抑制TPP1表达对端粒保护蛋白1在染色体端粒定位及其功能的影响

目的观察TPP1受到抑制后,对端粒保护蛋白1a(Pot1a)和端粒保护蛋白1b(Pot1b)在端粒上的定位及其对端粒保护功能产生的影响。方法利用逆转录病毒介导的RNA干扰技术抑制小鼠胚胎成纤维样细胞内源性TPP1的表达后,采用免疫荧光/端粒肽核酸荧光原位杂交法检测外源性Pot1a和Pot1b在端粒上的定位,通过端粒末端脱氧尿嘧啶转移酶法检测TPP1降低后对染色体末端保护功能的影响,SA-βgal染色检测细胞衰老,Western blot检测磷酸化的P53水平和P21含量。结果TPP1受到抑制后大约65%的MEF细胞中Pot1a和Pot1b不能定位在端粒上,显著高于空载体对照组的5%(t=10.96,P<0.01);TdT-FITC检测结果显示,大约50%的细胞在TPP1受到抑制后出现TdT-FITC阳性,其中90%的TdT-FITC阳性信号出现在端粒上,而在空载体对照组TdT-FITC阳性细胞为4.7%(t=14.37,P<0.01),位于端粒上的TdT-FITC阳性信号<3%(t=17.59,P<0.01);β-gal染色(细胞衰老的特征性标志)结果显示,在TPP1受到抑制后β-gal阳性细胞率分别达25.7%和22.0%,显著高于对照组细胞的1.7%(t=18.23,P<0.01;t=16.9,P<0.01);进一步研究表明,TPP1受到抑制的细胞导致P53ser18磷酸化,P21表达明显增强。结论TPP1是Pot1a和Pot1b定位在端粒上必需的,抑制TPP1导致染色体末端失去保护功能并诱导P53依赖的细胞衰老。

俄罗斯社会舆论中中国形象认知的“二律背反”——以近年俄涉华民调为考察文本

近年来,俄罗斯专业民调机构开展了不少直接或间接的涉华民调。通过对这些调查的分析发现,俄罗斯社会本身在如何看待中国和中国人、如何认知中国之于俄罗斯的角色、如何定位中国在其内外政策中的地位等方面,存在一定的差别、背反和矛盾。这可以引起我们的认真关注、重视和研究,进而有助于我们以正确的心态、思路和方法,逐步在俄罗斯乃至全世界树立并展现一个开放、自信和真实的大国及其国民形象。

Pot1通过泛素化修饰影响自身的稳定性

目的：研究Pot1蛋白的稳定性。方法：利用慢病毒表达载体构建表达外源Flag-Pot1的HeLa细胞稳定克隆，在该克隆中加入CHX抑制新蛋白的合成，检测外源Pot1的半衰期，确定Pot1的稳定性；将Pot1质粒与Ub质粒共转293T细胞后，加入MG132阻止蛋白酶体途径，确定Pot1的稳定性是否受泛素化修饰的影响；构建点突变和截短突变的Pot1质粒，与Ub质粒共转293T细胞后，加入MG132阻止蛋白酶体途径，确定影响Pot1稳定性的区域。结果与结论：Pot1通过泛素化修饰影响自身稳定性；点突变和截断突变实验证实Pot1存在多个泛素化位点，且主要发生在C端400-634位氨基酸残基。

真空热还原处理铝电解槽废防渗料的研究

铝电解槽废防渗料中含有大量有害的可溶性氟化物,是一种危险废弃物,急需进行处理。本文对一种真空铝热还原处理废防渗料的工艺进行了研究。通过采用X射线衍射分析对真空热还原后物料的物相进行了分析,研究了还原温度与铝粉配入量对还原过程的影响。结果表明,采用真空热还原处理铝电解槽废防渗料,可实现废防渗料中耐火材料、钠和氟化物电解质三者的分离,在还原温度为1200℃,铝粉配入量为12%时,废防渗料中钠的回收率可达96.95%和氟的回收率可达98.64%,还原后物料的物相主要为氧化铝和钠长石。