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E2F3基因沉默载体pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo的构建及表达
被引量:
1
1
作者
胡海龙
韩瑞发
+4 位作者
孙岩
刘利维
任海林
梁恩利
吴长利
《武警医学院学报》
CAS
2010年第3期169-171,174,F0002,共5页
【目的】构建针对E2F3基因的shRNA表达载体,通过脂质体进行膀胱癌细胞内转染,监测转染效率。【方法】通过软件设计针对E2F3基因的寡核苷酸链,化学合成一对编码短发夹RNA序列,长度为64个碱基。核苷酸链经退火,克隆到经BamHI、HindⅢ双酶...
【目的】构建针对E2F3基因的shRNA表达载体,通过脂质体进行膀胱癌细胞内转染,监测转染效率。【方法】通过软件设计针对E2F3基因的寡核苷酸链,化学合成一对编码短发夹RNA序列,长度为64个碱基。核苷酸链经退火,克隆到经BamHI、HindⅢ双酶切的pRNAT-U6.1/Neo载体上,构建针对E2F3基因的RNA干扰质粒。通过双酶切、PCR鉴定及基因片段序列分析验证构建效果。通过不同浓度的Lipofectamin 2000及干扰质粒混合物进行膀胱癌细胞系5637细胞转染,通过绿色荧光的表达程度摸索出细胞最佳转染浓度及转染时间。【结果】重组构建的pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo载体经PCR分析及插入基因片段序列分析,结果表明64个碱基成功插入到预计位点,并且序列完全一致。Lipofectamin 2000能够有效的进行pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo质粒的转染。【结论】载体的成功构建及膀胱癌细胞系的高效转染,为进一步研究E2F3基因在膀胱肿瘤中的功能奠定基础。
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关键词
prnat-u
6.1/
neo
系统
RNAI
E2F3
下载PDF
职称材料
Jamo AVR-693 AV放大器
2
《现代音响技术》
2005年第12期5-5,共1页
AVR-693不单具有6.1声道的解码功能,如Dolby Digital EX、DTS—ES、Dolby Pro Logic Ⅱx和DTS Neo:6,同时还具有每声道120W的输出。而为了做到这一点,它特别配备了一个巨型环牛和4个各10000μF容量的电容以提供强大的瞬时电力储备。
关键词
AV放大器
JAMO
Digital
6.1
声道
DOLBY
Logic
解码功能
DTS
Pro
neo
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职称材料
题名
E2F3基因沉默载体pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo的构建及表达
被引量:
1
1
作者
胡海龙
韩瑞发
孙岩
刘利维
任海林
梁恩利
吴长利
机构
天津市泌尿外科研究所
出处
《武警医学院学报》
CAS
2010年第3期169-171,174,F0002,共5页
基金
天津市科技支撑计划重点项目(07CGYSF05200)
天津市高等学校科技发展基金计划项目(20060122)
+2 种基金
国家自然科学基金资助项目(30700834)
天津市卫生局科技基金项目(09KZ90)
天津市应用基础及前沿技术研究计划(09JCYBJC27800)
文摘
【目的】构建针对E2F3基因的shRNA表达载体,通过脂质体进行膀胱癌细胞内转染,监测转染效率。【方法】通过软件设计针对E2F3基因的寡核苷酸链,化学合成一对编码短发夹RNA序列,长度为64个碱基。核苷酸链经退火,克隆到经BamHI、HindⅢ双酶切的pRNAT-U6.1/Neo载体上,构建针对E2F3基因的RNA干扰质粒。通过双酶切、PCR鉴定及基因片段序列分析验证构建效果。通过不同浓度的Lipofectamin 2000及干扰质粒混合物进行膀胱癌细胞系5637细胞转染,通过绿色荧光的表达程度摸索出细胞最佳转染浓度及转染时间。【结果】重组构建的pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo载体经PCR分析及插入基因片段序列分析,结果表明64个碱基成功插入到预计位点,并且序列完全一致。Lipofectamin 2000能够有效的进行pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo质粒的转染。【结论】载体的成功构建及膀胱癌细胞系的高效转染,为进一步研究E2F3基因在膀胱肿瘤中的功能奠定基础。
关键词
prnat-u
6.1/
neo
系统
RNAI
E2F3
Keywords
prnat-u6.1/neo system
RNAi
E2F3
分类号
Q522 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
Jamo AVR-693 AV放大器
2
出处
《现代音响技术》
2005年第12期5-5,共1页
文摘
AVR-693不单具有6.1声道的解码功能,如Dolby Digital EX、DTS—ES、Dolby Pro Logic Ⅱx和DTS Neo:6,同时还具有每声道120W的输出。而为了做到这一点,它特别配备了一个巨型环牛和4个各10000μF容量的电容以提供强大的瞬时电力储备。
关键词
AV放大器
JAMO
Digital
6.1
声道
DOLBY
Logic
解码功能
DTS
Pro
neo
分类号
TN722.75 [电子电信—电路与系统]
TN946.7 [电子电信—信号与信息处理]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
E2F3基因沉默载体pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo的构建及表达
胡海龙
韩瑞发
孙岩
刘利维
任海林
梁恩利
吴长利
《武警医学院学报》
CAS
2010
1
下载PDF
职称材料
2
Jamo AVR-693 AV放大器
《现代音响技术》
2005
0
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职称材料
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