我国鼠疫菌pYC质粒PCR检测分析

目的分析全国其他类型鼠疫菌是否存在pYC质粒。方法设计yd1和yd2两对引物通过PCR 进行检查。结果共检查全国11块疫源地18个生态型鼠疫菌802份DNA,其中云南6份、广西5份、贵州6 份扩增阳性,云南另外的163份和全国其他菌株扩增结果均为阴性。结论 yd1和yd2基因仅存在于贵州、广西的菌株和云南的部分菌株中,可作为具有pYC质粒鼠疫菌的PCR诊断和标识基因;全国其他类型鼠疫菌无 6×103(pYC)新质粒。

鼠疫菌pYC质粒对菌体蛋白质组影响的初步研究

目的了解鼠疫菌pYC质粒对菌体蛋白质组的作用。方法将含有pYC质粒的鼠疫菌与不含该质粒的鼠疫菌通过双向电泳的方法进行蛋白质组比对，并将差异蛋白进行质谱鉴定。结果含有pYC质粒的鼠疫菌与不含该质粒的鼠疫菌的蛋白图谱可识别的蛋白点均在500个以上，两者总体上相似性较高：前者较后者在大小约70×10^3、等电点5．O左右处，明显多一个蛋白点簇，该蛋白簇经质谱鉴定均为伴侣蛋白GroEL，但该蛋白并非是pYC质粒编码蛋白。结论pYC质粒对菌体蛋白质组有影响，其编码蛋白pYC_p10与pYC_p11，可能调控GroEL高表达。

鼠疫菌pYC质粒标识基因在动物及蚤检测中的应用

目的评价云南鼠疫菌pYC质粒标识基因的特异性及在鼠疫监测中的应用。方法应用pYC质粒标识基因引物yd1,yd2并以鼠疫菌特异性基因pla,fra作为对照进行PCR实验,观察实验室感染标本和现场样品的检出情况。结果共检测实验感染动物脏器8份,均为阳性。检测现场收集的黄胸鼠脏器22份,阳性6份,阳性率27.27%。检测感染的蚤类67份,阳性13份,阳性率19.40%,试验引物yd1,yd2与对照引物pla,fraPCR检测结果其特异性和敏感性均一致。结论将yd1,yd2引物,联合pla,fra引物,建立鼠疫PCR快速诊断方法,应用于云南、广西、贵州判断鼠疫菌、监测鼠疫信息,具有重要的实际意义。

云南鼠疫菌pYC质粒来源的探索

目的检测鼠疫近缘菌中是否存在着与鼠疫菌pYC质粒相同的核苷酸序列。方法设计4对引物,其产物长度覆盖整个的pYC质粒序列,将产物设计为探针,对近40余种鼠疫近缘菌全部的DNA进行斑点杂交。结果除用来作为对照的、分离至云南的4株鼠疫菌斑点杂交呈阳性外,其他杂交结果均为阴性。结论目前发现该质粒只存在于某些鼠疫菌中,进一步证实了我们先前的猜测,说明该质粒不是从这些近缘菌进化而来,可能是从外界获得的。