pQE31-HPV16 L1重组质粒的构建及鉴定

目的 构建重组原核表达质粒以获得HPV16L1活性蛋白 ,为进一步研制HPV16基因工程疫苗打下基础。方法 以克隆质粒pCR2 .1-HPV16L1为模板 ,用PCR方法扩增HPV16L1DNA片段 ,利用pQE31质粒载体构建pQE31 HPV16L1重组质粒 ,用酶切电泳验证重组结果的正确性 ,测序检查质粒重组后序列情况。结果 PCR结果显示扩增片断大小约 1.5Kb ,与预期相同。重组质粒酶切后显示其大小约 5 .0Kb。大小及酶切图谱与预期相同。经测序发现插入片段两端序列无改变。结论 pQE31 HPV16L1质粒构建成功。

pQE32-HPV18 L1重组质粒的构建及鉴定

目的 构建重组原核表达质粒获得HPV1 8L1活性蛋白 ,为进一步研制HPV1 8基因工程疫苗打下基础。方法 以重组质粒pBR32 2 HPV1 8为模板 ,利用PCR方法扩增HPV1 8L1DNA片段 ,将HPV1 8L1DNA与pUC1 9质粒重组构建pUC1 9 HPV1 8L1重组质粒。用酶切电泳验证重组结果的正确性 ;并通过测序检查质粒重组后序列有无变化。再利用pQE32质粒做表达载体构建pQE32 HPV1 8L1重组质粒 ,并用酶切电泳验证。结果 PCR扩增DNA片段约为 1 .7Kb ,与预期结果相同。pUC1 9 HPV1 8L1克隆重组质粒酶切后显示 4 .39Kb ,酶切图谱与预期相同。测序验证插入片段全序列无改变。pQE32 HPV1 8L1表达重组质粒酶切后显示其大小约 5 .1 6Kb ,酶切图谱亦与预p期相同。结论 pQE32 HPV1