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番木瓜环斑病毒甜瓜分离物的基因组及其侵染性克隆
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作者 刘莉铭 彭斌 +3 位作者 康保珊 吴会杰 刘茜 古勤生 《中国瓜菜》 CAS 北大核心 2024年第2期8-14,共7页
番木瓜环斑病毒(papaya ringspot virus,PRSV)是瓜类作物主要病毒之一,分析了甜瓜分离物HaNHK10的基因组序列和分子变异,构建了具有侵染性的全长cDNA克隆。结果显示,HaNHK10分离物基因组全长为10332 nt,与其他分离物的核苷酸和氨基酸序... 番木瓜环斑病毒(papaya ringspot virus,PRSV)是瓜类作物主要病毒之一,分析了甜瓜分离物HaNHK10的基因组序列和分子变异,构建了具有侵染性的全长cDNA克隆。结果显示,HaNHK10分离物基因组全长为10332 nt,与其他分离物的核苷酸和氨基酸序列一致性分别为74.60%~97.80%和85.30%~98.50%。基于全基因组序列的系统进化分析显示,HaNHK10与来自中国的所有分离物均聚集于II组中,并与中国山东的西葫芦分离物PRSV-SD亲缘关系最近。接种试验显示,HaNHK10分离物的全长cDNA克隆具有侵染性,它能系统侵染甜瓜、黄瓜、西瓜、南瓜、西葫芦和瓠瓜6种作物,经接种产生的病毒后代也能够通过摩擦接种侵染植株。 展开更多
关键词 番木瓜环斑病毒 甜瓜分离物 基因组 侵染性克隆
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基因沉默番木瓜环斑病毒复制酶基因(PRSV-Nib)获得抗病毒病番木瓜的研究
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作者 吴清铧 贾瑞宗 +5 位作者 郭静远 杨牧之 胡玉娟 郝志刚 赵辉 郭安平 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期837-846,共10页
番木瓜是重要的热带经济水果。番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)是番木瓜的重要病毒病,经常导致严重的产量损失和质量恶化。自从1998年第一例转基因番木瓜问世以来,使得基于“致病菌衍生的抗病性(pathogen-derived resistanc... 番木瓜是重要的热带经济水果。番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)是番木瓜的重要病毒病,经常导致严重的产量损失和质量恶化。自从1998年第一例转基因番木瓜问世以来,使得基于“致病菌衍生的抗病性(pathogen-derived resistance,PDR)”的抗病育种策略获得成功广泛应用。然而依赖于序列同源性的抗病性与病毒突变导致多样性增加之间的矛盾成为番木瓜育种科学家的新挑战。本研究拟采用RNAi策略针对复制酶(nuclear inclusion b.Nib)获得广谱抗PRSV番木瓜新种质。通过团队已建立的胚性愈伤诱导-农杆菌介导转化-再生苗诱导的番木瓜遗传转化体系,共获得经过抗性筛选的再生苗52株,通过特异性PCR进行筛选共计获得24株转基因阳性植株。通过对T0代田间自然发病试验中,转基因番木瓜株系抗病性明显高于非转基因对照,其中NibB5-2田间抗病性最优。通过hiTAIL-PCR方法确定NibB5-2插入位点位于第2号染色体supercontig_30的1976766的位置。T1代接种试验中,无病毒积累且无发病症状,初步确认具有良好的病毒抗性,为番木瓜抗病育种提供新思路。 展开更多
关键词 番木瓜 番木瓜环斑病毒 Nib基因 RNA介导的病毒抗性
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利用酵母同源重组系统快速构建Potyvirus病毒侵染性克隆方法 被引量:1
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作者 赵光远 庹德财 +2 位作者 沈文涛 黎小瑛 周鹏 《生命科学研究》 CAS CSCD 2015年第6期491-496,共6页
前一个时期,虽然分子生物学技术有了相当大的进步,但在构建基因全长较大的RNA病毒时,例如马铃薯Y病毒属全长侵染性cDNA克隆或者是RNA体外转录物时,会遇到很大的困难,其cDNA转入大肠杆菌(E.coli)感受态细胞时,可能会产生对宿主菌有毒性... 前一个时期,虽然分子生物学技术有了相当大的进步,但在构建基因全长较大的RNA病毒时,例如马铃薯Y病毒属全长侵染性cDNA克隆或者是RNA体外转录物时,会遇到很大的困难,其cDNA转入大肠杆菌(E.coli)感受态细胞时,可能会产生对宿主菌有毒性的物质,从而导致非特异性重组。这些问题可以利用插入内含子等方法来解决,但这些方法大多耗时费力且成功率低。以番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)为例,介绍了在不插入内含子的情况下利用酵母同源重组系统在两周之内构建完成其侵染性克隆的方法。 展开更多
关键词 马铃薯Y病毒属 番木瓜环斑病毒 酵母同源重组 穿梭质粒 侵染性克隆
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Markers for Rapid Evaluation of Virus Resistance for TYLCV in Tomato, ZYMV and PRSV-W in Zucchini and LMV in Lettuce and Hybrid Seeds in Pumpkin 被引量:1
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作者 Haiko Enok Sawazaki Valdir Atsushi Yuki +6 位作者 Marlon Ricardo Alvez Ortiz Walter Hissao Banja Julio Massaharu Marubayashi Karoline S. Fonseca Geovanni A. Luchini Renan G. Perroni Wallison M. O. Andrade 《American Journal of Plant Sciences》 2018年第11期2205-2216,共12页
