stem cell-derived exosomes(hUC-MSC-Exos)alleviates acute lung injury(ALI).This study aims to elucidate the mechanisms by which miR-451 in hUC-MSC-Exos reduces ALI by modulating macrophage autophagy.Methods Exosomes were isolated from hUC-MSCs.Severe burn-induced ALI rat models were treated with hUC-MSC-Exos carrying the miR-451 inhibitor.Hematoxylin-eosin staining evaluated inflammatory injury.Enzyme-linked immunosorbnent assay measured lipopolysaccharide(LPS),tumor necrosis factor-α,and interleukin-1βlevels.qRT-PCR detected miR-451 and tuberous sclerosis complex 1(TSC1)expressions.The regulatory role of miR-451 on TSC1 was determined using a dual-luciferase reporter system.Western blotting determined TSC1 and proteins related to the mammalian target of rapamycin(mTOR)pathway and autophagy.Immunofluorescence analysis was conducted to examine exosomes phagocytosis in alveolar macrophages and autophagy level.Results hUC-MSC-Exos with miR-451 inhibitor reduced burn-induced ALI and promoted macrophage autophagy.MiR-451 could be transferred from hUC-MSCs to alveolar macrophages via exosomes and directly targeted TSC1.Inhibiting miR-451 in hUC-MSC-Exos elevated TSC1 expression and inactivated the mTOR pathway in alveolar macrophages.Silencing TSC1 activated mTOR signaling and inhibited autophagy,while TSC1 knockdown reversed the autophagy from the miR-451 inhibitor-induced.Conclusion miR-451 from hUC-MSC exosomes improves ALI by suppressing alveolar macrophage autophagy through modulation of the TSC1/mTOR pathway,providing a potential therapeutic strategy for ALI.

lncRNA NEAT1促进miR-451a表达抑制AngⅡ诱导的高血压致血管重构

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)-核富集丰度转录物1(NEAT1)调控微小RNA-451a(miR-451a)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的高血压致血管重构的影响。方法:将C57BL/6小鼠随机分作control组、model组、shRNA组、sh-NEAT1组、sh-NEAT1+inhibitor NC组、sh-NEAT1+miR-451a inhibitor组,15只/组;除control组外其余小鼠皮下埋入AngⅡ微量泵建立高血压模型,并于2周后尾静脉分别注射相应剂量shRNA、sh-NEAT1、inhibitor NC及miR-451a inhibitor慢病毒液,control组及model组注射等剂量PBS。检测小鼠血压;qRT-PCR检测胸主动脉组织lncRNA NEAT1及miR-451a表达;HE染色及Masson染色分别观察胸主动脉组织病理学及胶原纤维分布情况;免疫组化法观察胸主动脉组织Ki-67的表达;Western blot检测胸主动脉组织I型胶原蛋白(Col1)、Ⅲ型胶原蛋白(Col3)表达;双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA NEAT1与miR-451a的靶向关系。结果:与control组比,model组小鼠收缩压(SBP)、胸主动脉组织lncRNA NEAT1表达、中膜厚度(MT)/主动脉管腔内径(LD)、胶原沉积、Ki-67阳性表达、Col1、Col3蛋白表达显著增加,miR-451a表达显著减少(P<0.05);与shRNA组相比,sh-NEAT1组SBP、lncRNA NEAT1表达、MT/LD、胶原沉积、Ki-67阳性表达、Col1、Col3蛋白表达显著降低,miR-451a表达显著增加(P<0.05);与sh-NEAT1+inhibitor NC组相比,sh-NEAT1+miR-451a inhibitor组SBP、MT/LD、胶原沉积、Ki-67阳性表达、Col1、Col3蛋白表达显著增加(P<0.05),miR-451a表达显著减少(P<0.05),lncRNA NEAT1表达无明显变化(P<0.05);lncRNA NEAT1与miR-451a间存在靶向关系。结论:lncRNA NEAT1沉默对AngⅡ所致高血压大鼠血管重构的改善可能与其促进miR-451a表达有关。

