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PDX-1 Expression in Pancreatic Ductal Cells after Partial Pancreatectomy in Adult Rats 被引量:1
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作者 刘涛 王春友 +3 位作者 万赤丹 熊炯忻 许逸卿 周峰 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2004年第5期464-466,共3页
To investigate the protein and mRNA expression of pancreas/duodenal homeobox-1 (PDX-1), a transcription factor as a marker for pancreatic stem cells, in pancreatic ductal cells of rats after partial (90 %) pancreatect... To investigate the protein and mRNA expression of pancreas/duodenal homeobox-1 (PDX-1), a transcription factor as a marker for pancreatic stem cells, in pancreatic ductal cells of rats after partial (90 %) pancreatectomy and evaluated the significance of the PDX-1 expression. Western blot and Reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) were used to detect the expression of PDX-1 protein and mRNA respectively. PDX-1 protein was only faintly detected in pancreatic ductal cells on the day 1 after partial pancreatectomy. On the day 2 and 3 after operation in operation group, a 2—3 fold increased PDX-1 protein was observed, corresponding to the characteristic 42—kD protein in Western blot. There was significant difference between operation group and sham-operation group (P<0.05). PDX-1 protein expression on the day 5 and 7 after operation had already been no difference from control group (P>0.05). RT-PCR revealed the PDX-1 mRNA expression showed no significant difference between operation group at various time points and sham-operation group (P>0.05). These results indicate that there was overexpression of PDX-1 in the cells of pancreatic epithelium during the regeneration of remnant pancreas after partial pancreatectomy in adult rats, suggesting the pancreatic stem cells in pancreatic ductal epithelial cells are involved in the regeneration of remnant pancreas and the expression of PDX-1 in ductal cells was regulated posttranscription. 展开更多
关键词 pancreas/duodenal homeobox-1 pancreatic epithelium ductal cells rats
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槟榔碱对2型糖尿病大鼠胰腺β细胞PDX-1 mRNA表达的影响 被引量:15
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作者 亓竹青 姚起鑫 +4 位作者 王光 张伟 周寿红 凌红艳 胡弼 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2010年第1期14-19,共6页
目的:探讨槟榔碱对2型糖尿病大鼠β细胞分泌功能及胰腺十二指肠同源盒因子-1(pancreas-duodenum homeobox-1,PDX-1)mRNA表达的影响。方法:采用高果糖饲料饲养Wistar大鼠12周制备2型糖尿病大鼠模型,40只实验动物随机分为5组:对照组、模... 目的:探讨槟榔碱对2型糖尿病大鼠β细胞分泌功能及胰腺十二指肠同源盒因子-1(pancreas-duodenum homeobox-1,PDX-1)mRNA表达的影响。方法:采用高果糖饲料饲养Wistar大鼠12周制备2型糖尿病大鼠模型,40只实验动物随机分为5组:对照组、模型组、模型+1 mg/kg槟榔碱组、模型+5 mg/kg槟榔碱组、模型+10 mg/kg槟榔碱组。药物注射4周后股动脉取血检测空腹血糖、三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、血清胰岛素,处死大鼠取胰腺组织,石蜡切片HE染色观察组织形态学变化,RT-PCR检测β细胞内PDX-1及胰岛素mRNA的表达水平。结果:(1)高糖作用引起Wistar大鼠胰腺β细胞PDX-1及胰岛素mRNA的表达水平显著下降(P<0.01);(2)1 mg/kg和5 mg/kg槟榔碱处理能显著上调高糖喂养Wistar大鼠胰腺β细胞PDX-1与胰岛素mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:槟榔碱可以通过上调PDX-1和胰岛素基因表达,改善高糖环境下的β细胞胰岛素合成和分泌功能的损伤。 展开更多