Screening for the source of virus resistance in horticultural plants or specific characterization as hybridization, through symptoms, requires time and depends on the weather and knowledge of plant characteristics. So... Screening for the source of virus resistance in horticultural plants or specific characterization as hybridization, through symptoms, requires time and depends on the weather and knowledge of plant characteristics. So, it is important to develop specific gene markers to allow rapid diagnosis by PCR. Markers were developed based on sequences homology comparison of susceptible and resistant plants provided by HORTEC SEEDS in tomato for Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV) by the resistance gene Ty-1, in zucchini for Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV) and Papaya ringspot virus estirpe watermelon (PRSV-W), and in lettuce for Lettuce mosaic virus (LMV). Fragments of 249 bp were amplified only by resistant plants to TYLCV as the hybrids 2648 and Aguamiel, and not for varieties as Santa Cruz or Carina. It were observed for ZYMV the amplification of 791 bp by the resistant hybrid Px7051 and not for the susceptible cultivar La Belle;for PRSV-W using the same zucchini plants the amplification of 650 bp for susceptible and 750 bp for resistant;for LMV the 421 bp amplification only for the resistant cultivar Brasil 303 and not for susceptible Babá de Ver&atilde;o. Finally, it was observed that primers PK47F/R were able to check the Cabotiá seed hybrids of pumpkin Jabras. 展开更多
关键词 TOMATO YELLOW Leaf Curl virus ZUCCHINI YELLOW MOSAIC virus papaya ringspot virus Strain Watermelon LETTUCE MOSAIC virus Jabras Hybridization
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Variation in the Coat Protein Gene of Papaya ringspot Virus Isolates from Multiple Locations of China 被引量:1
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作者 Jun-Ya Wei De-Bing Liu +1 位作者 Xiao-Ying Li Peng Zhou 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2007年第7期1062-1069,共8页
The potyvirus Papaya ringspot virus (PRSV) is an important pathogen of papaya that causes severe losses in economic crops for papaya production globally. The coat protein (CP) genes of five PRSV isolates originati... The potyvirus Papaya ringspot virus (PRSV) is an important pathogen of papaya that causes severe losses in economic crops for papaya production globally. The coat protein (CP) genes of five PRSV isolates originating from different locations in China were cloned and sequenced. The CP-coding region varied in size from 864-873 nucleotides, encoding proteins of 288-291 amino acids. The five Chinese isolates of PRSV have been characterized as papaya-infecting (PRSV-P). The CP sequences of the Chinese isolates were compared with those of previously published PRSV isolates originating from different countries at amino acid levels. A number of KE repeat boxes in the N terminus of the PRSV-CP were found in all Chinese isolates. The phylogenetic branching pattern revealed that there was certain extended grouping between geographic locations, and the Asian type probably represents the oldest population of PRSV. The information of CP genes will be useful in designing and developing durable virus resistant-PRSV transgenic papaya in China. Meanwhile broad-spectrum-virus resistant, strongly resistant-PRSV and good safe papaya lines are required. 展开更多
关键词 coat protein gene papaya ringspot virus isolates sequence analysis variation.