血清微小RNA-184、微小RNA-451a表达对Ⅰ~ⅡA期非小细胞肺癌根治术后复发转移的预测价值

目的探讨血清微小核糖核酸(miRNA)-184、miR-451a表达对Ⅰ~ⅡA期非小细胞肺癌(NSCLC)根治术后复发转移的预测价值。方法选取2020年1月—2021年10月在本院行根治性切除术的203例Ⅰ~ⅡA期NSCLC患者为NSCLC组,随访2年根据复发转移情况分为复发转移组30例和无复发转移组173例;另选取同期87名体检健康志愿者为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-184、miR-451a表达。采用多因素Logistic回归模型分析影响Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-184、miR-451a表达对复发转移的预测价值。结果与对照组比较,NSCLC组血清miR-184、miR-451a表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。随访2年,203例Ⅰ~ⅡA期NSCLC患者术后复发转移率为14.78%(30/203)。与无复发转移组比较,复发转移组血清miR-184、miR-451a表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移的独立危险因素为ⅡA期、低分化、术后辅助化疗,独立保护因素为miR-184升高、miR-451a升高(P<0.05)。血清miR-184、miR-451a表达联合预测Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移的曲线下面积为0.868,大于血清miR-184、miR-451a表达单独预测的0.784、0.781,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Ⅰ~ⅡA期NSCLC患者血清miR-184、miR-451a呈低表达,与根治术后复发转移密切相关,血清miR-184、miR-451a联合检测对Ⅰ~ⅡA期NSCLC根治术后复发转移有较高的预测价值。

外泌体circ-ZNF451对非小细胞肺癌铁死亡进程及生存情况的影响研究

目的观察外泌体circ-ZNF451基因表达水平对非小细胞肺癌(NSCLC)铁死亡进程及生存情况的影响。方法选择2020年6月至2022年2月接受放疗的90例NSCLC患者为研究对象,依据外泌体circ-ZNF451基因表达水平不同将入组患者分为高表达组(30例)与低表达组(60例)。比较两组治疗前后的铁死亡调控因子、近期疗效及远期预后,通过Spearman相关性系数检验ZNF451 m RNA表达水平与铁死亡进程及生存情况的关联。结果经实施直线加速器适形调强放疗后,低表达组P53、活性氧(ROS)均低于高表达组,酯酰辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)高于高表达组,差异有统计学意义(P<0.05);低表达组客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR)、功能状态评分(KPS)、生活质量评分(QOL)评分均高于高表达组,体力状态评分(ZPS)低于高表达组,差异有统计学意义(P<0.05);经Spearman相关性系数检验,circ-ZNF451 m RNA相对表达量与NSCLC患者的ACSL4、KPS、QOL评分负相关,与P53、ROS、ZPS评分正相关。结论circ-ZNF451 m RNA与NSCLC患者的铁死亡进程有密切关联,抑制ZNF451 m RNA表达可促进肿瘤细胞的铁死亡进程,对增强放疗敏感性并改善患者预后均有积极意义。

老年食管癌患者血清miR-451、miR-21表达水平及其对新辅助化疗预后的影响

目的分析血清miR-451、miR-21与老年食管癌(EC)患者新辅助化疗预后的关系。方法选取辽宁省人民医院2015年6月~2021年1月收治的117例老年EC患者进行前瞻性研究,患者均接受2个周期的TP新辅助化疗,化疗结束后随访1个月,依据实体瘤疗效评价标准评估预后,其中病灶稳定和进展者为预后不良组,病灶全部缓解和部分缓解者为预后良好组。新辅助化疗前检测血清miR-451、miR-21水平,采集患者相关基线资料,比较预后不良组和预后良好组患者的一般资料,以差异有统计学意义的指标作为自变量,以预后情况为因变量,进行多因素logistic回归分析;采用ROC曲线分析血清miR-451、miR-21对老年EC患者新辅助化疗预后的预测价值。结果117例老年EC患者新辅助化疗2个周期后43例预后不良,预后不良组TNM分期Ⅲ期比例、淋巴结转移比例及血清癌胚抗原(CEA)、鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)、miR-451、miR-21水平高于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05);logistic回归分析结果显示,TNM高分期、淋巴结转移及血清CEA、SCC、miR-451、miR-21是老年EC患者新辅助化疗预后不良的危险因素(P<0.05);绘制ROC曲线发现,血清miR-451、miR-21单独及联合检测预测老年EC患者新辅助化疗预后不良风险的AUC均>0.80,均有一定预测价值。结论老年EC患者新辅助化疗预后不良可能受miR-451、miR-21升高影响。

