pUDKH基因治疗犬下肢缺血后对血管、肌肉组织的影响

目的：观察pUDKH（携带肝细胞生长因子基因的质粒）基因治疗犬下肢缺血后对其血管和肌肉组织病理学的影响．方法：杂种犬在静脉内注射苯巴比妥钠麻醉下，于左后侧腹股沟在股动脉由髂外动脉分支处的起始端进行全结扎，造成肢体缺血模型．模型犬被随机分为对照组和pUDKH处理组，并在结扎后即刻分别注射pUDK（空白质粒）或pUD—KH．于手术后3mo，行左髂外动脉造影术，测定股动脉血流量和下肢远端局部温度，并从被结扎的后肢股动脉及内外侧肌肉取组织标本，经常规组织病理切片染色，光学显微镜下观察．结果：3mo时血管造影pUDKH组可见明显血管网的形成，而转移空质粒的对照组仅见少量新生血管；此时转移pUDKH组犬股动脉血流量已恢复到结扎前的水平，而对照组股动脉血流量仅为结扎前的1／5～1／3；转移pUDKH组结扎侧肌肉温度与健侧相比无明显差异，而对照组两肢体肌肉温度却相差1～2℃．组织学观察对照犬可见结扎点远端股动脉塌陷，肌束间动脉管壁变厚，管腔变小甚至消失，少见新生的小血管；pUDKH处理组犬结扎点远端股动脉管腔开放，肌束间小动脉壁均普遍未见增厚，管腔亦未缩小；对照犬结扎侧肌纤维变性、断裂、肌束内水肿、脂肪性变，pUDKH处理组结扎侧的肌肉组织中上述病变不明显．结论：pUDKH的局部注射对犬下肢缺血后血管和肌肉具有保护作用．

质粒pUDKH基因治疗大鼠肢体动脉闭塞病的实验研究

目的 研究携带人肝细胞生长因子 (HGF)基因的质粒pUDKH对大鼠肢体动脉闭塞病的治疗效果及最低有效剂量。方法 手术结扎大鼠左侧后肢股动脉 ,造成急性缺血性血管病模型。并随机分为 5组 ,每组 10只 ,在手术后即刻将 pUDKH以 5 0 μg、10 0 μg、2 0 0 μg、4 0 0 μg、0 μg剂量一次多点注射于结扎部位肌肉内 ,并于注射后第 10天 ,评价各组血管新生及肌肉组织的情况。另 12只大鼠手术后即刻局部多点注射 2 0 0 μgpUDKH( 6只 )或pUDK( 6只 ) ,注射后不同时间点 (第 3,5 ,10 ,14 ,2 1天 )检测骨骼肌组织中HGF的表达。结果 于转移pUDKH质粒后第 3、5、10、14天肌肉标本与对照组比较均可见较强的HGF的表达。第 10天观察到pUDKH组 (除 5 0 μg组外 ) ,在肌肉组织间或软组织中有丰富的小血管形成。半定量评价各组血管再生程度 ,pUDKH 10 0 μg组 ( 0 96± 0 0 7)、2 0 0 μg组 ( 1 97± 0 91)、4 0 0 μg组 ( 2 2 6± 1 0 0 )与对照组 ( 0 2 7± 0 0 4 )之间差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论 人肝细胞生长因子基因治疗大鼠肢体动脉闭塞病是有效的 ,且以 10 0 μg组为最低有效剂量。