原文传递
番木瓜环斑病毒复制酶基因的克隆和序列分析 被引量:8
6
作者 叶长明 陈谷 +2 位作者 黄俊潮 于湄 李宝健 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第6期125-127,共3页
用RT-PCR技术从PRV-AL中分离到复制酶(RP)基因,将基因克隆进载体pUC18,用双脱氧链终止法测定了基因序列,表明其全长为1602bp,与国内外报道的HA5-1、YK和Sm的RP基因相比,同源性分别达82.... 用RT-PCR技术从PRV-AL中分离到复制酶(RP)基因,将基因克隆进载体pUC18,用双脱氧链终止法测定了基因序列,表明其全长为1602bp,与国内外报道的HA5-1、YK和Sm的RP基因相比,同源性分别达82.80%,95.07%和91.83%. 展开更多
关键词 番木瓜 环斑病毒 复制酶 基因 无性系 序列分析
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番木瓜环斑病毒畸叶株系的CP基因克隆和序列分析 被引量:6
7
作者 贺国安 肖火根 +2 位作者 张曙光 李华平 范怀忠 《中国病毒学》 CAS CSCD 2001年第4期369-372,共4页
采用RT PCR方法合成了本研究室保存的番木瓜畸叶病毒 (PMaLV)的外壳蛋白 (CP)基因 ,将其CP基因克隆进Promega公司的pGEM -TandpGEM -TEasyVectorSystem(简称T -载体 ) ,并进行了序列分析。结果表明 ,PMaLVCP基因核苷酸序列全长为 86 1nt... 采用RT PCR方法合成了本研究室保存的番木瓜畸叶病毒 (PMaLV)的外壳蛋白 (CP)基因 ,将其CP基因克隆进Promega公司的pGEM -TandpGEM -TEasyVectorSystem(简称T -载体 ) ,并进行了序列分析。结果表明 ,PMaLVCP基因核苷酸序列全长为 86 1nt,推导其编码 2 87个氨基酸。与番木瓜环斑病毒 (PRSV)美国夏威夷HA株系和澳大利亚W株系的CP基因相比 ,在第 6 6nt处开始连续缺失 3个核苷酸。与PRSV的华南Ys、Sm和G株系以及夏威夷的HA和澳大利亚的W株系相比 ,其CP基因序列同源率分别为 96 %、98%、95 %、89%和 89%。其推导的氨基酸序列同源率分别为 98%、97%、97%、96 %和 95 %。此结果表明 ,PMaLV属于PRSV的一个株系 ,不是一种新病毒。因此 ,我们称其为番木瓜环斑病毒畸叶株系 (ML株系 )。 展开更多
关键词 番木瓜畸叶病毒 番木瓜环斑病毒 番木瓜环斑病毒畸叶株系 CP基因克隆 序列分析
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转基因番木瓜抗病性测定和纯合系的获得 被引量:9
8
作者 冯黎霞 阮小蕾 +2 位作者 周国辉 张曙光 李华平 《仲恺农业技术学院学报》 CAS 2005年第4期12-15,20,共5页
分别对转番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)复制酶基因(Trp)的T3、T4代番木瓜(Carica pa-payaL.)品系在苗期进行攻毒试验和PCR分子生物学分析.结果表明,在苗期T3、T4代分子检测阳性株均高抗PRSV的Ys株系,证实Trp基因能够在后... 分别对转番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)复制酶基因(Trp)的T3、T4代番木瓜(Carica pa-payaL.)品系在苗期进行攻毒试验和PCR分子生物学分析.结果表明,在苗期T3、T4代分子检测阳性株均高抗PRSV的Ys株系,证实Trp基因能够在后代中稳定遗传.除品系Trp-6-2外,其它所有T3、T4代自交植株仍有基因分离.Trp-6-2的自交株和其T4杂交后代,苗期攻毒试验均表现抗病,PCR检测复制酶基因均为阳性,所转基因没有发生分离,可以初步推定Trp-6-2为转基因的纯合系.大田病情调查结果表明,T3代在定植田间的前5个月内,转基因植株均高抗PRSV.但在定植5个月后发现一个转基因品系38株中有3株表现发病. 展开更多
关键词 番木瓜(Carica papaya L.) 番木瓜环斑病毒(papaya ringspot virus PRSV) 转基因 抗病性测定