关键词 槟榔碱 2型糖尿病 Β细胞 胰腺十二指肠同源盒因子-1
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人TAT-PDX-1融合蛋白原核表达载体的构建 被引量:1
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作者 苗成 张建璞 《新乡医学院学报》 CAS 2011年第3期304-306,共3页
目的构建人TAT-PDX-1融合蛋白原核表达载体。方法以人胰腺癌(PANC)-1细胞株cDNA为模板,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增胰腺十二指肠同源异型盒基因-1(PDX-1)蛋白编码的全部序列,克隆入原核表达载体pET28a中,经限制性内切酶HindII... 目的构建人TAT-PDX-1融合蛋白原核表达载体。方法以人胰腺癌(PANC)-1细胞株cDNA为模板,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增胰腺十二指肠同源异型盒基因-1(PDX-1)蛋白编码的全部序列,克隆入原核表达载体pET28a中,经限制性内切酶HindIII和BamHI双酶切及DNA序列分析重组质粒的目的基因。结果 RT-PCR扩增产物的特异性片段长度为885 bp,以此构建的重组质粒pET28a-TAT-PDX-1经HindIII和BamHI双酶切后显示5 900 bp和885 bp左右的2条片段,测序结果与Genbank中的人PDX-1基因cDNA序列一致。结论成功构建了人TAT-PDX-1融合蛋白原核表达载体。 展开更多
关键词 原核表达 蛋白转导域 PDX-1 反式激活蛋白
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Expression of nesfatin-1/NUCB2 in rodent digestive system 被引量:7
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作者 Yutaka Oomura 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2010年第14期1735-1741,共7页
AIM: To observe the regional distributions and morphological features of nesfatin-1/nucleobindin-2 (NUCB2) immunoreactive (IR) cells in the rodent digestive system. METHODS: Paraffin-embedded sections of seven organs ... AIM: To observe the regional distributions and morphological features of nesfatin-1/nucleobindin-2 (NUCB2) immunoreactive (IR) cells in the rodent digestive system. METHODS: Paraffin-embedded sections of seven organs (pancreas, stomach, duodenum, esophagus, liver, small intestine and colon) dissected from sprague-dawley (SD) rats and institute of Cancer Research (ICR) mice were prepared. The regional distributions of nesfatin-1/NUCB2 IR cells were observed by immunohistochemical staining. The morphological features of the nesfatin-1/NUCB2 IR cells were evaluated by hematoxylin and eosin (HE) staining. Fresh tissues of the seven organs were prepared for Western blotting to analyze the relative protein levels of NUCB2 in each organ.RESULTS: Immunohistochemical staining showed that the nesfatin-1/NUCB2 IR cells were localized in the central part of the pancreatic islets, the lower third and middle portion of the gastric mucosal gland, and the submucous layer of the duodenum in SD rats and ICR mice. HE staining revealed that the morphological features of nesfatin-1/NUCB2 IR cells were mainly islet cells in the pancreas, endocrine cells in the stomach, and Brunner’s glands in the duodenum. Western blotting revealed that NUCB2 protein expression was higher in the pancreas, stomach and duodenum than in the esophagus, liver, small intestine and colon (P = 0.000). CONCLUSION: Nesfatin-1/NUCB2 IR cells are expressed in the pancreas, stomach and duodenum in rodents. These cells may play an important role in the physiological regulation of carbohydrate metabolism, gastrointestinal function and nutrient absorption. 展开更多