Pokemon、miR-451、IFITM1在非小细胞肺癌组织中的表达及与病理特征的相关性

目的研究POK红系髓性致癌因子(Pokemon)、微小RNA(miR)-451、人干扰素诱导跨膜蛋白(IFITM)1在非小细胞肺癌组织中表达及与病理特征相关性。方法选取非小细胞肺癌病理组织标本56例为非小细胞肺癌组;同时期正常组织标本32例为正常组。免疫组化染色观察Pokemon、IFITM1阳性表达,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-451表达。受试者工作特征(ROC)曲线分析Pokemon、miR-451、IFITM1对非小细胞肺癌的诊断价值。结果非小细胞肺癌Pokemon阳性表达率为69.64%(39/56),IFITM1阳性表达为64.29%(36/56)。非小细胞肺癌组腺癌与鳞癌Pokemon、IFITM1阳性表达率均高于正常组,miR-451表达低于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。低分化、淋巴转移、Ⅲ~Ⅳ期Pokemon、IFITM1阳性表达高于中~高分化、无淋巴转移、Ⅰ~Ⅱ期;miR-451表达低于中~高分化、无淋巴转移、Ⅰ~Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.05)。Pokemon、miR-451、IFITM1三者联合对非小细胞肺癌诊断敏感度、准确度显著高于三项单一检测(P<0.05)。结论Pokemon、miR-451、IFITM1在非小细胞肺癌组织中表达异常,与患者分化程度、有淋巴转移、TNM分期有关,三者联合检测能提高非小细胞肺癌诊断价值。

miR-451、miR-223在脓毒症患者中的变化及预后评估价值分析

目的分析外周血微小核糖核酸(miR)-451与miR-223在脓毒症患者中的变化及其对预后的评估价值。方法回顾性收集我院2020年1月至2022年12月收入的137例脓毒症患者临床资料,设为观察组,根据其28 d内死亡、存活情况将其分为死亡组(30例)、存活组(107例),另选同时间段来院体检健康者46例为对照组。所有受试者均于入院当日测外周血miR-451、miR-223水平(对照组于体检当日)。比较不同受试者miR-451、miR-223水平差异,采用二元logistics回归分析影响脓毒症患者预后的因素,建立受试者工作特征(ROC)曲线,评估miR-451、miR-223水平预测脓毒症患者预后的价值。结果与对照组相比,观察组患者外周血miR-451与miR-223水平明显更高(P<0.05)。两组患者年龄、尿素氮、血肌酐、C-反应蛋白、APACHEⅡ评分、miR-451、miR-223有显著差异(P<0.05),与存活组相比,死亡组年龄更高、尿素氮、血肌酐、C-反应蛋白、APACHEⅡ评分、外周血miR-451与miR-223水平明显更高(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,血肌酐、APACHEⅡ评分、miR-451、miR-223是影响脓毒症患者预后不良的因素(P<0.05)。相关性分析结果显示,脓毒症患者APACHEⅡ评分与miR-451呈负相关性,与miR-223水平呈正相关性(r=-0.978、0.635,P<0.05),APACHEⅡ评分与miR-451、miR-223关系紧密,APACHEⅡ评分与miR-451、miR-223关系紧密。ROC曲线结果显示,miR-451、miR-223单独、联合预测预后曲线下面积分别为0.829、0.755、0.947,特异度为0.813、0.888、0.925,敏感度为0.733、0.807、0.657,预测价值较好。结论脓毒症患者miR-451、miR-223水平存在异常表达,miR-451、miR-223是影响患者预后的因素,对预测脓毒症患者预后情况有一定参考价值。

