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一种高效、稳定的分泌型原核表达载体的构建及应用
被引量:
1
1
作者
杨海杰
张军
+3 位作者
罗文新
李少伟
管保全
夏宁邵
《厦门大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第4期410-415,共6页
以本室构建的原核表达载体pTO-T7为基础载体,PCR合成ompT引导序列,插入该载体多克隆位点上游,构建了分泌型原核表达载体pTO-OT。将2个外源基因克隆至pTO-OT,2个重组质粒在大肠杆菌中均得以高效表达,表达产量在25%~34%之间。Western b...
以本室构建的原核表达载体pTO-T7为基础载体,PCR合成ompT引导序列,插入该载体多克隆位点上游,构建了分泌型原核表达载体pTO-OT。将2个外源基因克隆至pTO-OT,2个重组质粒在大肠杆菌中均得以高效表达,表达产量在25%~34%之间。Western blot分析证实了融合蛋白可被大肠杆菌信号肽酶有效地切割,并具有良好的免疫学活性。对重组表达菌株的连续传代实验证实了该表达载体具有良好的表达稳定性,显示了其在基因工程中的应用价值。
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关键词
原核表达载体
pto-ot
基因工程
基因克隆
基因表达
载体构建
分泌型
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职称材料
题名
一种高效、稳定的分泌型原核表达载体的构建及应用
被引量:
1
1
作者
杨海杰
张军
罗文新
李少伟
管保全
夏宁邵
机构
厦门大学生命科学学院
出处
《厦门大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第4期410-415,共6页
基金
国家重点科技(攻关)计划(96-920-37-09)资助
文摘
以本室构建的原核表达载体pTO-T7为基础载体,PCR合成ompT引导序列,插入该载体多克隆位点上游,构建了分泌型原核表达载体pTO-OT。将2个外源基因克隆至pTO-OT,2个重组质粒在大肠杆菌中均得以高效表达,表达产量在25%~34%之间。Western blot分析证实了融合蛋白可被大肠杆菌信号肽酶有效地切割,并具有良好的免疫学活性。对重组表达菌株的连续传代实验证实了该表达载体具有良好的表达稳定性,显示了其在基因工程中的应用价值。
关键词
原核表达载体
pto-ot
基因工程
基因克隆
基因表达
载体构建
分泌型
Keywords
prokaryotic expression vector
high-level expression
secretion
ompT
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种高效、稳定的分泌型原核表达载体的构建及应用
杨海杰
张军
罗文新
李少伟
管保全
夏宁邵
《厦门大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003
1
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职称材料
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参考文献
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