关键词 NESFATIN-1 Nucleobindin-2 pancreas STOMACH duodenum Brunner glands
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一种高效诱导胚胎胰腺细胞分化为内分泌细胞培养方法的建立 被引量:3
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作者 陈芳 马凤霞 +4 位作者 池颖 赵钦军 杨少光 卢士红 韩忠朝 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期343-347,共5页
目的建立一种使胚胎胰腺细胞体外高效分化为成熟内分泌细胞的培养方法。方法体外分离小鼠12.5 d的胚胎胰腺,培养于下层为培养基的漂浮膜上7 d,采用免疫组织化学方法检测胰腺祖细胞标志胰腺十二指肠同源盒基因1(PDX-1)和神经源素3(Ngn3)... 目的建立一种使胚胎胰腺细胞体外高效分化为成熟内分泌细胞的培养方法。方法体外分离小鼠12.5 d的胚胎胰腺,培养于下层为培养基的漂浮膜上7 d,采用免疫组织化学方法检测胰腺祖细胞标志胰腺十二指肠同源盒基因1(PDX-1)和神经源素3(Ngn3)的表达及内、外分泌细胞的标志胰岛素、胰高血糖素、羧肽酶表达,定量PCR检测培养过程中胰腺标志表达的变化。结果胚胎胰腺培养1 d后,有大量胰腺祖细胞标志表达,且这些胰腺祖细胞处于增殖状态。培养3 d后,仍有胰腺祖细胞的标志大量表达。培养7 d后,分化的胰腺表达成熟内、外分泌细胞的标志,且胰腺标志的表达与体内表达模式一致。结论建立了一种使胚胎胰腺细胞体外高效分化为成熟内分泌细胞的培养方法。 展开更多
关键词 胰腺 胰岛素 腺十二指肠同源盒基因1 神经源素3
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nesfatin-1/NUCB2在人及鼠类动物消化系统的表达 被引量:5
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作者 张爱青 李学良 +2 位作者 蒋春樱 林琳 施瑞华 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期112-116,共5页
目的 探讨一种新的摄食调节肽nesfatin-1/NUCB2在人、SD大鼠及ICR小鼠消化系统的分布,为进一步研究其在消化系统的功能奠定形态学基础.方法 取20例南京医科大学附属第一医院因消化系统疾病而行手术者的手术切除标本共27个,SD大鼠及ICR... 目的 探讨一种新的摄食调节肽nesfatin-1/NUCB2在人、SD大鼠及ICR小鼠消化系统的分布,为进一步研究其在消化系统的功能奠定形态学基础.方法 取20例南京医科大学附属第一医院因消化系统疾病而行手术者的手术切除标本共27个,SD大鼠及ICR小鼠的胰腺、胃、十二指肠、食管、肝、小肠、结肠组织.其中恶性肿瘤患者标本为距肿瘤5 cm以上的癌旁组织,良性肿瘤患者的标本为病变边缘组织.免疫组化检测nesfatin-1/NUCB2的分布状况,Western印迹检测NUCB2蛋白的含量.结果 免疫组化显示nesfatin-1/NUCB2免疫阳性细胞在人、SD大鼠和ICR小鼠消化系统中的表达部位大致相似,主要分布于胰腺胰岛的中央;胃黏膜腺下1/3至中1/2的内分泌细胞及十二指肠黏膜下层的布氏腺中.在人、SD大鼠和ICR小鼠组织中均检测到了NUCB2蛋白的表达,但胰腺(分别为0.84±0.03、0.84±0.05和0.84±0.04)、胃(分别为0.86±0.06、0.81±0.02和0.78±0.02)及十二指肠(分别为0.79±0.09、0.79±0.04和0.78±0.05)处的NUCB2蛋白含量显著高于食管(分别为0.43±0.04、0.44±0.02和0.47±0.06)、肝(分别为0.42±0.01、0.44±0.04和0.43±0.01)、小肠(分别为0.32±0.04、0.32±0.04和0.34±0.04)及结肠(分别为0.29±0.01、0.32±0.03和0.28±0.03)中的蛋白含量(P值均=0.000).结论 nesfatin-1/NUCB2这种新的摄食调节肽广泛存在于人、SD大鼠及ICR小鼠的胰岛、胃黏膜腺内分泌细胞及十二指肠布氏腺中,提示其在外周摄食调节、碳水化合物代谢及胃肠功能的调节方面存在一定的功能. 展开更多
关键词 Nesfatin-1蛋白 Nucleobindin2蛋白 胰腺 十二指肠 BRUNNER腺 免疫组织化学
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环氧化酶-2和胰腺-十二指肠同源盒-1在非小细胞肺癌中的表达及意义 被引量:1
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作者 牛灵 廖如奕 戴月梅 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2011年第15期4367-4370,共4页