多发性骨髓瘤患者血清miR-451、miR145-3p变化及临床意义

目的探究多发性骨髓瘤(MM)患者血清微小核糖核酸⁃451(miR⁃451)、微小核糖核酸145⁃3p(miR145⁃3p)变化及临床意义。方法选取河北大学附属医院于2021年1月至2022年10月收治的60例MM患者纳入观察组,根据初诊情况将患者分为复发组(n=12)与初诊组(n=48),选取同期于医院体检的45名健康者作为对照组,检测各组血清miR⁃451、miR145⁃3p水平,采用受试者工作(ROC)曲线分析两者对于MM的诊断价值。结果观察组血清miR⁃451、miR145⁃3p低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MM国际分期系统(ISS):Ⅰ期13例,Ⅱ期19例,Ⅲ期28例,miR⁃451、miR145⁃3p水平:Ⅲ期<Ⅱ期<Ⅰ期,差异均有统计学意义(P<0.05);复发组血清miR⁃451、miR145⁃3p水平低于初诊组,差异有统计学意义(P<0.05);血清miR⁃451、miR145⁃3p诊断MM时,以miR145⁃3p的曲线下面积值(AUC)值最高,敏感度、特异度分别为95.00%、93.33%,两者联合诊断的AUC值为0.844,敏感度100.00%,特异度为84.44%。结论血清miR⁃451、miR145⁃3p在MM患者中呈现低表达,且随患者病情加重逐渐下降,诊断效能较好,因此临床可将血清miR⁃451、miR145⁃3p作为判断MM患者病情变化的指标。

过表达lncRNA LINC00886靶向调控miR-451a影响乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学行为

目的:探究过表达长链非编码RNA(lncRNA)LINC00886通过调控微小RNA-451a(miR-451a)对乳腺癌(BC)MDA-MB-231细胞生物学行为的影响。方法:荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人乳腺上皮细胞系(MCF-12A)和4种BC细胞系(HCC1937、SUM159、SK-BR-3和MDA-MB-231)中lncRNA LINC00886、miR-451a表达。将MDA-MB-231细胞分为对照组、LINC00886-NC组、LINC00886组、LINC00886+miR-NC组、LINC00886+miR-451a组。qRT-PCR法检测MDA-MB-231细胞中lncRNA LINC00886、miR-451a表达水平;克隆形成实验和EdU染色检测MDA-MB-231细胞增殖能力;流式细胞术、Transwell小室实验、划痕愈合实验分别用来检测MDA-MB-231细胞凋亡、侵袭、迁移;蛋白印迹法检测MDA-MB-231细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测lncRNA LINC00886与miR-451a的靶向关系。结果:与人乳腺上皮细胞MCF-12A相比,BC细胞系中lncRNA LINC00886表达水平降低,miR-451a表达水平升高(P<0.05);过表达lncRNA LINC00886可升高MDA-MB-231细胞凋亡率、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达,降低miR-451a表达、集落形成数、EdU阳性细胞百分比、侵袭细胞数、迁移率以及PCNA、Bcl-2、MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05);上调miR-451a表达可减弱lncRNA LINC00886过表达对MDA-MB-231细胞的影响(P<0.05);lncRNA LINC00886可靶向调控miR-451a表达。结论:过表达lncRNA LINC00886可通过靶向抑制miR-451a表达促进MDA-MB-231细胞凋亡并抑制MDA-MB-231细胞增殖、侵袭和迁移。