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番木瓜环斑病的空间分布及流行动态模糊聚类分析 被引量:9
9
作者 张德雍 王振中 范怀忠 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 1995年第4期27-31,共5页
以病样方率、平均样方病株数、扩散系数和聚块性指标等多数分析了番木瓜环斑病病株的田间分布类型,并利用模糊聚类方法初步探讨了此病的流行特征。结果表明病株在田间的分布随着时间的发展而变化。在流行初期,病株呈随机分布,随后呈... 以病样方率、平均样方病株数、扩散系数和聚块性指标等多数分析了番木瓜环斑病病株的田间分布类型,并利用模糊聚类方法初步探讨了此病的流行特征。结果表明病株在田间的分布随着时间的发展而变化。在流行初期,病株呈随机分布,随后呈聚集分布,到后期则趋于均匀分布。 展开更多
关键词 番木瓜 环斑病 病害 流行 空间分布 模糊聚类分
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花粉管通道法介导PRSV-CP基因dsRNA转化番木瓜 被引量:7
10
作者 魏军亚 刘德兵 +2 位作者 陈业渊 蔡群芳 周鹏 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期2159-2163,共5页
以番木瓜‘蔬罗Ⅰ号’植株为受体材料,采用花粉管通道技术将番木瓜环斑病毒外壳蛋白(PRSV-CP)基因3′-端同源序列dsRNA转入番木瓜子房中。用PCR方法对T0代种子进行了分子检测,获得53株转基因番木瓜,转化率达到8.9%;对获得的T0代转基因... 以番木瓜‘蔬罗Ⅰ号’植株为受体材料,采用花粉管通道技术将番木瓜环斑病毒外壳蛋白(PRSV-CP)基因3′-端同源序列dsRNA转入番木瓜子房中。用PCR方法对T0代种子进行了分子检测,获得53株转基因番木瓜,转化率达到8.9%;对获得的T0代转基因番木瓜进行了田间抗病性鉴定,结果表明,转基因番木瓜植株对番木瓜环斑病毒(PRSV)表现为不同程度的抗性,可以推迟发病。 展开更多
关键词 花粉管通道 DSRNA 番木瓜环斑病毒(PRSV)
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转基因番木瓜研究进展 被引量:25
11
作者 饶雪琴 李华平 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第6期38-42,共5页
番木瓜环斑病毒 (PRSV)使热带亚热带的重要水果番木瓜的生产受到严重影响 ,在众多方法防效不佳的情况下 ,利用病原获得抗性防治PRSV给番木瓜的生产带来了光明。综述了近年来转PRSVCP基因番木瓜中影响番木瓜转化因素和转基因番木瓜的抗... 番木瓜环斑病毒 (PRSV)使热带亚热带的重要水果番木瓜的生产受到严重影响 ,在众多方法防效不佳的情况下 ,利用病原获得抗性防治PRSV给番木瓜的生产带来了光明。综述了近年来转PRSVCP基因番木瓜中影响番木瓜转化因素和转基因番木瓜的抗性因素。转PRSV外壳蛋白 (CP)基因的番木瓜中多以胚性组织为转化材料 ,被转化材料的生理状态和基因型 ,是影响转化效率和转基因植株质量的主要因素。所获得的转基因番木瓜对PRSV的抗性在很大程度上依赖于接种PRSV与所转化PRSVCP基因的序列同源性、转基因拷贝数和所转基因的位置等。 展开更多
关键词 转基因 番木瓜 环斑病毒 外壳蛋白 抗性 胚性组织
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番木瓜畸型花叶病毒(PLDMV)调查鉴定 被引量:6
12
作者 贺国安 肖火根 +2 位作者 真冈哲夫 张曙光 范怀忠 《热带作物学报》 CSCD 2001年第2期38-42,共5页
对采自广州、景洪(云南)、海口(海南)的各17,24,13个番木瓜样品进行DAS-ELISA、RT-PCR和生物测定等分析鉴定,发现来自广州和海口的样品中有21个样品感染番木瓜环斑病毒(PRSV),而来自景洪的样品中... 对采自广州、景洪(云南)、海口(海南)的各17,24,13个番木瓜样品进行DAS-ELISA、RT-PCR和生物测定等分析鉴定,发现来自广州和海口的样品中有21个样品感染番木瓜环斑病毒(PRSV),而来自景洪的样品中未发现感染PRSV,在所有样品中都未发现感染有番木瓜畸型花叶病毒的。 展开更多