目的检测环氧化酶-2(COX-2)和胰腺-十二指肠同源盒-1(PDX-1)在非小细胞肺癌中的表达,探讨二者与非小细胞肺癌临床病理特征的关系,以期为临床工作提供理论支持。方法应用免疫组织化学技术检测88例非小细胞肺癌及88例正常肺组织中COX-2和P... 目的检测环氧化酶-2(COX-2)和胰腺-十二指肠同源盒-1(PDX-1)在非小细胞肺癌中的表达,探讨二者与非小细胞肺癌临床病理特征的关系,以期为临床工作提供理论支持。方法应用免疫组织化学技术检测88例非小细胞肺癌及88例正常肺组织中COX-2和PDX-1的表达,探讨COX-2和PDX-1与肿瘤分化程度及淋巴结转移的关系。结果非小细胞肺癌中COX-2和PDX-1表达的阳性率明显高于正常肺组织,COX-2和PDX-1的表达与非小细胞肺癌的分化程度及有无淋巴结转移密切相关,非小细胞肺癌中COX-2和PDX-1的表达呈正相关性。结论非小细胞肺癌中COX-2和PDX-1高表达,二者共同促进肿瘤的发生发展,联合检测COX-2和PDX-1可能与患者的预后有关。 展开更多
关键词 非小细胞肺 环氧化酶2 胰腺-十二指肠同源盒1 免疫组织化学
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棕榈酸对胰岛的脂毒性及非诺贝特的保护作用 被引量:38
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作者 张丽 高聆 +1 位作者 梁军 赵家军 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期155-158,共4页
目的 探讨棕榈酸对胰岛功能的影响和非诺贝特对棕榈酸所致胰岛脂毒性的保护作用及机制。方法 分离大鼠胰岛,分6组:对照组、棕榈酸0. 2mmol/L组(PA0. 2)和0. 4mmol/L(PA0. 4)组,非诺贝特组(FF, 5×10-6 mol/L)及PA0. 2+FF组、PA0. ... 目的 探讨棕榈酸对胰岛功能的影响和非诺贝特对棕榈酸所致胰岛脂毒性的保护作用及机制。方法 分离大鼠胰岛,分6组:对照组、棕榈酸0. 2mmol/L组(PA0. 2)和0. 4mmol/L(PA0. 4)组,非诺贝特组(FF, 5×10-6 mol/L)及PA0. 2+FF组、PA0. 4+FF组。培养24h分别测定基础胰岛素(BIS)和葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS);RT PCR或实时PCR测定胰岛素(INS)、胰腺十二指肠同源异型盒因子1 (PDX 1)、葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)和PPARαmRNA表达。结果 (1)与对照组比较PA0. 2组和PA0. 4组BIS增加,GSIS升高倍数减少,且PA0. 4组变化幅度更明显;FF组BIS、GSIS与对照组比较差异无统计学意义;PA0. 2+FF组比PA0. 2组BIS减少31%,GSIS增加29%;PA0. 4+FF组比PA0. 4组BIS减少56%,GSIS增加121%;PA0. 2+FF组与PA0. 4+FF组GSIS增加幅度低于对照组(均P<0. 05 )。( 2 )与对照组比较,PA0. 2组和PA0. 4组PDX 1、INS和GLUT2的表达降低(P<0. 05),但PPARα表达不受影响。(3)与PA0. 2组和PA0. 4组比较,PA0. 2+FF组、PA0. 4 +FF组的INS、GLUT2、PDX 1、PPARαmRNA表达增加(P<0. 05 )。结论 棕榈酸抑制胰岛GLUT2、INS、PDX 1mRNA表达,抑制胰岛素转录合成。非诺贝特增加PPARαmRNA表达,与棕榈酸共存时增强GLUT2、INS、PDX 1mRNA表达。 展开更多
关键词 棕榈酸 胰岛 脂毒性 非诺贝特 保护机制 药物治疗 糖尿病
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适量酒精对棕榈酸引起的胰岛β细胞功能损伤的保护作用
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作者 周玲雁 曹铭锋 +6 位作者 王海 冯丽 丁华 魏欣冰 陈文斌 高聆 赵家军 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2011年第7期9-14,共6页
目的观察酒精、棕榈酸对胰岛β细胞(INS-1细胞)功能的影响。方法 INS-1细胞分为对照组、20 mmol/L酒精(模拟适量饮酒)组、100 mmol/L酒精(模拟大量饮酒)组、0.2 mmol/L棕榈酸(PA)组、PA+20 mmol/L酒精组以及PA+100 mmol/L酒精组。作用4... 目的观察酒精、棕榈酸对胰岛β细胞(INS-1细胞)功能的影响。方法 INS-1细胞分为对照组、20 mmol/L酒精(模拟适量饮酒)组、100 mmol/L酒精(模拟大量饮酒)组、0.2 mmol/L棕榈酸(PA)组、PA+20 mmol/L酒精组以及PA+100 mmol/L酒精组。作用48 h后,采用放射免疫法检测糖刺激胰岛素的释放量,Westernblotting检测胰腺十二指肠同源异型盒因子1(PDX-1)、葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK,包括T-AMPK和P-AMPK)蛋白水平。结果①与对照组相比,20 mmol/L酒精对INS-1细胞无显著影响(P>0.05);100 mmol/L酒精组和PA组均下调了INS-1细胞PDX-1、GLUT2蛋白水平和胰岛素释放量(P均<0.05)。相对于单独PA组,20 mmol/L酒精和PA合用时显著增加细胞PDX-1、GLUT2蛋白水平和胰岛素释放量(P均<0.05)。100 mmol/L酒精和PA合用时则未出现这种现象(P>0.05);②与对照组相比,20 mmol/L酒精对细胞AMPK表达和活化无明显影响(P>0.05);100 mmol/L酒精仅仅下调AMPK表达(P<0.05);PA同时下调AMPK表达和活化(P<0.05)。当20 mmol/L酒精和PA合用时,可以改善由PA引起的AMPK表达和活化的下调(P<0.05);而100 mmol/L酒精与PA合用组则无明显变化(P>0.05)。结论大量酒精和PA均能损害INS-1细胞功能;适量酒精(20 mmol/L酒精)能够改善由棕榈酸引起的胰岛β细胞功能损伤。 展开更多
关键词 酒精 棕榈酸 胰腺十二指肠同源异型盒因子1 葡萄糖转运蛋白2 磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶
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