miR-451a对慢性心衰细胞模型心肌细胞H9c2凋亡与自噬的影响

目的探究miR-451a对慢性心衰细胞模型心肌细胞H9c2凋亡与自噬的作用机制。方法采用1μmol/L阿霉素(DOX)建立慢性心衰细胞模型。将细胞实验分为Control组(正常心肌细胞H9c2)、DOX组(DOX培养)、DOX+miR-NC组(DOX培养转染对照miR-NC)、DOX+miR-451a组(DOX培养转染miR-451a模拟物miR-451a)、DOX+miR-451a+CCI-779组(DOX和CCI-779培养转染miR-451a)。qRT-PCR检测各组细胞miR-451a相对表达水平;CCK-8和流式细胞术分别检测细胞增殖活性与凋亡;Western blotting检测剪切的Caspase-3(cleaved Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3I(LC3I)、LC3II、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p70s6k、磷酸化mTOR(p-mTOR)、p-p70s6k蛋白表达。结果成功建立慢性心衰细胞模型。与Control组比较,DOX组miR-451a相对表达水平、细胞活性、p-mTOR、p-p70s6k蛋白表达降低,而凋亡率、cleaved-Caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达升高。与DOX+miR-NC组比较,DOX+miR-451a组miR-451a相对表达水平、细胞活性、p-mTOR、p-p70s6k蛋白表达升高,而凋亡率、cleaved-Caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达降低。与DOX+miR-451a组比较,DOX+miR-451a+CCI-779组细胞活性降低,凋亡率、cleaved-Caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3II/I蛋白表达升高。结论miR-451a通过抑制mTOR信号通路促进慢性心衰细胞模型心肌细胞H9c2凋亡和自噬。

miR-451在白血病细胞株K562/A02多药耐药中的作用及相关机制

目的:检测miR-451、ABCB1、ABCC2在白血病药物敏感细胞株K562及其耐药株K562/A02中的差异表达,探讨miR-451与ABCB1、ABCC2表达的调控关系及miR-451参与白血病耐药的相关机制。方法:CCK-8法检测K562/A02及K562细胞的耐药性,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证miR-451在K562及K562/A02细胞中的差异表达,将miR-451模拟物(mimic)及其阴性对照(miR-NC)、miR-451抑制剂(inhibitor)及其阴性对照(miR-inNC)分别转染K562及K562/A02细胞,应用q RT-PCR、Western blot检测ABCB1、ABCC2在K562、K562/A02细胞及转染后各组细胞中的mRNA、蛋白表达水平。结果:K562/A02细胞对阿霉素的耐药是其亲本细胞系K562的177倍。与K562细胞相比,K562/A02细胞中miR-451明显高表达(P<0.001),ABCB1、ABCC2在K562/A02中的mRNA及蛋白表达水平均显著高于K562细胞(P<0.001)。K562/A02细胞转染miR-451 inhibitor后,miR-451表达显著下调(P<0.001),对化疗药物的敏感性显著增强(P<0.05),ABCB1、ABCC2 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。K562细胞转染miR-451 mimic后,miR-451表达显著上调(P<0.001),ABCB1、ABCC2 mRNA及蛋白表达水平显著增高(P<0.01)。结论:miR-451、ABCB1及ABCC2在白血病敏感细胞株K562及其耐药株K562/A02中的表达存在显著差异,miR-451可能通过调控ABCB1、ABCC2的表达对白血病细胞的耐药性产生影响。

装载miRNA-451a的外泌体对肝癌细胞株增殖的影响研究

目的探讨装载miRNA451a的外泌体对肝癌细胞株HepG2和SMMC-7721增殖的影响。方法正常肝组织上皮细胞株HL-7702来源的外泌体,通过与胆固醇基修饰的miRNA-451a模拟物直接孵育构建外泌体451a复合体。将构建的exo-miRNA-451a复合体、等量miRNA-451a模拟物、等量PBS分别接种于96孔板中处于对数生长期的HPG2和SMMC-7721细胞,作为实验组、对照组和空白对照组。采用激光共聚焦显微镜观察exo-miRNA-451a复合体进入细胞内的情况;CCK8法检测HPG2和SMMC-7721细胞增殖。结果构建的外泌体miRNA-451a复合体分别与HepG2和SMMC-7721细胞,共培养3h时,在共聚焦显微镜下,有PKH67标记的外泌体和Cy3标记的miRNA-451a在HepG2和SMMC-7721细胞中共定位,并且在随后的6h、12h观察时逐渐增多。CCK-8实验提示当外泌体451a复合体和miR-451a模拟物分别与肝癌细胞株共孵育6h,OD值差异不明显;共孵育12h实验组OD值低于对照组,共培养48h实验组OD值显著低于对照组。结论装载miRNA-451a的外泌体可抑制肝癌细胞株的增殖。