肾功能损害病人尿对大鼠脑、肾K^+-pNPPase活力影响的探讨

K^+-pNPPase,(钾激活对硝基苯硝酸酶)为钠泵的一部分。肾功能损害病人尿及正常人尿经SephadexG-25脱盐后,加入K^+-pNPPase活力测定体系,发现两组尿对酶活力有明显抑制作用。

肝炎病人尿对鼠脑、肾钠泵K^+-pNPPase活力的影响

钠泵K^+-pNPPase(钠泵钾激活对硝基苯磷酸酶)为钠泵的一部份。肝炎病人及正常人尿,经Sephadex G-25脱盐后,加入钠泵K^+-pNPPase活力测定体系,发现尿对酶活力有明显抑制作用。而重症肝炎(重肝)患者尿的抑制作用,明显低于慢性活动性肝炎(慢活肝)

对硝基酚磷酸酶pNPPase的基因克隆和序列分析

对硝基酚磷酸酶(p nitrophenylphosphatasepNPPase)是一种以对硝基酚磷酸盐(p nitrophenylphosphate)为底物的酶,被广泛地应用于核酸标记.通过菌落原位显色法成功地从脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus)中克隆到了编码耐热pNPPase的基因.序列分析表明它是一个编码255个氨基酸的酶.

糖尿病患者红细胞膜脂质成分改变与膜钠泵K^+-pNPPase活性的关系

对52例非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)患者红细胞膜脂质成分和膜钠泵K^+-pNPPase(钾激活对硝基苯磷酸酶)活性进行了测定。结果显示,红细胞膜胆固醇、胆固醇/磷脂比值明显升高,膜磷脂和钠泵K^+-pNPPase活性明显降低;膜钠泵K^+-pNPPase活性降低与膜胆固醇、胆固醇/磷脂比值升高呈负相关,而与膜磷脂呈正相关。提示NIDDM患者红细胞膜脂质成分改变和膜钠泵K^+-pNPPase活性降低密切相关。

对硝基酚磷酸酶的原核表达、纯化及性质研究

克隆到脂肪芽孢杆菌Bacillusstearothermophilus中的对硝基酚磷酸酶(p nitrophenylphosphatase,pNPPase)基因,将其编码区cDNA连接到pQE30表达载体中,在E.coliM15中经IPTG诱导得到高效表达.用Ni NTASuperflow层析柱对表达产物进行了分离纯化,初步测定了pNPPase的酶学性质.发现它的反应最适pH是10.0,最适反应温度是55℃,热稳定性Tm值为52℃,Mg2+、Mn2+和Co2+对pNPPase的活性有一定的促进作用,而Zn2+和Ni2+对pNPPase没有影响.纯化后其比活为120U/mg.