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根癌农杆菌感受态细胞的制备以及质粒ProkⅡ对其转化的研究 被引量:13
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作者 朱锦辉 权军利 +5 位作者 何玉科 陈耀锋 郭东伟 李春莲 曹团武 曹新有 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2006年第7期91-95,共5页
研究了根癌农杆菌LBA4404和C48C1生长的培养基类型、菌株生长状态、转化溶液、质粒与感受态细胞共放置时间、质粒加入量、液氮速冻时间及热激条件对质粒ProkⅡ转化的影响。结果表明,以70mmo/LCaCl2作为转化溶液,YEB培养基制备的、OD... 研究了根癌农杆菌LBA4404和C48C1生长的培养基类型、菌株生长状态、转化溶液、质粒与感受态细胞共放置时间、质粒加入量、液氮速冻时间及热激条件对质粒ProkⅡ转化的影响。结果表明,以70mmo/LCaCl2作为转化溶液,YEB培养基制备的、OD600为0.5的LBA4404感受态细胞与10ng质粒DNA,于0℃共放置30min,液氮速冻5min,37℃热激5min时转化率最高,达1.40×10^5μg^-1;以70mmo/LCaCl2作为转化溶液,YEB培养基制备的、OD600s为0.5~0.6的C58C1感受态细胞与20ng质粒DNA,于0℃共放置10min,液氮速冻1min,37℃热激1min时转化率最高,达1.33×10^5μg^-1。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 感受态细胞 质粒prokⅱ 转化率
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一种快速构建35S组成型植物双价表达载体的方法 被引量:2
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作者 刘明坤 刘昌财 +3 位作者 许志茹 魏志刚 阎秀峰 刘关君 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期87-92,共6页
通过对几种常用植物表达载体的35S和Tnos序列进行比对,设计带有酶切位点的引物35S和Tnos,通过PCR克隆了同时带有35S和Tnos序列的目的基因片段,通过定向的酶切、连接获得双价表达载体。此方法简化了植物双价表达载体构建过程,具有明显时... 通过对几种常用植物表达载体的35S和Tnos序列进行比对,设计带有酶切位点的引物35S和Tnos,通过PCR克隆了同时带有35S和Tnos序列的目的基因片段,通过定向的酶切、连接获得双价表达载体。此方法简化了植物双价表达载体构建过程,具有明显时间短、效率高、不需要中间载体、检测简单等特点,而且引物对于多数常用35S组成型植物表达载体是通用的,为快速构建35S组成型植物双价表达载体提供了一种新方法。 展开更多
关键词 35S Tnos prokⅱ 双价表达载体
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