云南勐腊地区微小按蚊钠通道序列分析

微小按蚊Anophelesminimus是云南省勐腊地区的重要传疟媒介，DDT和拟除虫菊酯类杀虫剂在该地区长期大量使用，研究微小按蚊与kdr抗性密切相关的para型钠通道基因对该地区选择合理的媒介控制方案预防和阻断疟疾的流行提供理依据。本文分别于2010和2011年9～10月在云南省勐腊县龙塘村和东方红村现场采集微小按蚊后，用分子学方法进行分型，根据GenBank发布的微小按蚊para钠通道IIS6段基因组DNA序列设计特异性引物，扩增现场采集的微小按蚊的该段基因，并测序对比。通过对415个个体的检测发现，1014位点编码的TTA氨基酸密码子没有突变，说明截止目前云南勐腊地区微小按蚊对DDT和拟除虫菊酯类杀虫剂抗性的kdr分子机制尚未出现，其击倒抗性较低，对DDT和拟除虫菊酯类杀虫剂仍然保持敏感。

抗性家蝇para基因的选择性剪接和位点突变

为了在分子水平上研究拟除虫菊酯抗性家蝇靶标抗性机制 ,根据昆虫para型钠通道Ⅱ区S4至S6及Ⅱ与Ⅲ连接区的保守区域 ,设计简并引物 ,利用降落RT PCR ,克隆拟除虫菊酯kdr (R品系 )家蝇para型钠通道 70 4bp的cDNA ,根据此序列用PrimerPremier5 0设计特异引物 ,分别扩增敏感 (SS品系 )、super kdr(RR品系 )家蝇各 6 5 1bp的cDNA。结果SS无有义突变 ,R和RR在ⅡS6CTT到TTT的替换导致Leu 10 14到Phe的保守性突变 ,RR在ⅡS 4～ 5细胞内片段接头处没有与超 -kdr抗性相关的Met到Thr突变 ;另外首次发现kdr (R品系 )家蝇在Ⅱ与Ⅲ连接区出现 39bp的选择性剪接 ,构成家蝇para钠通道亚型 (命名为xych ,GenBank登陆号为AF4 114 5 2 )。