关键词 番木瓜 畸型花叶病毒 调查 鉴定 DAS-ELISA RT-PCR
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基于RNAi抗PRSV番木瓜株系的培育及其分子特征验证 被引量:5
13
作者 黄静 贾瑞宗 +3 位作者 孔华 郭静远 王绪朋 郭安平 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期513-520,共8页
根据RNAi原理构建的抗海南番木瓜环斑病毒(PRSV)植物表达载体p CAMBIA2300-35S-CP-RNAi-OCS,通过基因枪法将载体导入番木瓜的愈伤组织中,经卡那霉素抗性筛选后再分化成为植株。描述转化植株的分子特征同时进行抗病毒试验分析其抗病性。... 根据RNAi原理构建的抗海南番木瓜环斑病毒(PRSV)植物表达载体p CAMBIA2300-35S-CP-RNAi-OCS,通过基因枪法将载体导入番木瓜的愈伤组织中,经卡那霉素抗性筛选后再分化成为植株。描述转化植株的分子特征同时进行抗病毒试验分析其抗病性。实验结果显示:转基因株系474为单拷贝插入的杂合子,插入位点在第7号染色体supercontig_61的717 141位置;抗病毒试验中,在接种病毒后28 d内非转基因株系1280有高浓度的病毒积累并很快表现出明显的病症,而转基因株系474基本无病毒积累且无发病症状。表明转基因株系474具有较好的PRSV抗性,有待于进一步田间试验。 展开更多
关键词 番木瓜环斑病毒 番木瓜 RNAI
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番木瓜环斑病毒株系的生物学和血清学研究 被引量:9
14
作者 肖火根 范怀忠 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 1994年第3期50-54,共5页
本文对华南地区番木瓜环斑病毒(papayaRingspotvirus,PRV)的Ys、Vb和Sm3个株系和夏威夷HA5-1弱株系的生物学和血清学等进行了进一步的研究。确证了PRV在华南地区至少有3个株系。在株系间亲缘... 本文对华南地区番木瓜环斑病毒(papayaRingspotvirus,PRV)的Ys、Vb和Sm3个株系和夏威夷HA5-1弱株系的生物学和血清学等进行了进一步的研究。确证了PRV在华南地区至少有3个株系。在株系间亲缘关系方面,华南3个株系间的关系较密切,而与HA5-1株系的较疏远。在西葫芦植株体内增殖和运转方面,Sm株系病毒增殖和运转最快,在体内的浓度最高;Vb次之;Ys再次之;而HA5-1则更次之。 展开更多
关键词 番木瓜 环斑病毒 株系 生物学
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番木瓜环斑病毒融合基因植物表达载体的构建 被引量:14
15
作者 饶雪琴 李华平 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期325-329,共5页
利用PCR重叠延伸技术(genesplicingbyoverlapextension,SOE)将番木瓜环斑病毒(Papayaring-spotvirus,PRSV)Vb株系的外壳蛋白(coatprotein,CP)基因和Ys株系的复制酶(replicaseprotein,RP)基因构建成融合基因VY。同时对常规的SOE法进行了... 利用PCR重叠延伸技术(genesplicingbyoverlapextension,SOE)将番木瓜环斑病毒(Papayaring-spotvirus,PRSV)Vb株系的外壳蛋白(coatprotein,CP)基因和Ys株系的复制酶(replicaseprotein,RP)基因构建成融合基因VY。同时对常规的SOE法进行了改进,并对改进的SOE的反应体系进行了优化,其中以Py-robestDNA聚合酶和60℃的退火温度为最佳。将融合基因VY构建在植物表达载体pCAMBIA2300上,测序结果表明,该融合基因的序列与设计相符。融合基因VY植物表达载体的构建,可为进一步获得对PRSV广谱抗性的转基因番木瓜奠定基础。 展开更多
