质粒平均分配基因parDE对甲酸脱氢酶NADH再生系统稳定性的影响

将质粒平均分配基因parDE引入重组质粒pDK7-fdh(携带甲酸脱氢酶基因fdh)中,得到基因重组菌F6.考察了F6与未引入parDE基因的基因重组菌FY(含重组质粒pDK6-fdh)和F-1(含重组质粒pMAL-p2X-fdh)的质粒遗传稳定性及甲酸脱氢酶活性的差异.结果显示,F6传代160代后,仅有3%的菌质粒丢失,而基因重组菌F-1和FY(均只携带fdh基因)传代160代后,丢失质粒的菌分别占93%和78%.传代160代后,F6的甲酸脱氢酶比酶活为2.77U/mg,比传代前降低1.77%,FY为2.02U/mg,F-1与野生型菌株M5al相近,为1.33U/mg.结果表明,引入parDE基因的基因重组菌质粒稳定性和甲酸脱氢酶活性均远高于未引入parDE基因的基因重组菌。

PARD3B、HNT基因多态性与宁夏人群高血糖的相关性研究

目的探讨PARD3B基因rs849230及HNT基因rs3099797位点单核苷酸多态性与宁夏地区人群高血糖之间的相关性。方法 1)选取宁夏2型糖尿病患者及糖代谢异常者300例为高血糖病例组,血糖正常人群300例为对照组,两组人群同性别、同民族、同年龄(±3岁)、同居住地。并记录血压、体重、身高、腰围、臀围、空腹血糖、空腹胰岛素、血脂等临床指标。2)采用上海天昊生物科技有限公司的改进的多重高温连接酶检测反应技术(improved multiple ligase detection reaction,i MLDR)检测高血糖组和对照人群的rs849230、rs3099797位点的单核苷酸多态性,运用SPSS 17.0软件对两组样本各项数据进行统计学分析,基因交互作用采用多因子降维法分析。结果 1)高血糖组和对照组的性别、民族、年龄、文化程度、身高、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、空腹胰岛素差异均无统计学意义(P均>0.05),但是两组的体重、腰围、臀围、收缩压、舒张压、体质指数、总胆固醇、甘油三酯和胰岛素抵抗指数差异具有统计学意义(P<0.01)。2)PARD3B基因rs849230位点AA、AG+GG基因型频率在高血糖组和对照组中分别为94.0%、6.0%和93.0%,7.0%,等位基因频率分别为97.0%、3.0%和96.3%、3.7%;HNT基因rs3099797位点CC、CT+TT基因型频率在两组中分别为87.2%、12.8%和82.9%,17.1%,等位基因频率为93.3%、6.7%和91.1%、8.9%,两位点基因型和等位基因分布在两组中差异均无统计学意义(P>0.05)。回、汉民族两组两位点的基因型和等位基因分布差异亦无统计学意义(P>0.05),MDR分析两位点无交互作用(P>0.05)。结论尚不能认为HNT(rs3099797)、PARD3B(rs849230)基因多态性与宁夏回、汉人群的高血糖的易感性有关。

par DE基因对重组质粒pLM2在Enterobacter gergoviae 57-7中稳定性的影响

将 parDE基因克隆到载有组成型表达nifA基因的质粒 pST10 2 1上 ,得到重组质粒pLM2 .将 pLM2 ,pST10 2 1分别转到玉米联合固氮菌Enteorbactergergoviae 5 7 7(E5 7 7) ,获得转化子E5 7 7(pLM2 ) ,E5 7 7(pST10 2 1) ,二者在c(NH+ 4 ) =5 0mmolL-1的Kp培养基中表达的固氮活性一致 .将pLM2 ,pST10 2 1分别转到E .coliDH5α(pMGFP2 .1) ,培养物用 4 88nm光激发后在 5 10nm均有相同的的荧光特征发射峰 .上述实验表明 ,重组质粒pLM2仍保留了原质粒pST10 2 1中nifA的功能 .但质粒 pLM2和 pST10 2 1在E5 7 7中的稳定性试验表明 ,E5 7 7(pST10 2 1)在无抗生素的LB中继代培养 70代后 ,质粒几乎全部丢失 (仅存 1% ) ;而E5 7 7(pLM2 )继代培养 10 0代后 ,质粒全部存在 (10 0 % ) .图 4表 1参