表达HSV-TK痘苗病毒真核表达载体pMJ601的构建与鉴定

目的：构建含自杀基因（ＨＳＶ－ＴＫ）的痘苗病毒真核表达载体ｐＭＪ６０１，为进一步实施胃癌的基因治疗作必要准 备。方法：利用目的基因与载体的连接、感受态细胞的制备及转化、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、酶切等多种基因工 程技术将胶纯化回收的ＨＳＶ－ＴＫ与ｐＭＪ６０１进行连接、转化及鉴定。结果：克隆在Ｘ－ｐＰＮＴ质粒上的ＨＳＶ－ＴＫ ＤＮＡ 成功地被克隆到经ＢａｍＨⅠ－ＨｉｎｄⅢ双酶切的ｐＭＪ６０１载体上。结论：重组ＨＳＶ－ＴＫ痘苗病毒真核表达载体ｐＭＪ６０１ 的构建，为胃癌自杀基因的基因治疗打下坚实的基础。

痘苗病毒真核表达载体pM J601的转化与鉴定

目的 对痘苗病毒表达载体 p MJ6 0 1进行转化与鉴定 ,为进一步实施痘苗病毒为载体的基因治疗作必要的准备。方法 利用感受态细胞的制备及转化、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶酶切等多种基因工程技术对质粒 p MJ6 0 1进行转化及鉴定。结果 琼脂糖凝胶电泳清楚地显示了 p MJ6 0 1质粒 3条带和 Bam HI或 H ind 酶切后的线性条带。结论 痘苗病毒表达载体 p MJ6 0 1的转化与鉴定 ,为痘苗病毒载体系统的基因治疗打下了坚实的基础。

重组单纯疱疹病毒-胸苷激酶和人白介素-2基因痘苗病毒真核表达载体的构建

目的 构建含单纯疱疹病毒 胸苷激酶 (HSV tk)和人白介素 2 (hIL 2 )基因的痘苗病毒真核表达载体 pMJ6 0 1,为进一步实施胃癌的基因治疗作必要的准备。 方法 利用目的基因与载体的连接、感受态细胞的制备及转化、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、酶切、DNA序列分析等多种基因工程技术 ,将纯化回收的HSV tk和hIL 2分别与 pMJ6 0 1进行连接、转化并鉴定。 结果 分别用BamHⅠ HindⅢ和SalⅠ BamHⅠ酶切位点 ,将HSV tk与hIL 2DNA成功地克隆到pMJ6 0 1真核表达载体上。结论 重组HSV tk +hIL 2基因 pMJ6 0 1的构建 ,为进一步研究胃癌的基因治疗打下坚实的基础。