关键词 番木瓜 番木瓜环斑病毒 PCR融合基因 SOE法
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番木瓜环斑病毒PCR检测技术研究 被引量:23
16
作者 肖火根 胡晋生 范怀忠 《中国病毒学》 CAS CSCD 2000年第4期367-372,共6页
建立了检测番木瓜环斑病毒 (PRV)的免疫捕捉 PCR (IC PCR)法、ELISA PCR法和巢式 PCR法 ,它们分别能从 10 - 4、10 - 7和 10 - 14 稀释度的番木瓜叶粗汁液 (所含鲜叶组织的量分别 0 .5ug、0 .5ng和 5× 10 - 6ng)中检测出PRV。
关键词 番木瓜环斑病毒 免疫捕捉-PCR法 检测技术
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番木瓜环斑病毒海南分离株全基因组序列分析 被引量:4
17
作者 卢雅薇 沈文涛 +2 位作者 唐清杰 牛艳梅 周鹏 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期152-154,共3页
Total RNA was extracted from infected papaya(Carica papaya L.) leaves in Hainan Province, and the full-length sequences of papaya ringspot virus were amplified by RT-PCR and RACE, and its complete genomic sequence was... Total RNA was extracted from infected papaya(Carica papaya L.) leaves in Hainan Province, and the full-length sequences of papaya ringspot virus were amplified by RT-PCR and RACE, and its complete genomic sequence was assembled,named Hainan-P isolate.The RNA genome sequence of Hainan-P isolate was 10323 nucleotides (nts)in length,excluding the 3’-terminal poly(A) tail. And it was composed of a single open reading frame encoding a polyprotein of 3343 amino acids. The result of homology analysis with twelve GenBank PRSV isolates showed that the polyprotein identity of Hainan-P ranged from 89.8% to 93.2%, that was higher than the complete nt homology of 82.3% to 89.1%. The P1 amino acid was the least conserved( sharing homology only between 65.4% and 80.1%), whereas HC-Pro,CI and CP were the most conserved. Phylogenetic tree were constructed by the Neighbor-joining method in MEGA 3.1, which showed that PRSV isolates were obviously relevant to geographical origin,and it was impossible to delineate host-specific (P type and W type)evolution. 展开更多
关键词 番木瓜环斑病毒 全基因组 同源性 系统进化树
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番木瓜环斑病毒株系间交互保护作用研究 被引量:9
18
