丹皮酚对过氧亚硝基阴离子致成骨细胞增殖抑制的影响

目的 :探讨过氧亚硝基阴离子 (ONOO )对体外成骨细胞增殖的影响及丹皮酚 (Pae)对抗ONOO 的作用。方法 :采用改良的淬灭流动反应方法 ,体外制备ONOO 。以不同终浓度加入成骨细胞培养体系中 ,用MTT法观察在不同时相对成骨细胞增殖的影响 ,并用不同终浓度的Pae消除ONOO (10 0 0 μmol/L)对成骨细胞增殖的影响。结果 :低浓度ONOO (5 0～ 2 0 0 μmol/L)对培养的成骨细胞有促增殖作用 ;高浓度ONOO (10 0 0 μmol/L)则明显抑制成骨细胞增殖。Pae(10 - 4～ 10 - 7mol/L)可消除ONOO (10 0 0 μmol/L)对成骨细胞增殖抑制的作用。结论 :低浓度ONOO 促成骨细胞增殖 ,高浓度ONOO 抑制成骨细胞增殖。Pae可消除高浓度ONOO 对成骨细胞增殖的抑制作用。

丹皮酚拮抗过氧亚硝基阴离子致大鼠成骨细胞凋亡的作用

目的探讨丹皮酚拮抗过氧亚硝基阴离子(ONOO-)对体外培养大鼠成骨细胞凋亡的作用。方法用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,采用淬灭流动反应方法体外制备ONOO-,以1 mm o l/L终浓度加入成骨细胞培养体系,作用30 m in后弃去,继续常规培养12 h,用Hoechst33258染色法及TUNEL法检测成骨细胞的凋亡,并以0.1 mm o l/L丹皮酚消除ONOO-(1 mm o l/L)对大鼠成骨细胞凋亡的影响。结果1 mm o l/L的ONOO-可导致大鼠成骨细胞凋亡;0.1 mm o l/L丹皮酚能拮抗ONOO-(1 mm o l/L)所引起的大鼠成骨细胞凋亡。结论丹皮酚0.1 mm o l/L在体外具有拮抗ONOO-(1 mm o l/L)致大鼠成骨细胞凋亡的作用。

丹皮酚对过氧亚硝基阴离子致大鼠成骨细胞分化抑制的影响

探讨丹皮酚(Pae)拮抗过氧亚硝基阴离子(ONOO)对体外培养大鼠成骨细胞分化的影响。用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,采用淬灭流动反应方法体外制备ONOO,以不同终浓度加入成骨细胞培养体系,在作用不同时间后,用对硝基苯二钠动力学(PNPP)法检测细胞内碱性磷酸酶(ALP)的活性,用Lowry法测定蛋白含量,并以不同终浓度Pae消除ONOO(1000μmol/L)对成骨细胞分化的影响。结果显示,不同浓度的ONOO(50～1000μmol/L)均能抑制碱性磷酸酶的活性,影响分化;高浓度的丹皮酚(103～106mol/L)能消除ONOO(1000μmol/L)对碱性磷酸酶活性的抑制,拮抗ONOO抑制成骨细胞分化的作用。