作者 肖火根 范怀忠 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期164-171,共8页
本文进一步证明了番木瓜环斑病毒(PapayaRingspotVirus,PRV)株系间有交互保护作用,并首次研究了它的机理。保护株系不能完全阻止攻击株系侵入受保护的植株,也不能阻止攻击株系在植株体内的运转,但能抑制攻... 本文进一步证明了番木瓜环斑病毒(PapayaRingspotVirus,PRV)株系间有交互保护作用,并首次研究了它的机理。保护株系不能完全阻止攻击株系侵入受保护的植株,也不能阻止攻击株系在植株体内的运转,但能抑制攻击株系的增殖,PRV株系间的交互保护作用程度与它们之间的亲缘关系呈正相关,华南株系间的交互保护作用较强,能维持至少60天(在西葫芦苗上)或120天(在番木瓜苗上),而夏威夷HA5-1株系对华南各株系的保护作用较差,只能维持23天(在西葫芦苗上)或20-50天(在番木瓜苗上)。在亲缘关系较密切的华南株系间的交互保护作用程度则与保护株系病毒在植株体内运转和增殖速率、增植量大小呈正相关,而与攻击株系在植株内运转和增殖速率、增殖量大小呈负相关。上述结果表明,各个国家和地区在筛选或诱变筛选PRV弱株系及应用外壳蛋白的基因工程来防治番木瓜环斑病时,必须选用当地的优势株系或强株系,其效果较为理想。 展开更多
关键词 番木瓜 环斑病毒 交互保护作用
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植物组织粗汁液中的番木瓜环斑病毒的ELISA检测技术 被引量:23
19
作者 肖火根 范怀忠 《中国病毒学》 CAS CSCD 1994年第3期249-255,共7页
本研究建立和改进了检测番木瓜和西葫芦组织粗汁液里的番木瓜环斑病毒(PRV)的DAC-ELISA法和Dot-ELISA法。用不同的ELISA方法来检测不同寄主植物粗汁液里的PRV,其所用的合适的制备粗汁液的缓冲液是不同... 本研究建立和改进了检测番木瓜和西葫芦组织粗汁液里的番木瓜环斑病毒(PRV)的DAC-ELISA法和Dot-ELISA法。用不同的ELISA方法来检测不同寄主植物粗汁液里的PRV,其所用的合适的制备粗汁液的缓冲液是不同的。用DAC-ELISA法检测西葫芦粗汁液时,以0.5mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.5,内含0.1mol/L乙二胺四乙酸二钠)为宜;而检测番木瓜粗汁液时,则还要加入0.25mol/L脲。用Dot-ELISA法检测时,在上述磷酸盐缓冲液中加入2%聚乙烯吡咯烷铜能提高对西葫芦粗汁液的检测效果。应用合适的制备粗汁液的缓冲液,DAC-ELISA法和Dot-ELISA法的灵敏度分别提高到1/4096和1/1024(稀释度)。本研究还表明,影响DAC-ELISA法的定过测定的主要因素是粗汁液的稀释度和包被液(0.05mol/L碳酸盐缓冲液,pH9.6)的用过。在较高粗汁液稀释度和包被液的用量相同时,粗汁液里的病毒含量与DAC-ELISA法的OD492nm值呈真实的线性关系。 展开更多
关键词 番木瓜 环斑病毒 ELISA 检测
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番木瓜环斑病毒复制酶(亚基)基因的克隆、序列分析及其植物表达载体的构建 被引量:8
20
作者 刘俊君 彭学贤 莽克强 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期283-287,共5页
近二年报道,在TMV、PVX、PEBV和CMV等病毒中,利用病毒编码的复制酶(亚基)基因或相关cDNA片段转化烟草,工程植株获得绝对或极高的病毒抗性。大量研究认为:马铃薯Y病毒组的核内含体大分子量蛋白(NIb)是依赖于RNA的RNA复制酶(或核心亚基),... 近二年报道,在TMV、PVX、PEBV和CMV等病毒中,利用病毒编码的复制酶(亚基)基因或相关cDNA片段转化烟草,工程植株获得绝对或极高的病毒抗性。大量研究认为:马铃薯Y病毒组的核内含体大分子量蛋白(NIb)是依赖于RNA的RNA复制酶(或核心亚基),NIb与上述病毒的复制酶有广泛的同源保守区。 展开更多
关键词 番木瓜 环斑病毒 复制酶基因
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